レチノイン酸受容体の樹状細胞分化への影響と腸管におけるビタミンA代謝機構の解明

阐明视黄酸受体对树突状细胞分化的影响及肠道维生素A代谢机制

基本信息

批准号：
09J06042
负责人：
和田安代
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J06042/
关键词：
レチノイン酸樹状細胞 RARアゴニスト IL-12 炎症性腸疾患 Th1 クローン病 IFN-γ

项目摘要

本研究は、クローン病や潰瘍性大腸炎といった炎症性腸疾患における樹状細胞分化や腸管におけるビタミンA代謝機構および腸管におけるビタミンAの重要性を明らかにする事を目的としている。本研究ではこれまでに合成レチノイン酸であるAm80の健常人に対する樹状細胞(dendriticcell;DC)分化に対する影響を検討してきており、レチノイン酸がDCの分化過程に影響を与えることでIL-12低産生型DCを分化誘導し、またこのDCはTh1分化も抑制していることを明らかにしている。さらに、Am80と分化させたDC(Am-DCs)をCFSE希釈したナイーブT細胞と共培養し、抗原提示能を確認した。その結果、Am-DCsは、Am80を添加していないコントロールのDC(cDCs)と同等の分化誘導能を有しており、分化誘導能低下によるTh1誘導抑制ではないことを示した。また、Am-DCはTh1誘導を抑制する事を細胞内染色で既に確認しているが、Am-DCで分化誘導した後のT細胞を回収し、そのサイトカインについても検討したところ、IFN-γの産生が有意に低下していた。またこの時Am-DCs、cDCsともに制御性T細胞への分化は限定的であった。細胞の生存率においても検討を行ったが、DC分化での生存率にcDC、Am-DCの間で差はなかった。さらに、RARα/βのpan-antagonistを用いて、それらをT細胞分化誘導の際に添加し、受容体を阻害することで、Am-DCsそのものがTh1誘導に影響を与えていることを示し、分化誘導能に関する裏付けの検討を詳細に行った。以上のように、DC分化におけるレチノイン酸(Am80)の効果を確かなものとする詳細な検討を行い、Am80が炎症性腸疾患、特にTh1疾患とされるクローン病に対する新たな治療の一助となりうる可能性が示唆された。

本研究的目的是阐明克罗恩病和溃疡性结肠炎等炎症性肠病中树突状细胞的分化、维生素A在肠道中的代谢机制以及维生素A在肠道中的重要性。在这项研究中，我们迄今为止研究了Am80（一种合成视黄酸）对健康受试者树突状细胞（DC）分化的影响，发现视黄酸通过影响DC分化过程来降低IL-12。该方法诱导生产性 DC 的分化，并且这些 DC 还抑制 Th1 分化。此外，将用Am80分化的DC（Am-DC）与用CFSE稀释的幼稚T细胞共培养，并确认其抗原呈递能力。结果，Am-DC具有与未添加Am80的对照DC(cDC)相同的分化诱导能力，表明Th1诱导并未因诱导分化能力降低而受到抑制。另外，已经通过细胞内染色证实Am-DC抑制Th1诱导，但是当我们收集用Am-DC诱导分化的T细胞并检查其细胞因子时，我们发现IFN-γ的产生是显着下降。此外，此时，Am-DC 和 cDC 分化为调节性 T 细胞的能力都受到限制。我们还检查了细胞存活率，但cDC和Am-DC之间的DC分化存活率没有差异。此外，通过使用 RARα/β 泛拮抗剂并在 T 细胞分化诱导过程中添加它们并抑制受体，我们发现 Am-DC 本身会影响 Th1 诱导。我们进行了详细的研究以支持诱导分化的能力。如上所述，我们进行了详细的研究来确认视黄酸（Am80）对 DC 分化的影响，我们相信 Am80 可能可作为炎症性肠病，特别是被认为是 Th1 疾病的克罗恩病的新疗法。提出了这种可能性。