甲状腺刺激ホルモンの生理学および分子生物学的研究

促甲状腺激素的生理和分子生物学研究

基本信息

批准号：
01J08721
负责人：
岡田令子
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

甲状腺刺激ホルモン(TSH)は、両生類下垂体ホルモンの中で、唯一実用に供するほどの量および純化の程度で得られていないホルモンである。そのためTSHの微量測定法が確立されておらず、放出を制御する視床下部因子の正体も明らかにされていなかった。前年度までに、筆者はウシガエルTSHβ合成ペプチドに対する抗体を用いて、ウシガエルTSHの放射免疫測定(RIA)法による測定系を確立した。本年度はこの測定系を用いて、ウシガエル下垂体細胞培養液中に放出されるTSH量を指標とし、下垂体細胞からのTSH放出におよぼす視床下部因子および甲状腺ホルモンの効果を調べた。ウシガエル視床下部酸抽出物を下垂体細胞に加えると、TSH放出が促進された。視床下部抽出物と同時に副腎皮質ホルモン放出ホルモン(CRH)の拮抗剤であるα-helical CRHを加えると、CRHによるTSH放出の度合いが減少することが確かめられた。このことから、視床下部に含まれるTSH放出因子(群)による活性は、CRH由来のものが含まれることが示された。また、下垂体細胞に甲状腺ホルモン(T_3、T_4)を加えで、TSH放出におよぼす影響を調べた。TSHの基礎分泌にはT_3およびT_4は効果を示さなかったが、CRHを加えてTSH放出を高めた上でT_3、T_4を加えたところ、CRHによって引き起こされるTSH放出が抑制された。次の段階として、培養細胞からのTSH放出量を指標として、各種カラムを用いて視床下部に含まれるTSH細胞刺激因子の単離・同定を進める計画である。

促甲状腺激素（TSH）是两栖动物垂体激素中唯一尚未获得足够数量或纯度以供实际使用的激素。因此，尚未建立测量痕量TSH的方法，并且控制TSH释放的下丘脑因子的身份尚未明确。到前一年，作者使用针对牛蛙TSHβ合成肽的抗体建立了牛蛙TSH的放射免疫分析（RIA）测量系统。今年，我们利用该测量系统，以牛蛙垂体细胞培养物中释放的TSH量为指标，研究下丘脑因子和甲状腺激素对垂体细胞释放TSH的影响。向垂体细胞中添加牛蛙下丘脑酸提取物可刺激 TSH 释放。已证实，当同时添加皮质类固醇释放激素（CRH）拮抗剂α-螺旋CRH和下丘脑提取物时，CRH释放的TSH程度会降低。这表明下丘脑中含有的TSH释放因子(群)的活性包括源自CRH的活性。我们还研究了向垂体细胞添加甲状腺激素（T_3、T_4）对 TSH 释放的影响。 T_3和T_4对TSH的基础分泌没有影响，但当通过添加CRH增加TSH释放后添加T_3和T_4时，CRH诱导的TSH释放受到抑制。下一步，我们计划以培养细胞释放的 TSH 量为指标，使用各种色谱柱分离和鉴定下丘脑中含有的 TSH 细胞刺激因子。