実験内分泌学的手法と形態学的解析法を活用した小胞体ストレスへの新たなアプローチ

利用实验内分泌学和形态分析方法研究内质网应激的新方法

基本信息

批准号：
10J00033
负责人：
暮地本宙己
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

粗面小胞体は膜蛋白や分泌蛋白合成の場となる細胞内膜系小器官であり、細胞の種類や機能状態に応じた多様な形態をとる。本研究では、特異的な調節因子により分泌蛋白の生合成・分泌が明快に制御されている下垂体前葉内分泌細胞に着目して、実験内分泌学的操作で生じる粗面小胞体の微細構造や小胞体ストレス応答に関連する機能分子局在の変化を解析した。既に平成22年度には、GnRH誘導体である酢酸リュープロレリンを持続的に投与したラットモデルで同剤の標的細胞である下垂体前葉のLH/FSH産生細胞の微細構造の変化を解析し、強いGnRH刺激が付加される初期には管状細網構造をとる特異な粗面小胞体塊が出現すること、および、その後受容体の不応化現象によって逆説的に性腺刺激ホルモン生合成が抑制される時期には内腔が狭小化した粗面小胞体が積層化することを明らかにした。この研究成果を踏まえて、平成23年度にはさらに、去勢手術によって長期的に刺激されたLH/FSH産生細胞の微細構造がリュープロレリンの作用を受けてどのように変化するか検討した。その結果、持続的な刺激によって巨大に拡張していた粗面小胞体内腔は、同剤の追加投与直後から著明に分葉化することが明らかになった。その後、粗面小胞体内腔は次第に狭小化し長期的には積層化したことから、性腺刺激ホルモンの生合成が極度に亢進し小胞体ストレスが負荷されていると考えられるLH/FSH産生細胞に対しても、リュープロレリン持続投与が抑制的に作用することが示された。このような粗面小胞体の微細構造の変化はまた、GnRH誘導体持続投与ラットモデルが小胞体ストレス応答や小胞体構造維持機構を解析する上で再現性の高い有用な解析系となる可能性を示唆している。以上の研究成果は、研究発表欄に記載した学会(日本解剖学会・第117回全国学術集会、2012年3月、甲府)のシンポジウムで報告した。

粗糙的内质网是一种细胞内膜细胞器，作为合成膜蛋白和分泌蛋白的位点，并根据细胞的类型和功能状态采取多种形式。在这项研究中，我们专注于前垂体内分泌细胞，在该细胞中，分泌蛋白的生物合成和分泌由特定的调节因子明确控制，并分析了与粗糙的内质网和功能分子定位的微观结构的分析变化，与实验性内部分泌过程中发生的与ER应激响应相关的功能性分子定位。 In 2010, we analyzed changes in the microstructure of LH/FSH-producing cells in the anterior pituitary gland, a target cell for the GnRH derivative, in a rat model in which leuprorelin acetate, a target cell for the same agent, and revealed that a unique rough endoplasmic reticulum with a tubular network appears early in the early stages of strong GnRH stimulation, and that rough当受体难治现象被矛盾地抑制时，内质网与狭窄的流明层分层。基于这项研究发现，2011年，我们进一步研究了由于lh/fsh产生的细胞的微观结构如何在长时间通过cast割而刺激的细胞，这是由于余质蛋白的影响而变化。结果，有人发现，在额外施用同一药物后，由于连续刺激而大大扩展了粗糙的内质网。粗糙的内质网腔长期逐渐变窄并在长期内进行分层，表明连续的余质素给药对LH/FSH产生的细胞也具有抑制作用，这些细胞被认为非常增强并受到内质网应激。粗糙内质网的微观结构的这种变化还表明，连续GNRH衍生物的大鼠模型可能是一个高度可再现且有用的分析系统，用于分析ER应力反应和维持内质网的机制。上述研究结果在研究演讲部分中列出的协会研讨会（2012年3月的日本解剖学学会，2012年3月的Kofu）上报道。