前立腺癌における転写因子Sp1およびSp3の機能解析

前列腺癌转录因子Sp1和Sp3的功能分析

基本信息

批准号：
18791125
负责人：
秦聡孝
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Oita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791125/
关键词：
前立腺癌 PSA Sp1 Sp3

项目摘要

前立腺全摘標本を用いて前立腺癌組織におけるPSAおよびSp1の蛋白発現を術前ホルモン療法(以下、NHT)の有無を考慮しつつ、免疫組織化学にて検討した。NHTを行なった群、行わなかった群の患者背景に大きな差はなかった。パラフィン包埋切片を用い免疫染色を行い、スコアリングした。その結果、PSAはNHTにより組織全体的に陽性率が低下するが、正常部ではより強く抑えられていた。一方癌部ではアンドロゲン除去後にも関わらず、残存する腫瘍組織にPSA陽性癌細胞が認められた。Sp1についてもNHT前は正常部・癌部で陽性率に差はなかったが、NHT後では残存癌細胞で陽性率が高かった。以上の結果より、NHT後に残存する前立腺癌細胞のPSA産生にSp1が関与する可能性が示唆された。胃癌や膵癌においてSp1は血管新生因子VEGFの産生を亢進させ癌の増殖に関与している。そこで、前立腺癌細胞において、Sp1がVEGFや血管新生因子adrenomedullin、転移・浸潤に関与するMMP2、MMP9の発現に影響を与えるか否かを検討した。前立腺癌細胞株LNCaP、PC3を用い、Sp1 expression vectorをlipofection法にてtrasnfectし、Sp1を過剰発現させた。mRNAを回収し、Real-time PCRを用いてSp1のVEGF、adrenomedullin、MMP2、MMP9のmRNA levelへの影響を検討した。VEGFのmRNA発現は、LNCaPで高く、PC-3では低かったが、いずれにおいてもSp1過剰発現による有意な変化は認められなかった。ほかの3分子についても同様に有意な変化は認められなかった。以上の結果より、前立腺癌においてSp1がVEGFやadrenomedullin、MMP2、MMP9の産生を亢進させ癌の増殖に関与している可能性は否定的であると思われた。

使用根治性前列腺切除术标本，我们通过免疫组织化学研究了前列腺癌组织中 PSA 和 Sp1 的蛋白表达，同时考虑了术前激素治疗 (NHT) 的存在与否。接受 NHT 治疗组和未接受 NHT 治疗组的患者背景没有重大差异。使用石蜡包埋切片进行免疫染色并进行评分。结果，NHT 降低了组织中 PSA 的阳性率，但在正常区域受到更强烈的抑制。另一方面，在癌变区域，即使在去除雄激素后，在剩余的肿瘤组织中也观察到PSA阳性癌细胞。对于Sp1，NHT前正常区域和癌变区域的阳性率没有差异，但NHT后残留癌细胞的阳性率较高。这些结果表明 Sp1 可能参与 NHT 后剩余的前列腺癌细胞中 PSA 的产生。在胃癌和胰腺癌中，Sp1 增强血管生成因子 VEGF 的产生并参与癌症生长。因此，我们研究了Sp1是否影响前列腺癌细胞中参与转移和侵袭的VEGF、血管生成因子肾上腺髓质素以及MMP2和MMP9的表达。使用前列腺癌细胞系LNCaP和PC3，使用脂转染方法转染Sp1表达载体以过表达Sp1。收集 mRNA，并使用实时 PCR 检查 Sp1 对 VEGF、肾上腺髓质素、MMP2 和 MMP9 mRNA 水平的影响。 VEGF mRNA 表达在 LNCaP 中较高，而在 PC-3 中较低，但由于 Sp1 过表达，两种情况下均未观察到显着变化。同样，其他三个分子也没有观察到显着变化。从以上结果来看，Sp1增强前列腺癌中VEGF、肾上腺髓质素、MMP2和MMP9的产生并参与癌症生长的可能性似乎是阴性的。