鯨類の妊娠に特異的なタンパクに関する免疫生化学的および分子生物学的研究

鲸类妊娠特异性蛋白的免疫生化和分子生物学研究

• 批准号: 09J01649
• 负责人: 盛田 祐加
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J01649/
• 关键词: alpha-fetoprotein; pregnancy-associated glycoprotein; 免疫化学的測定系; cDNAクローニング; リアルタイムRT-PCR; 妊娠特異タンパク; スジイルカ; 鯨類; α-フェトプロテイン; 精製

本研究は鯨類における繁殖生理機構の解明および鯨類において臨床例のない妊娠特異タンパクの繁殖管理への応用を目的としている。具体的には胎児由来のalpha-fetoprotein (AFP)および胎盤由来のpregnancy-associated glycoprotein (PAG)に着目し、本年度はスジイルカAFP測定系の確立を行い、血清中のAFP量を調べるとともにAFP mRNAの発現性状を解析した。一方PAGについてはcDNAクローニングを行い、一次構造の解明を行った。胎児血清中のAFP濃度は胎児の発育に伴い濃度が減少する傾向が見られ、妊娠雌血清については妊娠中期に高値を示す傾向がみられた。さらにリアルタイム定量RT-PCRを用いて胎児および妊娠雌の各器官の測定を行ったところ、胎児肝臓において高レベルの発現が認められた。また胎児肝臓および胎児胎盤における同mRNAの妊娠進行に伴う変化を調べたところ、肝臓では発育にともない減少する傾向がみられたが、胎盤ではほとんど発現がみられなかった。以上により妊娠期間中のイルカ類において、AFPの由来は主に胎児肝臓であることが明らかとなった。また妊娠雌におけるAFPの血中レベルとその変動が明らかとなり、妊娠成立・維持の指標とする際に必要な基礎的知見が得られた。一方胎盤組織よりPAGのクローニングを行った結果、6種類のクローンが確認され、得られた同塩基配列は397-404個のアミノ酸翻訳領域から構成されていた。同アミノ酸配列は他の陸上哺乳類PAGと高い相同性を示したことより本種のPAGをコードしていると考えられ、鯨類で初めて遺伝子レベルでのPAGの存在があきらかとなった。AFPおよびPAGに関する基礎知見の集積は未知なる鯨類の繁殖生理学を理解する上で重要で意義深く、これら分子を鯨類の飼育・生態管理へ応用する際に必要不可欠な成果である。

这项研究旨在阐明鲸类动物中的生殖生理机制，并将其应用于鲸类动物中没有临床病例的妊娠特异性蛋白质的育种管理。具体而言，我们着重于胎儿的α-五蛋白（AFP）和胎盘中与孕妇相关的糖蛋白（PAG），我们建立了一个用于测量今年海豚AFP的系统，并检查了血清中AFP的量，并分析了AFP mRNA的表达特性。另一方面，将cDNA克隆用于PAG，以阐明主要结构。胎儿血清中的AFP浓度倾向于随着胎儿发育而降低，并且孕妇血清在妊娠中期有很高的水平。此外，当使用实时定量RT-PCR测量胎儿和孕妇的器官时，在胎儿肝脏中观察到高表达。此外，当我们研究相同的mRNA的变化以及胎儿肝脏和胎儿胎盘的妊娠进展时，随着肝脏在肝脏中的增长而降低的趋势，但在胎盘中几乎没有表达。因此，已经揭示了妊娠期间海豚中AFP的起源主要来自胎儿肝脏。此外，揭示了AFP的血液水平及其在怀孕女性中的波动，提供了将其用作妊娠成功或维持所必需的基本知识。同时，从胎盘组织克隆了PAG，并确认了六种类型的克隆，并且获得的核苷酸序列由397-404氨基酸翻译区组成。人们认为氨基酸序列可以编码该物种的PAG，因为它与其他陆地哺乳动物的PAG表现出很高的同源性，并且首先在鲸类动物中揭示了基因水平存在PAG的存在。关于AFP和PAG的基本知识的积累对于理解未知鲸类的繁殖生理学是重要而有意义的，并且在将这些分子应用于鲸类育种和生态管理时是必不可少的结果。

项目成果

いるかの妊娠がしりたい

我想知道伊鲁卡是否怀孕了

• 发表时间: 2011
• 作者: Yuka Morita;Naoshi Hiramatsu;Toshiaki Fujita;Haruna Amano;Takashi Todo;Akihiko Hara;盛田祐加
• 通讯作者: 盛田祐加

Characterization of alpha-fetoprotein in fetal striped dolphin (Stenella coeruleoalba) : purification of protein product and molecular cloning of the corresponding transcript

胎儿条纹海豚 (Stenella coeruleoalba) 中甲胎蛋白的表征：蛋白产物的纯化和相应转录物的分子克隆

• 发表时间: 2011
• 期刊: Zoological Science
• 影响因子: 0.9
• 作者: Yuka Morita;Naoshi Hiramatsu;Toshiaki Fujita;Haruna Amano;Takashi Todo;Akihiko Hara
• 通讯作者: Akihiko Hara