タンパク質相互作用を制御する天然生理活性物質に関する研究

控制蛋白质相互作用的天然生理活性物质的研究

• 批准号: 07F07627
• 负责人: 新家 一男
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07627/
• 关键词: タンパク質相互作用; 蛍光補完法; 天然化合物; スクリーニング; プロテアソーム形成; 癌

本年度は、蛍光タンパク質を応用した蛍光補完法(Fluorescence complementation assay)を用いて、8種類のタンパク質相互作用制御物質のスクリーニングを行った。小麦胚を用いた無細胞系タンパク質合成法により調製したタンパク質を用いたin vitro系を用いて、各スクリーニング15万〜22万個の天然物ライブラリーを用いてスクリーニングを行った。その結果、プロテアソームアッセンブリファクターであるPAC1/PAC2の相互作用阻害物質として、マクロライド系化合物であるconcanamycin類を得た。Concanamycin類化合物中、18員環マクロライドであるTAN1323Dが、IC_<50>値50μMと比較的強い相互作用阻害活性を示したが、幾つかの評価系に対して相互作用阻害活性を検討した結果、ある程度の選択性はありながら多くのアッセイ系において阻害活性を示した。次に、プロテアソームアッセンブリファクターであるPAC3のダイマー化阻害剤として、TB1を見出した。本化合物は、IC_<50>値15nMと強力にPAC3のホモダイマー化を阻害することが判明した。本化合物については、他研究機関との共同研究により、インシリコモデリングを行うと共に、有機合成による誘導体調製を進めている。この他に、トリコセチン誘導体新規化合物を見出した。現在、これらの化合物について、細胞レベルでのプロテアソーム形成阻害活性を検討中である。この他、FOXO/PP2A5E、AKT1/PRAU40など数種のアッセイ系において、それぞれ数個の活性物質を単離した。現在、これらの化合物について、高次な系での評価を継続中である。

今年，我们利用荧光蛋白的荧光互补测定筛选了八种类型的蛋白质相互作用调节剂。使用含有150,000至220,000种天然产物的文库进行筛选，每次筛选均使用体外系统，使用通过使用小麦胚的无细胞蛋白质合成方法制备的蛋白质。结果，获得了作为大环内酯化合物的刀那霉素作为蛋白酶体组装因子PAC1/PAC2的相互作用抑制剂。在刀那霉素化合物中，18元环大环内酯TAN1323D表现出较强的相互作用抑制活性，IC_<50>值为50μM，但在多个评价系统中检测相互作用抑制活性的结果表明，在许多测定系统中均显示出抑制活性，尽管具有一定程度的选择性。接下来，我们发现 TB1 作为 PAC3（一种蛋白酶体组装因子）的二聚化抑制剂。发现该化合物强烈抑制PAC3同二聚化，IC_ 50 值为15nM。对于该化合物，我们正在通过与其他研究机构的联合研究进行计算机模拟，并正在进行有机合成衍生物的制备。此外，我们还发现了一种新的三cocetin衍生化合物。我们目前正在细胞水平上研究这些化合物的蛋白酶体形成抑制活性。此外，在 FOXO/PP2A5E 和 AKT1/PRAU40 等多种检测系统中分离出了多种活性物质。目前，我们正在继续在高阶系统中评估这些化合物。

项目成果

新規化合物JBIR-23の中皮腫細胞に対する殺細胞活性発現メカニズムに関する報告

新化合物JBIR-23抗间皮瘤细胞杀细胞活性表达机制报道

• 发表时间: 2009
• 作者: J.

小胞体ストレス応答阻害剤を用いたがん細胞における遺伝子発現解析

使用内质网应激反应抑制剂对癌细胞进行基因表达分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 齋藤 さかえ

JBIR-23 and -24, novel anticancer agents from Streptomyces sp. AK-AB27

JBIR-23 和 -24，来自链霉菌属的新型抗癌剂。

• 发表时间: 2009
• 作者: K. Motohashi; J.
• 通讯作者: J.

Etoposide‐resistant HT‐29 human colon carcinoma cells during glucose deprivation are sensitive to piericidin A, a GRP78 down‐regulator

葡萄糖剥夺期间依托泊苷耐药的 HT29 人结肠癌细胞对 GRP78 下调调节剂 piericidin A 敏感

• DOI: 10.1002/jcp.21308
• 发表时间: 2008-04-01
• 期刊: Journal of Cellular Physiology
• 影响因子: 5.6
• 作者: Ji‐Hwan Hwang;Ju;Mi;I. Ryoo;Soo;Sung;Yoshinori Tsukumo;A. Tomida;K. Shin‐ya;Y. Hwang;I. Yoo;Hae‐Ryong Park
• 通讯作者: Hae‐Ryong Park

Relative and absolute configuration of versipelostatin, a down-regulator of molecular chaperone GRP78 expression.

Versilostatin（分子伴侣 GRP78 表达的下调剂）的相对和绝对构型。

• 发表时间: 2007
• 作者: Hae.