末梢血管壁に分布する新型Caチャネルの分子生理・薬理学的研究

外周血管壁新型Ca通道的分子生理学和药理学研究

• 批准号: 04F04721
• 负责人: 伊東 祐之
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04721/
• 关键词: 末梢抵抗血管; Ca^<2+>動員機構; 機械刺激感受性チャネル; TRP蛋白質; 血管平滑筋細胞; 血管内皮細胞; 脂質メディエーター; リアノジン受容体; 抹消抵抗血管; 単離血管平滑筋細胞; 電位依存性カルシウムチャネル; 血圧調節

1.末梢抵抗血管における反射性筋収縮機構の探索血管内圧上昇に伴う反射性血管収縮の分子機構について、パッチクランプ法、ビデオ画像血管径測定法を用い検討した。その結果、(1)組換え発現した受容体活性化CaチャネルTRPC6の活性は、細胞膜伸展刺激に応答して産生された20-HETE(20-hydroxyeicosatetraenoic acid)によって著しく増強される、(2)腸間膜動脈末梢部にはTRPC6蛋白質が優勢に発現している、(3)この部位の血管では、α1-アドレナリン受容体が部分的に活性化されている時に血管内圧が50mmHg以上に増加すると、反射性の血管径減少が起こる、(4)この反射性血管径減少は20-HETE産生に関わる酵素ω-hydroxylaseの阻害薬HET0016(3-10μM)の前投与によってほぼ完全に消失することが明らかとなった。以上より、腸間膜循環においては、交感神経活性化による受容体刺激と血管内圧上昇による機械刺激が20-HETEの産生を介して、共同的に血管緊張度を維持していることが示唆された。2.末梢抵抗血管における興奮伝播機構の探索デジタルCaイメージング法を用いて、腸間膜細動脈部(<50μm)における興奮(細胞内Ca^<2+>濃度上昇)の伝播機構について検討した。その結果、(1)過剰Kによる局所的な膜脱分極によって惹起されたCa^<2+>濃度上昇は、細胞内の単純拡散では説明できない速さで隣接する細胞へ伝播し、その減衰距離は数百μm以上であること、(2)この伝播はgap junction阻害薬、細胞外Ca^<2+>の除去やNi^<2+>、mibefradilの前投与によって消失することが明らかとなった。このことより、末梢抵抗血管の興奮伝播には細胞間結合を介した電位依存性Ca^<2+>流入機構が中心的な役割を果たしていることが明らかになった。

1.探索外周阻力血管反射性肌肉收缩的机制采用膜片钳法和视频图像血管直径测量方法研究了与血管内压升高相关的反射性血管收缩的分子机制。结果，(1)重组表达的受体激活的Ca通道TRPC6的活性受到响应细胞膜拉伸刺激而产生的20-HETE(20-羟基二十碳四烯酸)的显着影响。 (2)TRPC6蛋白主要在肠系膜动脉的外周部分表达；(3)当血管内压力升高至50mmHg或更高时，α1-肾上腺素能受体在该区域的血管中被部分激活。结果，出现反射性血管直径减小。(4) 这种反射性血管直径减小几乎可以通过预先施用 HET0016 (3-10 μM) 完全消除，HET0016 是 ω-羟化酶（一种参与 20-HETE 的酶）的抑制剂。生产变得清晰。这些结果表明，在肠系膜循环中，交感神经激活引起的受体刺激和血管内压力增加引起的机械刺激通过产生20-HETE共同维持血管张力。 2.外周阻力血管中兴奋传播机制的探索利用数字Ca成像，我们研究了肠系膜小动脉（<50μm）中兴奋（细胞内Ca^2+浓度增加）的传播机制。结果，(1)由于过量的K导致的局部膜去极化引起的Ca ^ 2+ 浓度的增加以无法用简单的细胞内扩散解释的速度传播到邻近细胞，并且衰减距离(2)这发现间隙连接抑制剂、细胞外Ca 2+ 的去除以及Ni 2+ 和米贝拉地尔的预施用可消除增殖。这些结果表明，通过细胞间连接的电压依赖性Ca 2+ 流入机制在外周阻力血管中的兴奋传播中发挥核心作用。