細胞の機能特性を制御するゲノム情報の網羅的解析

全面分析控制细胞功能特征的基因组信息

基本信息

批准号：
12202038
负责人：
中越英樹
金额：
--
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12202038/
关键词：
ショウジョウバエ機能特性消化管

项目摘要

ショウジョウバエのホメオボックス遺伝子dveは、腸管の吸収機能特性を制御している。銅イオンをキレートしたポルフィリン系化合物を選択的に吸収する性質からcopper cellと命名されている腸管細胞があり、この細胞が吸収機能を獲得するためには、dve遺伝子の一過性発現が必要である。つまり、dve遺伝子の発現が抑制されるべき時期に強制的にdve遺伝子を発現させると、形態的な異常を伴うことなく、吸収特性のみが阻害される。このように、吸収機能特性のみが選択的に阻害された個体群を安定的に得るための条件について検討を行った。500系統のGAL4エンハンサートラップ系統をスクリーニングし、copper cellを含む中腸細胞で発現のある系統を29系統同定した。GAL4依存的にGreen Fluorescent Protein(GFP)とdveを同時に発現できる系統を用い、dve遺伝子を持続的に発現するdve発現幼虫、およびGFPのみを発現できるコントロール幼虫について、吸収機能(copper fluorescence;UV光の照射によりオレンジ色の蛍光を発する)を測定した。6系統において吸収阻害効果が認められ、形態的特徴を保持できる条件について詳細に検討した結果、2系統について至適条件を決定できた。同定した2系統のうち、1系統は吸収は完全に阻害されるが低頻度で形態異常が誘導されてしまう系統、もう1系統は形態は正常だが低頻度で弱い吸収が認められてしまう系統である。これら2系統で誘導したdve発現幼虫とコントロール幼虫を比較し、2系統に共通して発現が変化している遺伝子は、吸収機能制御に関わる遺伝子として、解析の候補となり得るであろう。

果蝇同源盒基因 dve 控制肠道的吸收特性。有些肠道细胞因其能够选择性地吸收螯合铜离子的卟啉化合物而被称为铜细胞，并且这些细胞需要瞬时表达dve基因才能获得吸收功能。换句话说，如果在应该抑制dve基因表达的时候强制表达dve基因，则只会抑制吸收特性，而不会引起任何形态异常。这样，我们研究了稳定获得仅吸收功能特征被选择性抑制的群体的条件。我们筛选了 500 个 GAL4 增强子捕获系，并鉴定了 29 个在中肠细胞（包括铜细胞）中表达的系。使用能够以 GAL4 依赖性方式同时表达绿色荧光蛋白 (GFP) 和 dve 的菌株，我们研究了吸收功能（铜荧光；（当用 GAL4 照射时发出橙色荧光）在6个菌株中观察到吸收抑制效果，对能够维持形态特征的条件进行了详细研究，结果确定了2个菌株的最佳条件。鉴定出的两种菌株中，一种是吸收被完全抑制但在低频下诱导形态异常的菌株，另一种是形态正常但在低频下观察到弱吸收的菌株。将这两个品系中诱导的表达 dve 的幼虫与对照幼虫进行比较，两个品系中表达变化相同的基因可以作为参与吸收功能调节的基因进行分析。