iPS細胞を用いたケミカルバイオロジーによる新たな血管新生機構の解析

使用 iPS 细胞利用化学生物学分析新的血管生成机制

基本信息

批准号：
09J06109
负责人：
楢崎元太
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

iPS細胞を用いた化合物スクリーニングを行い新たな血管作用物質の探索を目指した本研究は完全に遂行するにはいたらなかった。理由として、昨年度までにスクリーニングに使用できるiPS細胞を用いた3次元的血管分化誘導法の樹立はなされていたものの、複雑な分化誘導系を用いていたために、誘導効率が一定でないこと及び3次元的血管構造の定量的評価法の構築が難しいなどの問題が存在した。そのため、スクリーニング系としての安定性が担保できず、実用にはいたらなかった。上記の不安定なスクリーニング系を用いて、いくつかのライブラリーを実際に検討を行ったが、陽性と思われるような反応が認められなかった。代用法として、2次元的な誘導法を用いてみたが、血管構造の評価が難しく、またポジティブコントロールがないことなどから、スクリーニング系としての応用は不可能であった。しかし、本年度は心筋分野でのiPS細胞を用いた成果が得られた。これは、免疫抑制剤であるサイクロスポリンAを分化誘導過程に添加することで、従来の方法に比べ、マウス・ヒトiPS細胞から効率的に心筋細胞を誘導できることを発見した。(Fujiwara et al. PloS One,2011)。この論文において、私はマウスiPS細胞の分化誘導に関する実験を担当し、論文発表に大きく貢献を果たした。

这项研究旨在使用IPS细胞筛选化合物并寻找新的血管活性物质。原因是，尽管使用IPS细胞的3D血管分化诱导方法直到去年才建立了可以用于筛查的IPS细胞，但存在诸如使用复杂分化诱导系统的问题，这导致诱导效率并非恒定，并且难以确定三维血管结构的定量评估方法。结果，不可能确保作为筛选系统的稳定性，并且不实用。使用上述不稳定的筛选系统，实际检查了几个文库，但没有发现积极的反应。尽管将2D指南方法用作替代品，但由于难以评估血管结构并且没有阳性对照，因此不可能将其应用于筛查系统。但是，今年，使用心肌场中的IPS细胞获得了结果。发现与传统方法相比，通过将免疫抑制剂环孢菌素A添加到分化诱导过程中，可以有效地从小鼠和人IPS细胞诱导心肌细胞。（Fujiwara等人Plos One，2011年）。在本文中，我负责对小鼠IPS细胞分化的诱导进行实验，并对本文的发表做出了重要贡献。

项目成果

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专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Induction and enhancement of cardiac cell differentiation from mouse and human induced pluripotent stem cells with cyclosporin-A.

DOI：
10.1371/journal.pone.0016734
发表时间：
2011-02-22
期刊：
PloS one
影响因子：
3.7
作者：
Fujiwara M;Yan P;Otsuji TG;Narazaki G;Uosaki H;Fukushima H;Kuwahara K;Harada M;Matsuda H;Matsuoka S;Okita K;Takahashi K;Nakagawa M;Ikeda T;Sakata R;Mummery CL;Nakatsuji N;Yamanaka S;Nakao K;Yamashita JK
通讯作者：
Yamashita JK

Creations of biological pacemaker

生物起搏器的创作

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
Inflammation and Regeneration 29
影响因子：
0
作者：
R.Shirakawa;S.Fukai;M.Kawato;T.Higashi;H.Kondo;T.;Narazaki G and Yamashita JK
通讯作者：
Narazaki G and Yamashita JK

Differentiation Properties of Various Mouse Induced Pluripotent Stem Cell lines into Cardiovascular lineages

各种小鼠诱导多能干细胞系向心血管谱系的分化特性