制御性T細胞レパートリーと抗原特異性の解析

调节性 T 细胞库和抗原特异性分析

基本信息

批准号：
08F08627
负责人：
堀昌平
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では制御性T細胞(Treg)分化と機能発現に関わる抗原特異性とTCRレパトワを解明することを目的とし、Treg由来核移植ES細胞クローン1D2から樹立した1D2-TCRβマウスを用いて以下の研究を行った。(1)Treg由来TCRの特異性の解析:1D2クローンがTreg由来であることを証明してその特異性を明らかにするためにRAG欠損マウスの骨髄細胞に1D2 αβTCRを発現させるレトロウィルスを感染させ、これを放射線照射したRAG欠損マウスに移入してTreg分化を解析した。その結果、この1D2 αβTCRを発現する細胞から確かにFoxp3+ T細胞が分化することを見出し、このクローンがTreg由来であることを明らかにした。(2)Tregおよびaborted TregのTCRレパトワ解析:最近我々は、Treg分化の過程で一部のFoxp3+ T細胞がFoxp3発現を失ってヘルパーT細胞へと分化する可塑性を示すステージがあることを見出し、このような細胞をaborted Tregと名付けた。Tregとaborted Tregの関係、そしてそれらの特異性を明らかにするために、1D2-TCRβマウスにFoxp3^<EGFPCre>, ROSA26^<RFP>, TCRCα+/- allelesを交配により導入し、ここからTreg(EGFP+), aborted Treg (EGFP-RFP+), non-Treg (EGFP-RFP-)を単離してVαレパトワを解析した。その結果、これらのレパトワは多少の重なりはあるものの全体として異なっており、ある特定の特異性を持ったFoxp3^+ T細胞のみがTreg分化においてabortされることを見出した。

这项研究旨在阐明参与调节T细胞（TREG）分化和功能表达的抗原特异性和TCR repatova，并使用从Treg衍生的核转移ES Cell Clone 1d2建立的1D2-TCRβ小鼠进行了以下研究。（1）分析Treg衍生的TCR的特异性：为了证明1d2克隆是从Treg衍生而来的，为了澄清其特异性，用表达1D2αβTCR的逆转录病毒感染了RAG缺陷小鼠的骨髓细胞，并将其转移到散热的RAG缺陷小鼠以分析Treg tregipipient。结果，我们发现FOXP3+ T细胞肯定与表达1d2αβTCR的细胞区分开，并揭示了该克隆来自Treg。（2）对Treg和Treg中止的TCR Repatoris分析：最近，我们发现在Treg分化过程中，有些Foxp3+ T细胞失去Foxp3表达并分化为辅助T细胞的阶段，我们命名了这些细胞中止Tregs。 To clarify the relationship between Tregs and aborted Tregs and their specificity, 1D2-TCRβ mice were introduced by mating with Foxp3^<EGFPCre>, ROSA26^<RFP>, and TCRCα+/- alleles, and from this, Treg(EGFP+), aborted Treg (EGFP-RFP+), and non-Treg (EGFP-RFP-) were分离以分析Vα雷它。结果，这些雷它的总体不同，尽管有一些重叠，并且只有具有一定特异性的Foxp3^+ T细胞在Treg分化中流产。