顆粒球分化の調節機構の解明:未分化性を標的とした新たな抗腫瘍療法を目指して

阐明粒细胞分化的调控机制：瞄准未分化细胞的抗肿瘤新疗法

• 批准号: 18790708
• 负责人: 中村 誠
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790708/
• 关键词: 顆粒球分化; Notch 1シグナル; MAML 1; GATA 2; C; EBPα; PU.1; Notchシグナル; MAML1

造血細胞の運命決定や分化の多くの場面は,Notchシグナルを介した調節機構により制御されている。リンパ球系に関しては,Notch1シグナルがBリンパ球への分化を阻害し,Tリンパ球への分化を誘導することが報告されている。我々は,Notch1シグナルの増強により顆粒球の分化が遅延すること,それにはNotch1の共役因子MAML1を必要とし,転写因子GATA2の誘導を伴うことを報告した。顆粒球の分化は,PU.1やCCAAT/Enhancer-binding Protein α(C/EBPα)などの転写因子により誘導されることから,Notch1-MAML1-GATA2シグナルのPU.1やC/EBPαに対する影響を検討し,以下の2点が明らかとなった。(1)コントロール細胞に比べて,活性化型Notch1受容体(intracellular Notch 1,ICN1)の導入された顆粒球系前駆細胞32Dでは,未分化な状態および分化の誘導された状態でPU.1のメッセンジャーRNAと蛋白の発現量が減少する。(2)GATA2は,アミノ酸配列の377番から415番までの領域を介してC/EBPαに結合する。以上の結果から,Notch1-MAML1-GATA2シグナルが,PU.1の発現の抑制を介して顆粒球の分化を遅延させる可能性が示された。GATA2とPU.1遺伝子のプロモーター領域の結合について,ゲルシフトアッセイ法で検討中である。また,GATA2がC/EBPαに結合することで,C/EBPα自身の活性がどのように変化するのかをルシフェラーゼアッセイ法で検討中である。

造血细胞命运决定和分化的许多方面是由Notch信号介导的调节机制控制的。关于淋巴细胞谱系，据报道Notch1信号抑制分化为B淋巴细胞并诱导分化为T淋巴细胞。我们报道增强的Notch1信号传导会延迟粒细胞分化，这需要Notch1辅助因子MAML1并且伴随着转录因子GATA2的诱导。粒细胞分化是由 PU.1 和 CCAAT/增强子结合蛋白 α (C/EBPα) 等转录因子诱导的，因此考虑到这一点，我们研究了 Notch1-MAML1-GATA2 信号对 PU.1 和 C/EBPα 的影响。 ，以下两点就清楚了。 (1)与对照细胞相比，导入了活化的Notch1受体(细胞内Notch 1，ICN1)的32D粒细胞祖细胞在未分化状态和分化状态下表现出PU.1水平降低。 (2) GATA2通过氨基酸序列377至415的区域与C/EBPα结合。这些结果表明Notch1-MAML1-GATA2信号可能通过抑制PU.1的表达来延迟粒细胞分化。我们目前正在使用凝胶位移分析研究 GATA2 和 PU.1 基因启动子区域之间的结合。我们还在使用荧光素酶测定研究当 GATA2 与 C/EBPα 结合时 C/EBPα 本身的活性如何变化。