オイルボディを介した新規の生理的役割

油体介导的新生理作用

基本信息

批准号：
08J02160
负责人：
島田貴士
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は,植物のオイルボディに局在する膜タンパク質の研究を行い,オイルボディが担う様々な生命現象の解明することを目的としている.前年度までに,シロイヌナズナ種子のオイルボディに蓄積しているOLE1を用いて,新たな形質転換技術であるFAST法(Fluorescence-Accumulating-Seed Technology法)を確立した.本年度はイネおよびダイズの種子で機能するプロモーターの下流でオレオシン-GFP融合遺伝子を誘導するコンストラクトを作製し,イネおよびダイズに形質転換した.その結果,それぞれの種子において実体顕微鏡下で蛍光を観察できたことから,幅広い作物へのFAST法の適用が可能になると考えている.またFAST法ではT1種子集団から形質転換種子を簡便に単離できるため,T1植物が致死になる形質転換体であっても,発芽時点からの比較観察が容易となる.シロイヌナズナのQa-SNARE SYP2の多重変異体や多重ノックダウン植物は,種子を付ける段階まで生育できず,解析が非常に困難であったが,FAST法を利用することで,多重ノックダウン植物を容易に観察できた.私は葉型オイルボディの形成機構を探るために,CL03-GFP融合タンパク質をCL03自身のプロモーターにより誘導する形質転換シロイヌナズナを葉型オイルボディのマーカーラインとして,葉型オイルボディの形成に異常を示す変異体のスクリーニングを行った.本年度はleaf oil-body-protein accumulation (loa)変異体のうち,loa3に関して遺伝子歩行によるラフマッピングにより変異の位置を絞り込んだ後,次世代シーケンサー(Solid)により全ゲノムシーケンスを行った.その結果原因遺伝子の候補を4つ見つけることに成功した.

这项研究旨在调查植物油体中局部的膜蛋白，并阐明油体携带的各种生命现象。到上一年，使用拟南芥种子的油体积累的OLE1被用来创建一种新的转化技术，称为Fast（荧光 - 蓄积种子），我们创建了一种诱导oleosin-GFP融合基因基因在蛋白酶促进剂下游的构建体，在稻米和大豆中发挥作用，并在稻米和大豆种子中发挥作用。结果，在立体显微镜下可以在每种种子中观察到荧光，我们认为可以将快速方法应用于多种农作物。此外，由于快速方法可以轻松地从T1种子种群中隔离转化体，即使T1植物是致命的，因此很容易观察到发芽时期的比较。拟南芥syp2多个突变体和多个敲低植物的质量保存无法生长，直到种子阶段，使分析极为困难，但是通过使用快速方法，很容易观察到多个敲低植物。为了探索叶型油体形成的机理，我使用了转化的拟南芥thaliana，thaliana诱导了Cl03自己的启动子作为叶型油体的标记线，并诱导Cl03-GFP融合蛋白，并在叶片型突变体中表现出异常的叶片型突变体，使其形成了叶子油体的形成。今年，在叶子油体蛋白积累（LOA）突变体中，我通过通过妇科步行通过ROA3进行粗略映射来缩小突变的位置，然后使用下一代测序仪（实心）测序全基因组。结果，我能够找到四个候选病因基因。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Oleosins have an important role in protecting oilseeds against freezing stress

油质蛋白在保护油籽免受冰冻胁迫方面发挥着重要作用

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takashi L.Shimada;Tomoo Shimada;Hideyuki Takahashi;Yoichiro Fukao;Ikuko Hara-Nishimura
通讯作者：
Ikuko Hara-Nishimura

Oil-Body-Membrane Proteins and Their Physiological Functions in Plants

DOI：
10.1248/bpb.33.360
发表时间：
2010-03-01
期刊：
BIOLOGICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN
影响因子：
2
作者：
Shimada, Takashi L.;Hara-Nishimura, Ikuko
通讯作者：
Hara-Nishimura, Ikuko

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Imura A.;Tsuji Y.;Murata M.;Maeda R. Kubota K.;Iwano A.;Obuse C.;Togashi K.;Tominaga M.;Kita N.;Tomiyama K.;Iijima J.;Nabehsima Y.;Fujioka M.;Asato R.;Tanaka S.;Kojima K.;Ito J.;Nozaki K.;Hashimoto N.;Ito T.;Nishio T.;Uchiyama T.;Fuj;駒田雅之;島田貴士;安達淳博
通讯作者：
安達淳博