サーカディアンリズムによるコカイン致死作用の日内変動

由于昼夜节律导致可卡因致死效果的昼夜变化

• 批准号: 15790322
• 负责人: 佐藤 秀則
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790322/
• 关键词: 日内変動; ストレス応答; mPer1; mPer2; c-fos; NMDAζ1; ストレッサー; 致死作用; サーカディアンリズム; コカイン; 致死; ドーパミン受容体; NMDA受容体; mPer; ストレス対応

サーカディアンリズムとストレス応答に関する基礎データを得る目的で,前年度に引き続き以下の研究を行った.Light:Dark(LD)あるいはDark:Dark(DD)条件でICRマウス(7W;34-39g)を2日間順化,2日目から絶飲食とし,3日目にサーカディアンタイム(CT)0,4,8,12,16,20においてPBS腹腔内投与(ip)10min後の視交叉上核(SCN)および線条体(CPu)におけるc-fos,mPer1,mPer2 mRNAs,NMDA受容体(ζ1)タンパク質の発現量動態について調べた.SCN(n=4),CPu(n=4)を分画して得た細胞質画分よりmRNAs,膜画分よりζ1サプユニットについて,mRNAsではRT-PCRの後にstressor/infant比との関係について,ζ1ではWestern Blottingによる各CTにおけるタンパク質量として解析を行った,mRNA比解析の結果,LD条件下のSCNにおいてはCT16,20においてc-FosとmPer2においてstressorによる発現の著しい上昇が認められ,これに対して,CPuでは発現比の大きな変動は認められなかった.DD条件下のSCNではCT4,20においてstressorによるmPer2発現の著しい減少が認められ,CPuにおいてもCT4ではmPer2,CT8ではmPer1発現がstressorにより著しく減少していた.ζ1発現量解析の結果,LD条件下のSCNにおいてstressorの有無に関係なく検出感度以下,CPuでは大きな変動は認められず,DD条件下のCPuにおいてCT12でstressorによるタンパク質量の著しい減少が認められた.以上の事から,mRNAsとζ1サプユニット発現はパラレルに関係している事が示唆され,日内変動リズムとストレス応答との間に密接な関係があるものと考えられた.

继去年之后，我们进行了以下研究，目的是获得昼夜节律和应激反应的基础数据。第2天起禁食禁水，第3天在昼夜节律时间（CT）0、4、8、腹腔内（ip）PBS 10分钟后检查视交叉上核（SCN）和纹状体。 12、16 和 20。体内的 c-fos、mPer1、mPer2 (CPu)我们研究了 mRNA 和 NMDA 受体 (ζ1) 蛋白的表达动态。mRNA 是从通过分级 SCN (n=4) 和 CPu (n=4) 获得的细胞质级分中获得的，从膜级分中获得了 ze1 亚基。 mRNA RT-PCR 后与应激源/婴儿比率的关系，Western mRNA比率分析(通过印迹分析为各CT中的蛋白量)的结果是，在LD条件下的SCN中，在CT16和20观察到应激源诱导的c-Fos和mPer2的表达显着增加；在CPu中，没有观察到表达比例的重大变化。在DD条件下的SCN中，在CT4和20时观察到应激诱导的mPer2表达显着下降，并且在CPu中，mPer2在CT4表达，mPer2在CT8表达。 Per1表达量受应激源显着降低。对δ1表达量分析结果发现，在LD条件下的SCN中，无论有无应激源，其均低于检测灵敏度；在2中观察到由于应激源导致的蛋白质量显着减少。上述结果表明mRNA和ze1亚基表达平行相关，并且认为昼夜节律和应激反应之间存在密切关系。