新しい発想に基づくCDK基質の探索

基于新思路寻找CDK底物

基本信息

批准号：
20657032
负责人：
三村覚
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20657032/
关键词：
細胞周期 DNA複製ユビキチンリガーゼ出芽酵母 CDK リン酸化

项目摘要

CDK(cyclin-dependent kinase)は真核生物の細胞周期制御に中心的な働きを担っている蛋白質リン酸化酵素である。CDKはその活性化因子であるcyclinが結合することによってキナーゼ活性が上昇し標的蛋白質をリン酸化する。真核細胞は複数のCDKと、複数のサイクリンをもち、細胞周期の特定の時期に特定のサイクリンが発現することによって細胞周期特異的に基質をリン酸化する。CDKの基質の同定は進められているが、未だ未解明なものが多い。CDKの活性は細胞周期の様々なイベントを制御している。DNA複製もCDKの活性によって厳密に制御されているし、正確なDNA複製の進行は正常な細胞周期の進行に不可欠である。そこで安定なDNA複製に関わるユビキチンリガーゼ出芽酵母SCF^<Dia2>の機能解析を行った。その結果SCF^<Dia2>が複製フォークの構成成分であるMrc1およびCtf4と結合して複製フォークに局在すること、さらにSCF^<Dia2>が正常なフォークの進行に不可欠であることを見出し、報告した(Mimura et al.2009 EMBO J.)また、出芽酵母Cu18はCullinの一種であり、Mms1およびMms22と複合体を形成してDNA複製中の傷害の修復に関与することが示唆されている。私はCul8結合蛋白質を探索し、Esc4、Esc2、Orc5、およびCtf4を同定した。さらにcul8欠失株はテロメアでの転写のサイレンシングに欠損があることも見いだした(Mimura et al.2010)。加えて、細胞老化に関わるLag2蛋白質がユビキチンリガーゼの活性に影響を及ぼすことも見いだした(Liu et al., 2009)。

CDK（细胞周期蛋白依赖性激酶）是一种蛋白磷酸酶，在真核生物的细胞周期调节中起着核心作用。 CDK与其激活蛋白结合，从而增加激酶活性并磷酸化靶蛋白。真核细胞具有多个CDK和多个细胞周期蛋白，并且在细胞周期中特别在细胞周期中表达特定的细胞周期，在细胞周期中磷酸化。尽管正在识别CDK的底物，但许多人尚待理解。 CDK活性调节细胞周期中的各种事件。 DNA复制也严格由CDK活性控制，而DNA复制的准确进展对于正常的细胞周期进程至关重要。因此，进行了参与稳定的DNA复制的泛素连接酶肉质酵母SCF^<ia2>的功能分析。 The results found that SCF^<Dia2> binds to Mrc1 and Ctf4, which are components of the replicating fork and localizes to the replicating fork, and that SCF^<Dia2> is essential for normal fork progression (Mimura et al. 2009 EMBO J.), and it has been suggested that the budding yeast Cu18 is a type of Cullin, and is involved in the repair of injury during DNA replication.我搜索了CUL8结合蛋白，并确定了ESC4，ESC2，ORC5和CTF4。此外，发现CUL8缺失菌株在端粒的转录沉默中存在缺陷（Mimura等，2010）。此外，发现参与细胞衰老的lag2蛋白会影响泛素连接酶的活性（Liu等，2009）。