慢性C型肝炎におけるオートファジーの生理学的意義の解明

阐明慢性丙型肝炎中自噬的生理意义

• 批准号: 18790475
• 负责人: 山科 俊平
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790475/
• 关键词: C型肝炎; オートファジー; 化学療法; アポトーシス; 肝炎症; 肝線維化

1)肝組織内におけるオートファジーとC型肝炎ウイルス量・肝炎症・線維化・治療効果との相関についての検討昨年度にひきつづき、症例数を増やしインターフェロン(IFN)導入前C型慢性肝炎患者の肝細胞内オートファジーの数量的評価を電子顕微鏡観察にて行い、HCVウイルス量やIFN感受性・肝炎症や線維化との相関を統計学的に解析し検討を行った。C型慢性肝炎28症例の解析では、ウイルス量と肝細胞質内オートファゴソーム数は統計的有意差をもって正の相関を示し、ウイルス量が多いほどオートファジーが亢進することが証明された。一方、肝炎症や肝線維化に関しては有意な相関を示さなかった。IFN治療効果に関する検討は、多くが1b型症例であった為に治療期間が48週間必要なため解析途中である。しかし臨床的にウイルス量が多いほど治療抵抗性になることからオートファジーが誘導されるほどIFN治療抵抗性を示すものと推測された。2)HCV感染下でのオートファジーと細胞死の関与の解明HCV repliconを導入した肝腫瘍細胞(Feo1b細胞)ならびにIFN処理によりHCV repliconを消失させたCured Feo Ib細胞を準備し、Mitomycin C,Farmorubicin,Cisplatinをそれぞれ添加し、HCV replicon存在がこれら抗癌剤による細胞死に影響を与えるのかについて検討を行った。これら薬剤添加24時間後では細胞数は濃度依存的に有意に減少し、細胞内cleaved caspase-3発現量が増加した事からアポトーシスを来たしたものと推測された。しかしFeo1b細胞とCured Feo1b細胞間ではこれら全ての抗癌剤による細胞死に有意差は認められなかった。HCVreplicon導入細胞ではオートファジーが誘導される事を昨年報告したが、本研究結果よりHCV感染によるオートファジー誘導は化学療法による細胞死に影響を与えないものと推測された。

1) 肝组织自噬与丙型肝炎病毒载量、肝炎炎症、纤维化和治疗效果之间相关性的检查 继去年之后，我们增加了病例数，并对引进前的慢性丙型肝炎患者的肝组织进行了检查。我们使用电子显微镜对细胞内自噬进行了定量评估，并统计分析了其与 HCV 病毒载量、IFN 敏感性、肝炎和纤维化的相关性。对28例慢性丙型肝炎的分析显示，病毒载量与肝细胞质自噬体数量呈正相关，且差异有统计学意义，证明病毒载量越高，自噬增强越多。另一方面，肝炎和肝纤维化没有显示出显着的相关性。 IFN治疗的效果分析仍在进行中，因为大多数患者是1b型患者，治疗周期需要48周。然而，在临床上，病毒数量越高，它对治疗的抵抗力就越大，因此认为诱导的自噬越多，它对干扰素治疗的抵抗力就越大。 2) 阐明HCV感染下的自噬和细胞死亡的参与我们制备了引入HCV复制子的肝肿瘤细胞(Feo1b细胞)和通过IFN处理消除HCV复制子的固化Feo Ib细胞，并制备了丝裂霉素C、法莫霉素我们添加了顺铂并研究了 HCV 复制子的存在是否会影响这些抗癌药物引起的细胞死亡。添加这些药物后24小时，细胞数量以浓度依赖性方式显着减少，细胞内cleaved caspase-3表达增加提示细胞凋亡已经发生。然而，由于所有这些抗癌药物，Feo1b 细胞和治愈的 Feo1b 细胞之间没有观察到细胞死亡的显着差异。尽管我们去年报道了HCV复制子转染细胞中诱导了自噬，但本研究的结果表明HCV感染诱导的自噬并不影响化疗引起的细胞死亡。