ゲノム多型の解析を中心とする血栓性疾患の発症に関わる遺伝的要因の解明

阐明与血栓性疾病发病相关的遗传因素，重点分析基因组多态性

基本信息

批准号：
13204037
负责人：
鈴木宏治
金额：
$ 3.97万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我が国においても、生活様式の欧米化や老齢人口の増加などにより血栓性疾患は増加の一途にあるが、その遺伝的背景については不明な点が多い。これまでは主に、欧米白人を中心に血栓症患者の遺伝子解析が行われ、抗血栓性因子のプロテインCやプロテインS等の血漿因子及びトロンボモジュリン(Thrombomodurin : TM)や血管内皮細胞プロテインCレセプター(Endothelial protein C receptor : EPCR)などの血管内皮抗血栓性因子の量的異常や機能異常が報告されており、その多くが遺伝子上の一塩基多型(Single nucleotide polymorphisms : SNPs)に起因することが示唆されている。しかし、日本人等のアジア系人種での解析は殆ど行われていない。そこで本研究は、日本人で血栓性疾患の発症に関与すると推定される遺伝子群の塩基変異や遺伝子多型を解析し、日本人を含むアジア系人種に固有な血栓性素因を解明することを目的とした。本年度は、先ず、血管内皮細胞上の抗血栓性因子であるTMのゲノム多型について、欧米で冠動脈疾患の発症に関わることが示唆されているTMのコード領域にみられるAla(GGC)25Thr(AGC)遺伝子多型を解析するため、PCR-RFLP解析法を開発し、健常人と冠動脈疾患患者のそれぞれ50人についてこの遺伝子多型の有無を解析した。その結果、この多型は日本人では健常人でも冠動脈疾患患者と同程度に存在することが明らかになった。次に、血栓症モデル動物を作製するため、欧米で血漿濃度の増加が心筋梗塞のリスクファクターになることが示唆されている血漿セリンプロテアーゼインヒビターの1つのプロテインCインヒビター(PCI)の遺伝子導入マウスを作製した。15kbヒトPCI遺伝子を導入して作製したヒトPCI遺伝子トランスジェニック(TG)マウスの表現型は概ね正常で、その血漿中には活性を有するヒトPCIが検出され、その組織分布もヒトにおけるそれに極めて類似していた。この結果は、ヒトPCI遺伝子TGマウスが血栓症研究のモデルマウスとしての有用性を示唆するものであり、今後、このマウスを用いてPCIによる血栓症発症の分子機構を解明したい。

在日本，由于生活方式的西化和人口老龄化的增加，血栓性疾病的数量持续增加，但其遗传背景仍有许多未知之处。迄今为止，基因分析主要针对血栓患者，主要是欧美白种人，研究了抗血栓因子蛋白C和蛋白S等血浆因子，以及血栓调节蛋白（TM）和血管内皮细胞蛋白C受体(内皮蛋白C受体(EPCR)等血管内皮抗血栓因子的数量和功能异常已有报道，其中许多是由遗传单核苷酸多态性引起的。：SNP）。然而，几乎没有对日本人等亚洲人种进行过分析。因此，本研究旨在分析一组被认为与日本人血栓性疾病发生有关的基因的核苷酸突变和遗传多态性，并阐明包括日本人在内的亚洲人种特有的血栓形成倾向。目的是今年，我们首先关注血管内皮细胞上的抗血栓因子TM的基因组多态性。Ala(GGC)25Thr(为了分析AGC)基因多态性，我们开发了PCR-RFLP分析方法，分析了其存在情况50 名健康个体和 50 名冠状动脉疾病患者中存在或缺乏该基因多态性。结果表明，这种多态性在日本健康受试者中的存在程度与冠状动脉疾病患者中的存在程度相同。接下来，为了创建血栓形成的动物模型，我们引入了蛋白 C 抑制剂 (PCI) 转基因小鼠，这是一种血浆丝氨酸蛋白酶抑制剂，在欧洲和美国，其血浆浓度升高被认为是心肌梗塞的危险因素。。通过引入15kb人类PCI基因创建的人类PCI基因转基因（TG）小鼠的表型总体正常，并且在血浆中检测到活性人类PCI，其组织分布也与我在人类中所做的非常相似。。这一结果表明，人PCI基因TG小鼠可作为血栓研究的模型小鼠，我们希望利用该小鼠来阐明PCI引起的血栓形成的分子机制。