コミュニティーレベルでの胃腸炎ウイルス制御法開発(社会のワクチン)への挑戦

挑战开发社区一级胃肠炎病毒控制方法（社会疫苗）

基本信息

批准号：
21659157
负责人：
中込治
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ノロウイルスはどうやって現代の上下水処理制御をかいくぐり自然界でヒトからヒトへの感染環を維持しているのか。ノロウイルスによる被害を最小化するためには、ノロウイルスの自然界での動態を明らかにし、感染制御をコミュニティーレベルで達成する新規な衛生工学的水処理技術の開発が必要である。本研究は、ノロウイルスが組織血液型抗原をレセプターとすることにヒントを得て、ノロウイルスを環境中で安定に生存させるキャリア細菌があるのではないかという仮説を検証することにより、新規な下水処理法の開発につながる突破口をつかむことを目的とした。未処理下水を原材料に6種類の腸内細菌用培地を用いた微好気性培養を行い、これを血液型判定法の原理を応用したELISAによりノロウイルス吸着細菌をスクリーニングした。ここで分離された菌を微好気条件下に単離し、増菌後に組織血液型抗原への結合を確認した上で、16SrDNAの配列を決定し、ホモロジー検索によりPseudomonas,Klebsiella,Proteusに近縁な3株を同定した。これらの3株と対照菌株である大腸菌K12株とを用いて、ノロウイルス粒子の吸着実験を行ったところ、吸着平衡定数が10^12のオーダーの高い値が得られた。すなわち、菌体表面に組織血液型抗原と同等の糖鎖構造をもち、かつ高い平衡定数でノロウイルスに吸着する腸内細菌株を見出すことができた。今後、再現性および推定パラメータの精度確認などの実験が必要であるが、ノロウイルスのキャリア細菌仮説を強く支持する結果が得られたことから、コミュニティーレベルでの胃腸炎ウイルス制御法開発,すなわち,「社会のワクチン」開発に向けての第1歩が得られたと考える。

诺如病毒如何逃避现代水和污水处理控制并在自然界中维持人与人之间的传播周期？为了最大限度地减少诺如病毒造成的损害，有必要阐明诺如病毒在自然界中的动态，并开发新的卫生工程水处理技术，实现社区层面的感染控制。这项研究的灵感来自于诺如病毒使用组织学血型抗原作为受体，通过测试存在一种可以让诺如病毒在环境中稳定生存的载体细菌的假设，我们的目标是开发一种污水处理的新方法。目标是抓住突破，推动立法的发展。以未经处理的污水为原料，使用六种肠杆菌培养基进行微需氧培养，并利用血型定型原理，通过ELISA筛选诺如病毒吸附细菌。这里分离的细菌是在微需氧条件下分离的，富集后，证实与组织血型抗原结合，测定了16S rDNA序列，同源性搜索显示其与假单胞菌属、克雷伯氏菌属、变形杆菌属密切相关。菌株被鉴定。当我们使用这三种菌株和对照菌株大肠杆菌K12对诺如病毒颗粒进行吸附实验时，我们获得了10^12数量级的高吸附平衡常数。换句话说，我们能够找到一种肠道细菌菌株，其细菌表面具有与组织血型抗原相当的糖链结构，并且以高平衡常数吸附诺如病毒。尽管需要进一步的实验来确认估计参数的可重复性和准确性，但结果强烈支持诺如病毒携带者假设，我们已经迈出了开发“社会疫苗”的第一步。