口腔癌における小胞体ストレス回避機構の解明

阐明口腔癌内质网应激回避机制

• 批准号: 09J04351
• 负责人: 丸山 剛
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J04351/
• 关键词: ERストレス; アポトーシス; 口腔癌; IRE1; UPR; JNK

マウス癌組織における小胞体ストレスマーカーの検討培養細胞を用いて得られる結果をin vivoで評価するため、各種癌細胞群をヌードマウス皮下に移植して形成される癌組織と正常組織を比較して、各種抗体を用いて病理組織学的検討を行おうとしている。小胞体ストレスシグナルをモニターする手段として、小胞体受容体IREI・PERKの活性化抗体、その下流で発現誘導される小胞体シャペロンBiPや転写因子CHOPの抗体、小胞体ストレス特異的に起こるmRNAスプライシングを検出するプローブ、ERADの機能低下による小胞体不良タンパク質の蓄積を検出する蛍光プローブ、アポトーシス実行因子ASK1-JNK経路の活性化抗体の開発に成功している。一方評価対象側としては、20種類以上の口腔扁平上皮癌、唾液腺癌、骨髄腫などの培養細胞を有している。上記の抗体・検出プローブを用いて、これらの細胞群および正常細胞が、低酸素・低栄養状態に対してどの様な小胞体ストレスシグナルを誘導するかを詳細に検討している段階であり、この行程が終わり次第、ヌードマウスへの打ち込みを行い、実際の病理組織学的検討を行う。発癌・口腔癌転移と小胞体ストレス誘導性アポトーシスシグナルに関する検討ASK1を介したアポトーシスシグナルの抑制は癌細胞増殖のメカニズムの一つと予想されるが、癌細胞転移・浸潤の観点からは、宿主側ではむしろアポトーシスがポジティブに作用していることも予想される。そこで、我々が既に作製・解析しているASK1ノックアウトマウスに、扁平上皮癌、腺癌を移植する実験により、口腔癌転移・浸潤への影響を評価する。その準備段階として、小胞体膜上遺伝子による細胞死シグナル伝達様式に関する検討を継続しており、詳細なシグナル伝達様式をさらに深く検討しているところである。

检查小鼠癌组织中内质网应激标志物，以评估使用体内培养细胞获得的结果，我们正在比较通过将各种癌细胞组皮下植入裸鼠中形成的癌症组织，并试图使用各种抗体进行组织病理学检查。作为监测内质网应激信号的一种手段，我们成功地开发了激活内质网的抗体，来自内质网的抗体，内胞质网状伴侣BIP和转录因子的抗体探测探测出在ER探测中均具有刺激的mRNA的探测，该探测器均具有均匀的概率，该概念会累积，该概念会累积均匀的功能，该概念会累积液体，从而累积了液体的促进，从而累积了均具有均匀的功能。和激活凋亡激活因子ask1-jnk途径的抗体。另一方面，评估的主题包括20多种类型的培养细胞，例如口服鳞状细胞癌，唾液腺癌，骨髓瘤等。使用上述抗体和检测探针，我们目前正在对内质网应激的类型进行详细研究，以响应缺氧和低营养而诱导这些细胞和正常细胞，一旦该过程完成，裸体小鼠就会植入并进行了实际的组织病理学检查。关于通过ASK1通过Ask1抑制凋亡信号抑制凋亡信号的癌变和口腔癌转移以及内质网应激引起的凋亡信号的研究，有望成为癌细胞增殖的机制之一，但从癌细胞转移和入侵的角度来看，还可以预期细胞凋亡在宿主的宿主方面具有作用。因此，我们将通过实验评估对口腔癌转移的影响，并通过将鳞状细胞癌和腺癌移植到我们已经产生和分析的Ask1基因敲除小鼠中。作为初步步骤，我们正在继续研究基因在内质网膜上的细胞死亡信号传导模式，现在正在进一步研究详细的信号传导模式。

项目成果

GHIPによるユビキチンープロテアソームシステムを介したMEKK2シグナルの時間的制御

GHIP 通过泛素蛋白酶体系统对 MEKK2 信号传导的时间调控

• 发表时间: 2009
• 作者: J.Watanabe;N.Abe;K.Takita;渡部潤也;Junya Watanabe;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;Junya Watanabe;Takeshi Maruyama;丸山剛;丸山剛
• 通讯作者: 丸山剛

siRNAライブラリーを用いた蛍光イメージングによるASK1分解関連ユビキチンリガーゼ同定法の確立

利用siRNA文库建立荧光成像鉴定ASK1降解相关泛素连接酶的方法

• 发表时间: 2010
• 作者: J.Watanabe;N.Abe;K.Takita;渡部潤也;Junya Watanabe;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;渡部潤也;Junya Watanabe;Junya Watanabe;Takeshi Maruyama;丸山剛
• 通讯作者: 丸山剛

CHIP-dependent termination of MEKK2 regulates temporal ERK activation required for proper hyperosmotic response

• DOI: 10.1038/emboj.2010.141
• 发表时间: 2010-08-04
• 期刊: EMBO JOURNAL
• 影响因子: 11.4
• 作者: Maruyama, Takeshi;Kadowaki, Hisae;Ichijo, Hidenori
• 通讯作者: Ichijo, Hidenori