ウシ胚発生能に及ぼすグルココルチコイドの影響とネコ子宮内膜の機能調節に関する研究

糖皮质激素对牛胚胎发育及猫子宫内膜功能调控的研究

基本信息

批准号：
08F08733
负责人：
奥田潔
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでにウシにおいて活性型グルココルチコイドであるコルチゾル(GC)が子宮内膜機能を調節することで妊娠に重要な役割を果たす可能性が示されてきた。しかしながら、GCが直接胚に及ぼす影響ならびに卵管に及ぼす影響については明らかにされていない。そこでウシ胚発生能に関するグルココルチコイドの影響を調べるため、ウシ初期胚ならびに卵管におけるGC合成酵素である11β-HSDおよびグルココルチコイドレセプター(GCR)mRNA発現を調べた。11β-HSD,GCRともに胚には発現がみられなかったが、卵管において発現がみられたことから、ウシにおいてGCは胚に直接作用するのではなく、卵管上皮細胞への作用を介して着床前の胚に作用する可能性が示された。また、ネコ子宮における機能調節機構を明らかにするために、ネコ子宮内膜における上皮および間質細胞の単離法を確立し、採取した細胞を用いてプロジェステロン(P4)および17β-エストラジオール(E2)がプロスタグランディン(PG)分泌ならびにPG合成酵素であるPTGS2 mRNA発現に及ぼす影響を調べた。上皮細胞においてE2単独またはP4との組み合わせ添加によりPGF2α分泌は刺激され、PGE2分泌はP4により刺激された。間質細胞ではE2およびP4ともにPG分泌に影響を及ぼさなかった。またE2およびP4ともに両細胞におけるPTGS2 mRNA発現に影響を及ぼさなかった。これらの結果から、性ステロイドホルモンは、子宮内膜におけるPG分泌に作用するが、この作用はPTGS2 mRNA発現変化を介したものではない可能性が示された。さらに同様の培養系を用い、TNFαおよびオキシトシン(OT)のPG分泌ならびにPG合成酵素であるシクロオキシゲナーゼ(COX2)発現への影響を検討した。その結果、他の動物種と同様にOTおよびTNFαはそれぞれ上皮細胞および間質細胞のPG分泌を刺激するがCOX2の発現には影響しないことが明らかとなった。

研究表明，皮质醇（GC）是一种活性糖皮质激素，可能通过调节牛的子宫内膜功能在妊娠中发挥重要作用。然而，GC 对胚胎和输卵管的直接影响尚未明确。因此，为了研究糖皮质激素对牛胚胎发育的影响，我们研究了早期牛胚胎和输卵管中GC合酶11β-HSD和糖皮质激素受体（GCR）的mRNA表达。 11β-HSD和GCR在胚胎中均不表达，但在输卵管中观察到表达，这表明在牛中GC不直接作用于胚胎，而是通过对输卵管上皮细胞产生这种作用的可能性。 - 已显示植入胚胎。此外，为了阐明猫子宫中的功能调节机制，我们建立了从猫子宫内膜中分离上皮细胞和基质细胞的方法，并使用收集的细胞，我们使用孕酮（P4）和17β-雌二醇（E2） ) 研究了前列腺素 (PG) 分泌和 PG 合成酶 PTGS2 mRNA 表达的影响。在上皮细胞中单独添加E2或与P4联合添加E2可刺激PGF2α分泌，P4可刺激PGE2分泌。 E2和P4都不影响基质细胞中的PG分泌。此外，E2 和 P4 都不影响两种细胞中 PTGS2 mRNA 的表达。这些结果表明，性类固醇激素作用于子宫内膜中的 PG 分泌，但这种作用可能不是由 PTGS2 mRNA 表达的变化介导的。此外，使用相同的培养系统，我们研究了 TNFα 和催产素 (OT) 对 PG 分泌和环氧合酶 (COX2)（一种 PG 合酶）表达的影响。结果显示，与其他动物物种类似，OT和TNFα分别刺激上皮细胞和基质细胞中的PG分泌，但不影响COX2的表达。