ドナー特異的輸血による移植肝由来細胞のホスト内動態と免疫寛容機構の組織学的解析

供者特异性输血移植肝源细胞的宿主内动态和免疫耐受机制的组织学分析

• 批准号: 21659048
• 负责人: 上田 祐司
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659048/
• 关键词: 移植・再生医療; 解剖学; 免疫学; 樹状細胞; ドナー特異的輸血; 免疫抑制; ラット; 肝臓; 移植; 免疫寛容; 細胞遊走; CD8陽性T細胞; アロ抗体

我々はこれまでにラット肝移植拒絶モデルの系に、ドナー特異的輸血(DST)を前処置として施すと移植片が生着することを見出した。本研究はこのDST効果の本態の解明である。昨年度に、DST前処置+肝移植群(寛容群)では肝移植群(拒絶群)とは異なり、樹状細胞を含む移植肝由来ドナー細胞(passenger leukocyte)のホストリンパ組織への遊走と拒絶反応の中心的役割を担うCD8+T細胞の活性化が全く抑制されていることを見出した。これはDST単独で誘導される細胞障害性のドナー特異的抗体が移植直後に遊走細胞を消失させるために、ホストリンパ組織内で免疫応答が起こらないためであると考えられた。最終年度である本年はまず、両群の移植臓器内における免疫担当細胞の経時的な動態変化を解析した。ホスト細胞の肝臓内浸潤は移植最初期(2d)までは寛容群が多いものの、中期(5d)では拒絶群がそれを上回り、拒絶期(10d)頃にはほぼ全域を占拠していた。CD8+T細胞は拒絶群では中期にかけて浸潤数が増大し、非常に強く活性化していた。一方寛容群ではCD8+T細胞の浸潤絶対数およびその活性型の割合ともに強く抑制されていた。中期～拒絶期ではエフェクター細胞がCD8T+細胞からマクロファージに移行するが、寛容群ではこれらにも一貫した抑制効果が示した。そこで他の免疫調節因子を検索したところ制御性T細胞(Treg)が、寛容群選択的に、この時期に同調してホストリンパ組織、肝門脈域において細胞数の増加し、活性化することが認められた。これらDST抗体の認識抗原はドナーMHC-1であり、したがってMHCの異なる系統で輸血を行うと同様にアロ抗体が誘導された。以上よりDST効果の主要素はアロ抗体によるpassenger leukocyteの遊走とホスト内免疫応答の抑制であること、それ以外にTreg等の免疫調節因子が作用してドナー特異的に免疫寛容を維持していると考えられた。現在、研究成果を投稿準備中である。

我们之前发现，在大鼠肝移植排斥模型系统中，用供者特异性输血（DST）进行预处理可导致移植物存活。本研究旨在阐明这种 DST 效应的真正本质。去年，我们发现在DST预处理+肝移植组（耐受组）中，移植的肝源性供体细胞（过客白细胞）包括树突状细胞向宿主淋巴组织的迁移以及排斥反应与肝移植组不同（我们发现在癌症发展中起核心作用的 CD8+ T 细胞的激活被完全抑制。这被认为是因为仅由 DST 诱导的细胞毒性供体特异性抗体导致迁移细胞在移植后立即消失，并且宿主淋巴组织内没有发生免疫反应。今年，即研究的最后一年，我们首先分析了两组移植器官内免疫活性细胞动态的时间变化。在移植的最早阶段（2d），耐受组的宿主细胞肝内浸润更为普遍，但在移植中期（5d），排斥组超过了这一点，到了排斥阶段（10d），宿主细胞的肝内浸润更加普遍。几乎占据了整个区域。在排斥组中，浸润的CD8+T细胞数量向中期增加，并且高度活化。另一方面，在耐受组中，浸润性CD8+T细胞的绝对数量及其活性类型的比例均受到强烈抑制。在中期至排斥阶段，效应细胞从 CD8T+ 细胞转变为巨噬细胞，但这些细胞在耐受组中也具有一致的抑制作用。因此，我们寻找其他免疫调节因子，发现在此期间宿主淋巴组织和肝门静脉区域的调节性T细胞（Treg）数量同步增加并被激活，选择性地在耐受组中被识别。这些DST抗体识别的抗原是供体MHC-1，因此当用不同的MHC品系进行输血时，类似地诱导同种抗体。综上所述，DST效应的主要要素是同种抗体引起的过客白细胞的迁移和宿主免疫反应的抑制，此外，Treg等免疫调节因子发挥作用以维持供体特异性免疫耐受。 。我们目前正在准备提交我们的研究成果。

项目成果

What are effector cells in the liver transplant rejection?

肝移植排斥反应中的效应细胞是什么？

• 发表时间: 2010
• 作者: 向笠勝貴;辻田忠志;李麗;山本雅之;小林麻己人;Hisashi Ueta
• 通讯作者: Hisashi Ueta