制御性T細胞レパートリーと抗原特異性の解析

调节性 T 细胞库和抗原特异性分析

基本信息

批准号：
08F08627
负责人：
堀昌平
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では制御性T細胞(Treg)分化と機能発現に関わる抗原特異性とTCRレパトワを解明することを目的とし、Treg由来核移植ES細胞クローン1D2から樹立した1D2-TCRβマウスを用いて以下の研究を行った。(1)Treg由来TCRの特異性の解析:1D2クローンがTreg由来であることを証明してその特異性を明らかにするためにRAG欠損マウスの骨髄細胞に1D2 αβTCRを発現させるレトロウィルスを感染させ、これを放射線照射したRAG欠損マウスに移入してTreg分化を解析した。その結果、この1D2 αβTCRを発現する細胞から確かにFoxp3+ T細胞が分化することを見出し、このクローンがTreg由来であることを明らかにした。(2)Tregおよびaborted TregのTCRレパトワ解析:最近我々は、Treg分化の過程で一部のFoxp3+ T細胞がFoxp3発現を失ってヘルパーT細胞へと分化する可塑性を示すステージがあることを見出し、このような細胞をaborted Tregと名付けた。Tregとaborted Tregの関係、そしてそれらの特異性を明らかにするために、1D2-TCRβマウスにFoxp3^<EGFPCre>, ROSA26^<RFP>, TCRCα+/- allelesを交配により導入し、ここからTreg(EGFP+), aborted Treg (EGFP-RFP+), non-Treg (EGFP-RFP-)を単離してVαレパトワを解析した。その結果、これらのレパトワは多少の重なりはあるものの全体として異なっており、ある特定の特異性を持ったFoxp3^+ T細胞のみがTreg分化においてabortされることを見出した。

在这项研究中，以下是具有1d2-TCRβ小鼠的1d2-TCRβ小鼠，一种核移植ES Clone Clone 1d2，旨在阐明与对照T细胞分化（TREG）和功能表达相关的抗原特异性和TCR Lepatova。我做了研究。（1）TCR衍生的TCR的特异性分析：1d2克隆感染了一种复古病毒，该病毒在RAG缺陷小鼠的骨脑大脑细胞中表达1d2αβTCR，以提供特异性，以使特异性从TREG差异化。它成辐射辐射的抹布 - 缺陷小鼠。结果，发现Foxp3+ T细胞肯定与表达1d2αβTCR的细胞区分开，表明该克隆来自Treg。（2）TCR Lepatowa对Treg和流产的Treg分析：最近，我们发现一些Foxp3+ T细胞丢失了一些Foxp3+ T细胞进入辅助T细胞，并分化为辅助T细胞。为了阐明Treg和Treg中止的关系，其特殊性Foxp3^<EGFPCRE>，Rosa26^<rfp>，TCRCα+/-等位基因通过跨越1D2-TCRβ小鼠而引入分离了Treg（EGFP-RFP+）和非Treg（EGFP-RFP-）以分析Vαrepatova。结果，尽管它们重叠了，但这些Lepatova略有不同，并发现在Treg分化中只有具有特定特异性的FOXP3^+ T细胞。