小胞体－ゴルジ体間相互作用に着目したＥＲ　ｅｘｉｔ　ｓｉｔｅ形成機構の解明

阐明内质网出口位点形成机制，重点关注内质网和高尔基体之间的相互作用

基本信息

批准号：
12J01880
负责人：
高木純平
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至 2013
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J01880/
关键词：
小胞輸送小胞体ゴルジ体 COPII MAIGO MAGボディ ER exit sites MAIGO変異体

项目摘要

MAG5は小胞体-ゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる因子として同定され, これまでに小胞体からゴルジ体への輸送小胞, COPII小胞の形成が起きる小胞体膜状のドメインERexitsitesに局在することを明らかにした.今年度はMAG5がERexitsitesにおいてCOPII小胞形成にどのような役割を果たしているのかについて焦点を当て, 下記の詳細な解析を行った. COPII構成因子の膜への結合量について, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に, 分画遠心を用いて生化学的に解析を行った. その結果, MAG5はCOPII構成因子の膜への結合に関して蟹的に影響を与えないことが示唆された. 続いて, COPII構成因子のER exit sitesにおける動態について調べるために, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に, FRAP解析を行った. FRAP解析に関しては, ミシガン州立大学のFederica教授のグループとの共同研究により行った. その結果, MAG5の欠損により, COPII構成因子が膜から解離しやすくなっていることが明らかになった. 以上の解析から, MAG5はERexitsitesにおいて, COPIIコートを安定化することにより適切なCOPII小胞形成を担っていることが示唆された.小胞体―ゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる新しい因子をさらに同定する目的で, 正遺伝学的な解析を行った. 小胞体一ゴルジ体間のタンパク質輸送に異常を示す変異体の種子細胞においては, 種子貯蔵タンパク質は小胞体内の異常な構造体MAGボディに異常蓄積することが知られている. MAGボディ異常蓄積に着目した独自のスクリーニング系を用いて, 3系統の輸送変異体を単離することができた.

MAG5 已被确定为参与内质网和高尔基体之间蛋白质转运的因子，并且已定位于 ERexitsites，这是内质网的膜结构域，其中 COPII 囊泡（从内质网到高尔基体的转运囊泡）位于此处今年，我们重点研究了 MAG5 在 ERexitsites 中 COPII 囊泡形成中的作用，并进行了如下详细分析。使用表达COPII构成因子的野生型植物和mag5突变体植物，通过差速离心对膜上结合的COPII构成因子的量进行生化分析，结果表明，MAG5未与膜结合。接下来，我们研究了 ER 出口处 COPII 组成因素的动态。使用野生型植物和表达 COPII 组成因子的 mag5 突变植物进行 FRAP 分析是与密歇根州立大学 Federica 教授小组合作进行的，结果表明 MAG5 缺陷更容易产生 COPII 组成因子。从以上分析可知，MAG5是从膜上解离的因素。这表明COPII通过稳定COPII外壳而在适当的COPII囊泡形成中发挥作用。为了进一步鉴定参与内质网和高尔基体之间蛋白质运输的新因子，在种子细胞中进行了阳性遗传分析。内质网和高尔基体之间的蛋白质运输表现出异常的突变体，已知种子储存蛋白会异常积累在 MAG 体中，MAG 体是内质网内的异常结构。使用专注于 MAG 体异常积累的独特筛选系统，我们能够分离出三种转运突变体。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

MAG5は小胞体出口部位でCOPIIコートを安定化する

MAG5 在内质网出口位点稳定 COPII 外壳

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
Junpei Takagi;Luciana Renna;Hideyuki Takahashi;Yasuko Koumoto;Kentaro Tamura;Giovanni Stefano;Yoichiro Fukao;Maki Kondo;Mikio Nishimura;Tomoo Shimada;Federica Brandizzi;Ikuko Hara-Nishimura;高木純平;高木純平
通讯作者：
高木純平

MAIG05 regulates protein export from the endoplasmic reticulum at Golgi-associated ER exit sites in Arabidopsis' (ポスター)

MAIG05 调节拟南芥中高尔基体相关 ER 出口位点内质网的蛋白质输出（海报）

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
Junpei Takagi;Luciana Renna;Hideyuki Takahashi;Yasuko Koumoto;Kentaro Tamura;Giovanni Stefano;Yoichiro Fukao;Maki Kondo;Mikio Nishimura;Tomoo Shimada;Federica Brandizzi;Ikuko Hara-Nishimura;高木純平;高木純平;高木純平;高木純平
通讯作者：
高木純平

MAIG05はER exit sitesにおいて小胞体からのタンパク質の輸送に関わる(口頭)

MAIG05 参与 ER 出口位点内质网的蛋白质转运（口服）

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
Junpei Takagi;Luciana Renna;Hideyuki Takahashi;Yasuko Koumoto;Kentaro Tamura;Giovanni Stefano;Yoichiro Fukao;Maki Kondo;Mikio Nishimura;Tomoo Shimada;Federica Brandizzi;Ikuko Hara-Nishimura;高木純平;高木純平;高木純平
通讯作者：
高木純平

MAG5はCOPII構成因子と相互作用しCOPIIコートを安定化する

MAG5 与 COPII 组成因子相互作用并稳定 COPII 涂层