AID変異体ノックインマウスを用いたAIDの生理病態機構解明

使用AID突变基因敲入小鼠阐明AID的生理和病理机制

基本信息

批准号：
07F07460
负责人：
本庶佑
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07460/
关键词：
抗体クラススイッチ AID 体細胞突然変異

项目摘要

抗体産生応答においてAID(activation-induced cytidine deaminase)の2つの活性、すなわち体細胞突然変異とクラススイッチ組換えの両者が効率良く外敵を排除するために重要であるが、体細胞突然変異単独の寄与は動物モデルがなかったため明らかでなかった。そこで体細胞突然変異の生体内での重要性を検討するため、体細胞突然変異を特異的に消失するAIDのN末mutant(G23S)のノックインマウスを作製し、生体防御とくに腸管免疫における意義を検討した。G23SノックインマウスではIgG,IgA,また腸管内にIgAの分泌が認められ、クラススイッチはほぼ正常である一方、体細胞突然変異は有意に減少していた。AIDノックアウトマウスと類似の表現型、脾臓やパイエル板の胚中心の過形成が認められたが、その程度は常にノックアウトと野生型マウスの中間を示した。この過形成の原因は今まで報告されてきたようにクラススイッチの障害、IgAやIgGの欠失によるものであることを否定できないが、G23Sマウスの結果から体細胞突然変異の減少による寄与も重要であることがはじめて明らかになった。コレラ毒素に対する防御反応はG23Sノックインマウスで有意に低下していた。つまり体細胞突然変異の減少は病原体排除能の低下だけでなく、リンパ組織の過形成などの免疫異常にも寄与していることが明らかになった。これらの結果は現在論文投稿準備中である。

在抗体产生反应中，AID（激活诱导胞苷脱氨酶）的两种活性，即体细胞突变和类别转换重组，对于有效消除外敌都很重要，但由于体细胞突变单独的贡献尚不清楚。由于缺乏动物模型。因此，为了研究体内体细胞突变的重要性，我们培育了具有特异性消除体细胞突变的AID N末端突变体（G23S）的敲入小鼠，并研究了它们在生物防御，特别是肠道免疫中的意义。考虑了一下。 G23S敲入小鼠在肠道中分泌IgG、IgA和IgA，虽然类别转换几乎正常，但体细胞突变显着减少。虽然观察到与AID基因敲除小鼠相似的表型，并且观察到脾脏和派尔氏集区生发中心增生，但增生程度始终介于敲除小鼠和野生型小鼠之间。尽管不能否认，这种增生的原因是由于 IgA 和 IgG 的类别转换受损和缺失，正如迄今为止所报道的那样，但 G23S 小鼠的结果表明，体细胞突变减少的贡献也很重要。第一次变得清晰起来。 G23S 敲入小鼠对霍乱毒素的保护反应显着降低。换句话说，我们已经清楚，体细胞突变的减少不仅会导致消除病原体的能力下降，还会导致淋巴组织增生等免疫异常。这些结果目前正在准备发表。