Improvement and application of Cryptosporidium detection with Florescent in situ Hybridization

荧光原位杂交技术检测隐孢子虫的改进及应用

• 批准号: 20760366
• 负责人: HASHIMOTO Atsushi
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Anan National College of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20760366/
• 关键词: Cryptosporidium; FISH; クリプトスポリジウム; FISH法; 水環境; 指標細菌; 遺伝子型; 蛍光抗体染色

Fluorescence in situ hybridization (FISH) was applied for specific detection and distinction of Cryptosporidium oocysts by microscopic observation. High fluorescence was observed using the DIAG-CRYR1 probe targeting 18S rRNA partial sequences to distinguish Cryptosporidium spp from Cryptosporidium parvum HNJ-1 oocysts. Combining FISH with fluorescence antibody staining, DAPI, and differential interference contrast observation was valuable for easy differentiation of Cryptosporidium oocysts by microscopic observation. Determination of Cryptosporidium variability by FISH was conducted. Heat inactivated oocysts declined FISH stainability until 100 hours in both PBS and filtrated sewage.

通过微观观察，应用了原位杂交（FISH），以特异性检测和区分隐孢子虫卵囊。使用diag-cryr1探针靶向18S rRNA局部序列，观察到高荧光，以区分隐孢子虫spp和parvum parvum parvum hnj-1卵囊。通过微观观察，将鱼与荧光抗体染色，DAPI和差异干扰对比度观察结合在一起对于轻松分化隐孢子虫卵囊非常有价值。进行了鱼类的隐孢子虫变异性测定。热灭活的卵囊降低了鱼类的污渍，直到PBS和过滤污水中的100小时。

项目成果

平田強(2009) FISH法-蛍光抗体染色法を併用したクリプトスポリジウムの判別の容易化

Tsuyoshi Hirata (2009) 使用 FISH 方法和荧光抗体染色相结合的方法更容易识别隐孢子虫

• 发表时间: 2009
• 期刊: 水環境学会誌 32(5)
• 作者: 橋本温;森田重光
• 通讯作者: 森田重光

FISH法-蛍光抗体染色法を併用したクリプトスポリジウムの判別の容易化

使用 FISH 方法和荧光抗体染色方法更轻松地鉴定隐孢子虫

• 发表时间: 2009
• 期刊: 水環境学会誌 32(5)
• 作者: 橋本温;森田重光;平田強
• 通讯作者: 平田強

水道におけるクリプトスポリジウム対策

供水中的隐孢子虫防治措施

• 发表时间: 2008
• 期刊: 環境技術 37
• 作者: 橋本温;森田重光;平田強;橋本温
• 通讯作者: 橋本温

オゾン・紫外線による微生物の不活化

通过臭氧和紫外线灭活微生物

• 发表时间: 2008
• 期刊: 月刊「水」 新年増刊号
• 作者: 橋本温;金子光美
• 通讯作者: 金子光美