生体分子/層状複水酸化物複合体の創製と新規非ウィルスベクターへの応用

生物分子/层状双氢氧化物复合物的创建及其在新型非病毒载体中的应用

基本信息

批准号：
18750176
负责人：
會澤純雄
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Iwate University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

近年,生体分子/層状複水酸化物(LDH)複合体は,LDHの生体親和性を活用した分子コンテナーおよびドラッグデリバリー剤への応用に関する基礎研究が行われている.一方,ペプチドは,細胞,ホルモン,酵素を構成し,生体内において重要な機能を担っており,最近では臓器選択性やガン細胞選択性を持つペプチドが発見されている.本年度は,平成18年度に合成したペプチド/Zn-Al系LDH複合体,CO_3/Mg-AlおよびZn-Al系LDHの細胞毒性を調べることにより,LDHの生体適合性を評価し,ペプチド/Zn-Al系LDHの非ウィルスベクターとしての評価を行った.その結果,L929細胞はペプチド/Zn-Al系LDH添加量の増加に伴い,細胞増殖が抑制されることが明らかとなった.一方,CO_3/Mg-Al系LDHについても,細胞毒性試験を試みたが,細胞増殖を抑制する作用は観察されなかった.つぎに,ペプチドによりCO_3/Zn-Al系LDHの表面を修飾した,ペプチド修飾/CO_3/Zn-Al系LDHについて検討したところ,細胞増殖が抑制されることがわかった.このことから,ペプチドの取り込みおよび表面修飾したLDHは,細胞ヘエンドサイトーシスにより取り込まれやすくなり,エンドソーム内において溶解することが示唆された.LDHの溶解にともない,細胞内液にZn^<2+>が放出され,細胞内の陽イオンのバランスが崩れ,細胞増殖が抑制されると考えられた.現在,細胞内のZn^<2+>の含有量については定量を行なっていないため,今後,検討が必要である.以上の結果から,生体分子/Zn-Al系LDHの合成に成功し,その細胞毒性を明らかにした.さらに,ペプチド/Zn-Al系LDHは,細胞毒性を発現したが,細胞内へのLDHのエンドサイトーシスがペプチドによって促進されたことから,新しい非ウィルスベクターへの応用が期待できる.

近年来，利用LDH的生物相容性，将生物分子/层状双氢氧化物（LDH）复合物应用于分子容器和药物递送剂中进行了基础研究。它在生物体中发挥着重要的作用，最近发现了具有器官选择性和癌细胞选择性的肽CO_3/Mg-Al。通过检查LDH和Zn-Al基LDH的细胞毒性，我们评估了LDH的生物相容性，并评估了肽/Zn-Al基LDH作为非病毒载体。可知随着H添加量的增加，细胞增殖受到抑制。另一方面，也尝试了CO_3/Mg-Al系LDH的细胞毒性试验，但没有观察到细胞增殖抑制效果。肽，C当我们研究肽修饰/CO_3/Zn-Al基LDH（一种表面修饰的O_3/Zn-Al基LDH）时，我们发现细胞增殖受到抑制，这表明LDH很容易被细胞摄取。随着LDH的溶解，Zn^2+被释放到细胞内液中，细胞内的阳离子被释放，平衡被破坏。认为细胞增殖受到抑制。目前，细胞中Zn^2+的含量尚未定量，因此需要进一步研究Zn-Al基LDH的成功合成及其细胞毒性。此外，虽然基于肽/Zn-Al的LDH表现出细胞毒性，但该肽促进了LDH向细胞的内吞，这表明其在新的非病毒载体中的应用是值得期待的。