iPS細胞を用いたケミカルバイオロジーによる新たな血管新生機構の解析

使用 iPS 细胞利用化学生物学分析新的血管生成机制

基本信息

批准号：
09J06109
负责人：
楢崎元太
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

iPS細胞を用いた化合物スクリーニングを行い新たな血管作用物質の探索を目指した本研究は完全に遂行するにはいたらなかった。理由として、昨年度までにスクリーニングに使用できるiPS細胞を用いた3次元的血管分化誘導法の樹立はなされていたものの、複雑な分化誘導系を用いていたために、誘導効率が一定でないこと及び3次元的血管構造の定量的評価法の構築が難しいなどの問題が存在した。そのため、スクリーニング系としての安定性が担保できず、実用にはいたらなかった。上記の不安定なスクリーニング系を用いて、いくつかのライブラリーを実際に検討を行ったが、陽性と思われるような反応が認められなかった。代用法として、2次元的な誘導法を用いてみたが、血管構造の評価が難しく、またポジティブコントロールがないことなどから、スクリーニング系としての応用は不可能であった。しかし、本年度は心筋分野でのiPS細胞を用いた成果が得られた。これは、免疫抑制剤であるサイクロスポリンAを分化誘導過程に添加することで、従来の方法に比べ、マウス・ヒトiPS細胞から効率的に心筋細胞を誘導できることを発見した。(Fujiwara et al. PloS One,2011)。この論文において、私はマウスiPS細胞の分化誘導に関する実験を担当し、論文発表に大きく貢献を果たした。

这项旨在通过使用 iPS 细胞筛选化合物来寻找新的血管活性物质的研究尚未完全完成。其原因是，虽然去年已经建立了可用于筛选的使用iPS细胞的3D血管分化诱导方法，但由于使用复杂的分化诱导系统，诱导效率不稳定等问题。建立血管结构的定量评价方法存在困难。因此，无法确保作为筛选系统的稳定性，未能投入实际使用。我们实际上使用上述不稳定的筛选系统检查了几个文库，但没有观察到阳性反应。作为替代方法，我们尝试使用二维引导方法，但难以评估血管结构且没有阳性对照，因此不可能将其用作筛查系统。然而今年，我们利用iPS细胞在心肌领域取得了成果。他们发现，通过在分化诱导过程中添加免疫抑制剂环孢菌素A，可以比传统方法更有效地从小鼠和人类iPS细胞中诱导出心肌细胞。（Fujiwara 等人，PloS One，2011）。在这篇论文中，我负责小鼠iPS细胞诱导分化的实验，为论文的发表做出了重大贡献。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Induction and enhancement of cardiac cell differentiation from mouse and human induced pluripotent stem cells with cyclosporin-A.

DOI：
10.1371/journal.pone.0016734
发表时间：
2011-02-22
期刊：
PloS one
影响因子：
3.7
作者：
Fujiwara M;Yan P;Otsuji TG;Narazaki G;Uosaki H;Fukushima H;Kuwahara K;Harada M;Matsuda H;Matsuoka S;Okita K;Takahashi K;Nakagawa M;Ikeda T;Sakata R;Mummery CL;Nakatsuji N;Yamanaka S;Nakao K;Yamashita JK
通讯作者：
Yamashita JK

Creations of biological pacemaker

生物起搏器的创作

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
Inflammation and Regeneration 29
影响因子：
0
作者：
R.Shirakawa;S.Fukai;M.Kawato;T.Higashi;H.Kondo;T.;Narazaki G and Yamashita JK
通讯作者：
Narazaki G and Yamashita JK

Differentiation Properties of Various Mouse Induced Pluripotent Stem Cell lines into Cardiovascular lineages

各种小鼠诱导多能干细胞系向心血管谱系的分化特性