超音波刺激を利用した標的細胞選択的遺伝子導入技術による革新的治療システムの開発

利用超声波刺激的靶细胞选择性基因转移技术开发创新治疗系统

基本信息

批准号：
10J01875
负责人：
運敬太
金额：
$ 0.9万
依托单位：
National Institute of Health Sciences (2011)Kyoto University (2010)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

薬剤性肝炎や虚血再灌流性肝傷害は、臨床における薬物治療や生体肝移植等の外科手術時における有害事象として認識されている。これら各種肝炎・肝傷害は薬物投与又は外科的処置に伴うNF-κB活性化、及びそれに起因した炎症性サイトカイン産生によって惹起されるが、当該炎症反応発生初期には、細胞間接着分子(ICAM-1)が肝臓の血管内皮細胞上に発現誘導され、好中球等の血管内皮細胞との接着、回転、並びに組織内浸潤に関与することが報告されている。従って、肝血管内皮細胞におけるICAM-1発現を効率的に抑制することで炎症反応の重症化の軽減が期待される。私がこれまでに開発した超音波応答性マンノース修飾リポソーム/核酸複合体(Man-PEG_<2000> bubble lipoplex)と超音波照射を利用した核酸導入法は、肝臓におけるマンノース受容体発現細胞である肝血管内皮細胞やクッパー細胞に対し、選択的かつ高効率に核酸化合物を送達可能である。そこで本年度は、Man-PEG_<2000> bubble lipoplexと超音波照射を用いて、ICAM-1に対するsiRNAを肝血管内皮細胞内に効率的に送達することによる抗炎症治療効果を評価した。ICAM-1 siRNAを用いて超音波応答性マンノース修飾リポソーム/siRNA複合体を作製し検討を行った結果、本製剤の静脈内投与と体外からの超音波照射の併用により、リポポリサッカライド処理や虚血再灌流操作に伴い、肝臓において惹起される急性炎症時のICAM-1発現や好中球等の組織内浸潤、並びに炎症性サイトカイン産生が顕著に抑制された。さらに肝毒性の指標である血清中AST/AIT活性の上昇も顕著に抑制されることが示され、Man-PEG_<2000> bubble lipoplexを利用したICAM-1 siRNA送達が、肝臓における急性炎症の抑制に有効であることが示された。本方法を用いた抗炎症療法は様々な炎症反応に対して広く適応できる可能性を秘めているので、炎症反応が懸念される疾患治療に先立ち、予め本方法によりICAM-1 siRNAを送達することで予期せぬ炎症反応の抑止が期待される。

药物性肝炎和缺血再灌注肝损伤被认为是临床药物治疗和活体肝移植等手术过程中的不良事件。这些不同类型的肝炎和肝损伤是由与药物施用或手术治疗相关的NF-κB激活引起的，并且由此产生炎症细胞因子，据报道1)的表达在肝血管内皮细胞上被诱导并参与。与中性粒细胞等血管内皮细胞的粘附、旋转、组织浸润等。因此，有效抑制肝血管内皮细胞中ICAM-1的表达有望减轻炎症反应的严重程度。迄今为止，我公司开发的利用超声波响应型甘露糖修饰脂质体/核酸复合物（Man-PEG_<2000> bubble lipoplex）和超声波照射的核酸导入方法，可选择性且高效地导入核酸化合物。递送至血管内皮细胞和库普弗细胞。因此，今年，我们利用Man-PEG_<2000>气泡脂质体和超声照射，评估了将针对ICAM-1的siRNA有效递送至肝血管内皮细胞中的抗炎治疗效果。作为使用ICAM-1 siRNA制备和研究超声响应性甘露糖修饰脂质体/siRNA复合物的结果，我们发现静脉内施用该制剂和外部超声照射的联合使用可以减少脂多糖治疗和血液再灌注后的ICAM肝脏诱发急性炎症时-1的表达、中性粒细胞的组织浸润等以及炎症细胞因子的产生均受到显着抑制。此外，表明作为肝毒性指标的血清AST/AIT活性的增加被显着抑制，并且使用Man-PEG_<2000>气泡脂复合物的ICAM-1 siRNA递送抑制了肝脏中的急性炎症。事实证明是有效的。使用该方法的抗炎治疗有可能广泛适用于各种炎症反应，因此建议在治疗预计会出现炎症反应的疾病之前使用该方法提前递送ICAM-1 siRNA。抑制意外的炎症反应。