非分裂細胞を標的とした多機能性エンベロープ型ナノ構造体の創製

创建针对非分裂细胞的多功能包膜型纳米结构

基本信息

批准号：
09J01531
负责人：
鈴木亮佑
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、核酸ナノキャリアによる非分裂細胞への効率的な核酸送達を目的とする.これまでに、Mono-cationic detergent (MCD)で調製したナノ粒子化DNAを脂質二重膜からなるリポソームへ封入した多機能性エンベロープ型ナノ構造体(MEND)は、ナノ粒子化DNAのそれに近い粒子径であることを明らかとしている.MCDによる脂質膜への作用を原因として考察し、当該年度はMCDを基盤とした脂質膜枚数制御技術の確立に取り組んだ.はじめに、ナノ粒子化DNAの調製にポリカチオンを用いて、MCDとしてThonzonium bromide (TB)を脂質膜に含有させたMEND (TB-MEND)を構築した.その結果、最適なTB含量において、TB-MENDはナノ粒子化DNAに極めて近い粒子径を有することを明らかとした.さらに、脂質膜枚数の各種評価により、TB-MENDの脂質膜は1枚である可能性が高いことを明らかとした.本研究の目的を達成するために、1枚からなるTB含有脂質膜へ2枚の脂質膜からなるDi-lamellar MEND (D-MEND)を封入したリポソームの構築を行った.本戦略の特徴は、突破すべき生体膜の枚数と同一の3枚からなる脂質膜構造体を構築する点にある.その結果、TBの正電荷による静電的相互作用を経た時のみにおいて、負電荷脂質のみからなるTriple-layered MEND (TL-MEND)の構築に成功した.非分裂細胞モデルに対し、TL-MENDは脂質膜枚数の制御が困難な従来型MENDに対して非常に高いトランスフェクション活性を発揮することを明らかとした.1枚膜の簡便な形成が可能な本系は、細胞質を標的とする薬物への応用、1枚ごとに突破する生体膜に最適な脂質組成から構成される革新的パッケージングコンセプトへの進化が可能な基盤技術として幅広い利用が期待される.

这项研究旨在通过核酸纳米载体有效地将核酸递送到非分散细胞。迄今为止，已经揭示了多功能包络纳米结构（MEND），其中通过单阵容检测器制备的纳米颗粒DNA（MCD）封装在由脂质双层膜制成的脂质体中，其粒径与纳米颗粒DNA相似。我们研究了MCD对脂质膜的影响作为原因，并在今年努力建立一项技术，用于控制基于MCD的脂质膜的数量。首先，我们使用聚阳离子制备纳米颗粒DNA，并在脂质膜中包括溴化汤（TB）作为MCD。（结核病）是构建的。结果，据揭示了TB-MEND的粒径非常接近最佳TB含量的纳米颗粒DNA。此外，对脂质膜数量的各种评估表明，TB膜脂质膜是一种。为了实现这项研究的目的，我们构建了一个含有两个脂质膜的脂质体，其中包含二甲状腺菌（D-Mend）（D-Mend）。该策略的特征在于，脂质膜结构由三种与应破裂的生物膜数量相同。结果，只有当结核病的静电相互作用发生正电荷时，仅执行仅由负电荷脂质组成的三层修补。（TL-MEND）成功构建了。在非分散的细胞模型中，TL-MEND表现出针对常规修补的极高转染活性，这很难控制脂质膜的数量。该系统允许简单地形成单个膜，预计将被广泛用作基本技术，可以应用于针对细胞质的药物，并将其演变为创新的包装概念，由生物膜的最佳脂质组成组成，用于生物膜，这些膜破裂。