ＧＬＵＴａｇ細胞におけるＧＬＰ－１分泌制御機構の解明

阐明 GLUTag 细胞中 GLP-1 分泌控制机制

基本信息

批准号：
12J08221
负责人：
大屋愛実
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

グルカゴン様ペプチド-1（glucagon-like peptide-1; GLP-1）は、小腸内分泌L細胞から分泌され、グルコース濃度上昇によって起こるインスリン分泌を増強する。小腸内分泌L細胞は、管腔内の栄養素、特にグルタミンの濃度変化に応答してGLP-1を分泌するが、その詳細な制御機構については、不明である。そこで小腸内分泌L細胞モデルGLUTag細胞における、グルタミン投与時の細胞内Ca2+濃度（[Ca2+]i）およびcAMP濃度（[cAMP]i）の動態を解析した。その結果、グルタミン投与により[Ca2+]iおよび[cAMP]iが上昇することが分かった。グルタミンは、細胞外Na+と共にナトリウム-アミノ酸共輸送体によって細胞内に取り込まれる。細胞内に取り込まれたNa+は、細胞膜を脱分極させ、細胞内へのCa2+流入を引き起こす。その結果、GLP-1が分泌されると考えられている。そこで、細胞外Na+除去下での、グルタミン投与時の[Ca2+]iおよび[cAMP]i動態を解析した。その結果、細胞外Na+の除去により、グルタミン投与によって起こる[Ca2+]i上昇は抑制されたが、[cAMP]i上昇は抑制されなかった。また、このグルタミン刺激依存的に起こる[cAMP]i上昇は、Gsタンパク質阻害剤の投与では阻害されなかった。今後は、siRNAライブラリーを用いてグルタミン刺激依存的に起こる[cAMP]i上昇に関与する遺伝子の解析を予定している。

Gurkagon-SAMA肽-1（胰高血糖叶肽-1; GLP-1）分泌于小肠内内分泌L细胞，并增强葡萄糖浓度升高引起的胰岛素分泌。小肠内分泌L细胞通过对管中的营养（尤其是谷氨酰胺和分泌的GLP-1）反应来分泌GLP-1，但是详细的控制机制尚不清楚。因此，在小肠内内分泌L细胞模型L -Cell模型中，细胞（[Ca2+] I）和CAMP II（[CAMP] I）（[CAMP] I）（[CAMP] I）的细胞动态。结果，发现[Ca2+] i和[Camp]我通过谷氨酰胺给药升起。谷氨酰胺通过Na+外部细胞共有的钠氨基酸掺入细胞中。掺入细胞中的Na+会吸收细胞膜的极点，从而导致Ca2+流入到细胞中。结果，GLP-1被认为是分泌的。因此，分析了在Na+去除外部细胞下谷氨酰胺给药时的[Ca2+] I和[CAMP] I动态。结果，非细胞Na+的去除导致谷氨酰胺给药[Ca2+]我增加了，但[CAMP] I增加并未抑制。同样，GS蛋白抑制剂的给药并不能抑制这种依赖性的谷氨酰胺刺激[CAMP]。将来，我们计划分析涉及[CAMP]改进的基因，该基因使用siRNA文库依赖于谷氨酸刺激。