質量顕微鏡法による精神神経疾患脳における脂質‐炎症相互連関の解明

使用质量显微镜阐明神经精神大脑中脂质与炎症的相互关系

基本信息

批准号：
14J05334
负责人：
近藤豪
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Hamamatsu University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

精神神経疾患の発症・増悪の分子メカニズムを、脳内メタボロームと炎症応答が与える影響の面から解明することを目的とし、統合失調症とアルツハイマー病を主な対象として研究を進めた。統合失調症プロジェクトについてはこれまでに引き続き、作用機序が不明である抗精神病薬の作用メカニズムを明らかにする視点で研究を進めた。超解像イメージング技術を用いることで、標的候補分子の細胞内局在に対して抗精神病薬が与える影響を評価した。マウス神経細胞の初代培養系を用いて、樹状突起のスパイン形成への影響を評価した。さらにマウスに薬剤を投与し、in vivoでの脳内におけるスパインへの影響も評価した。今年度AMED-CREST研究開発の一環として導入されたイオンサイクロトロン-フーリエ変換型質量分析機を使用し、これまで得られていた結果を更に高い精度で得ることに成功した。これらの結果をもとに論文を執筆し、現在国際科学誌へ投稿中である。さらに本論文で新たに示した質量顕微鏡法の変法については、浜松医科大学を通じて特許を出願した。また福島県立医大との共同研究ある統合失調症患者死後脳のリピドミクス解析、ならびに熊本大学との共同研究による死後脳プロテオミクス解析については、投稿した論文がともに科学誌に受理された。アルツハイマー病プロジェクトについては、p47タンパク質の機能解明を中心に進めた。In vivoでの機能評価のためCRISPR-Cas9システムを用いたノックアウトマウスの作製を進めた。受精卵へのマイクロインジェクションの実験系立ち上げは時間的に難しいため外部受託サービスを利用したが、技術的な問題から遺伝子が破壊されたマウスが得られなかった。現在開発している技術でこの問題は打開できると考えられるので、神経変性疾患の理解につながる知見として、将来的に何らかの形で発表することを目指す。

本研究的目的是从大脑代谢组和炎症反应的影响角度阐明神经精神疾病发病和恶化的分子机制，主要关注精神分裂症和阿尔茨海默病。至于精神分裂症项目，我们继续进行研究，目的是阐明抗精神病药物的作用机制，但其机制尚不清楚。通过使用超分辨率成像技术，我们评估了抗精神病药物对候选靶分子亚细胞定位的影响。使用小鼠神经元的原代培养系统，我们评估了对树突棘形成的影响。此外，他们还给小鼠注射了这种药物，并在体内评估了它对大脑脊柱的影响。使用今年AMED-CREST研发中引入的离子回旋-傅里叶变换质谱仪，我们成功地以更高的精度获得了迄今为止所获得的结果。根据这些结果撰写了一篇论文，目前正在提交给国际科学期刊。此外，我们还通过滨松大学医学院为本文新演示的改良质量显微镜方法申请了专利。此外，与福岛医科大学联合研究项目精神分裂症患者死后脑脂质组学分析、与熊本大学联合研究项目死后脑蛋白质组学分析的论文均被科学期刊接收。关于阿尔茨海默病项目，我们重点阐明p47蛋白的功能。我们继续使用 CRISPR-Cas9 系统生成基因敲除小鼠，进行体内功能评估。由于建立受精卵显微注射实验系统非常耗时，他们使用了外包服务，但由于技术问题，他们无法获得基因被破坏的小鼠。人们认为，目前正在开发的技术可以克服这个问题，因此我们的目标是在未来以某种形式将其作为知识发布，以促进对神经退行性疾病的理解。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Decreased 16:0/20:4-phosphatidylinositol level in the post-mortem prefrontal cortex of elderly patients with schizophrenia.

DOI：
10.1038/srep45050
发表时间：
2017-03-23
期刊：
Scientific reports
影响因子：
4.6
作者：
Matsumoto J;Nakanishi H;Kunii Y;Sugiura Y;Yuki D;Wada A;Hino M;Niwa SI;Kondo T;Waki M;Hayasaka T;Masaki N;Akatsu H;Hashizume Y;Yamamoto S;Sato S;Sasaki T;Setou M;Yabe H
通讯作者：
Yabe H

標的物質と親和性の高い物質をスクリーニングする方法

筛选与目标物质具有高亲和力的物质的方法