Development of radiation inducible promoter in prostate cancer

前列腺癌辐射诱导启动子的开发

基本信息

  • 批准号:
    21791494
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.5万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2009
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2009 至 2010
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

A promoter library was developed that is composed of DNA fragments constructed by randomly elongating cis-acting elements of transcription factors presumably activated in prostate cancer by radiation, and linking to the TATA box sequence. One promoter with the strongest reactivity to X-ray in LNCap cells of the library was chosen and improved by the introduction of random mutations. A resultant promoter was designated clone 880-8 showing the highest dose-dependent activity enhancement with X-ray irradiation (X-irradiation). A recombinant retrovirus expressing the luciferase gene under the control of clone 880-8 was infected to LNCap that showed 9.12 ± 0.36-fold enhancement of luciferase activity 12 h after X-irradiation at 10 Gy. When the infected cells were inoculated onto nude mice, enhancement of luciferase expression was 4.27 ± 1.36-fold 12 h after X-irradiation at 10 Gy. When LNCap was infected with another recombinant carrying the fcy::fur gene downstream to clone 880-8, fcy::fur expression was enhanced by X-irradiation. It was also shown to increase dose-dependent cell killing ratio with 5-fluorocytosine compared to a counterpart without X-irradiation. These results suggest that the method employed in this study is effective to construct a promoter responsive to stimulation. Such promoters can be utilized for stimulation controlled-gene therapies.
开发了一个启动子库,该库由通过辐射通过辐射中前列腺癌中的转录因子的顺​​式作用元件的随机拉长构建的DNA片段组成,并链接到TATA盒序列。选择了一个对库中LNCAP细胞中X射线反应性最强的启动子,并通过引入随机突变进行了改进。将最终的启动子指定为克隆880-8,显示出最高剂量依赖性活性增强,并通过X射线照射(X-Irradiation)。将克隆880-8控制下表达荧光素酶基因的重组逆转录病毒感染到LNCAP,在10 Gy X射线后12小时,荧光素酶活性增强了9.12±0.36倍。当感染细胞被接种到裸鼠上时,在10 Gy时X-辐照后,荧光素酶表达的增强为4.27±1.36倍。当LNCAP被另一种重组携带FCY的重组感染时,将FCY :: Fur Gene下游到克隆880-8时,FCY :: fcy :: fur ::通过X-irraradiatiation增强了毛皮表达。与没有X辐射的对应物相比,它还显示出5-氟环胞嘧啶的剂量依赖性细胞杀伤比。这些结果表明,本研究中采用的方法有效地构建了响应刺激的启动子。此类启动子可以用于刺激控制的基因疗法。

项目成果

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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
射線による遺伝子発現制御と前立腺癌の治療応用への検討
放射诱导的基因表达控制及其在前列腺癌治疗中的应用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森井章裕;渡部明彦;他
  • 通讯作者:
前立腺癌細胞株における放射線遺伝子治療用人工プロモーターの開発
前列腺癌细胞系放射基因治疗人工启动子的开发
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森井章裕;渡部明彦;他
  • 通讯作者:
前立腺癌細胞株において放射線に応答する人工プロモーターの改良
前列腺癌细胞系中响应辐射的人工启动子的改进
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森井章裕;渡部明彦;他
  • 通讯作者:
放射線による遺伝子発現制御と前立腺癌の治療応用への検討
放射控制基因表达的思考及其在前列腺癌治疗中的应用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森井章裕、渡部明彦;他
  • 通讯作者:
Construction of promoter induced by radiation for human prostate cancer cells.
人前列腺癌细胞辐射诱导启动子的构建。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Akihiro Morii;Akihiko Watanabe;et al.
  • 通讯作者:
    et al.
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    $ 2.5万
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