増殖細胞におけるCdk2の細胞内輸送とp27によるCdk2活性の制御機構の解明

阐明增殖细胞中Cdk2的胞内转运以及p27对Cdk2活性的控制机制

• 批准号: 08F08132
• 负责人: 池田 正明
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08132/
• 关键词: 国際研究者交流; 生化学; サイクリン依存性キナーゼ; 細胞周期; クロマチン; 細胞核; CDK阻害タンパク質; タンパク質; フランス

サイクリン依存性キナーゼ(Cdk)の一つであるCdk2は、細胞周期のG1後期からS期に活性化され、DNA複製に中心的な働きをしている。本研究は、Cdk2の核内における制御機構について新たな知見を得ることを目指している。1.新しい核細胞質分画法の確立従来の核細胞質分画法では、低分子量タンパク質の核外への漏出を防ぐことが出来ないことが判明した。そこで、界面活性剤の種類・濃度、塩濃度、浸透圧等の細胞溶解条件の詳細な検討をおこない、核内低分子量タンパク質の漏出が少ない核細胞質分画法を確立した。この方法は、タンパク質の核と細胞質の分布を解析するための有力な手段となると考えられる。2.クロマチン上でのCdk2活性制御機構の解析昨年度の解析で、クロマチン非結合Cdk2は、非イオン性界面活性剤で容易に抽出されるのに対して、クロマチン結合Cdk2は抽出されないことを見出した。さらに、クロマチン結合Cdk2が、その活性を保ったまま高塩濃度処理により抽出されることを明らかにした。そこで本年度は、核内に局在するクロマチン結合および非結合Cdk2を分離し、Cdk2の活性およびCdk2を制御する因子との相互作用を生化学的に解析した。その結果、クロマチンに結合したCdk2は、サイクリンを含むCdk2制御因子と複合体を形成していることが分かった。以上の結果からクロマチン上においてCdk2が制御を受けていることが示唆された。

CDK2是细胞周期蛋白依赖性激酶之一（CDK），从细胞周期的G1晚期激活，并在DNA复制中起着核心作用。这项研究旨在获得对CDK2核内调节机制的新见解。 1。建立一种新的核细胞质分馏方法，已经发现常规的核细胞质分馏方法无法阻止核外部的低分子量蛋白泄漏。因此，我们对细胞裂解条件进行了详细检查，例如表面活性剂类型和浓度，盐浓度和渗透压，并建立了一种核细胞质分馏法，其中核中的低分子量蛋白泄漏较少。该方法被认为是分析蛋白质核和细胞质分布的强大工具。 2。在去年分析中控制CDK2活性的机制，我们发现用非离子表面活性剂很容易提取染色质 - 毫无根据的CDK2，而未提取染色质CDK2。此外，揭示了染色质结合的CDK2在保持其活性的同时通过高盐浓度处理提取。因此，今年，我们分离了核酸核中局部局部的染色质结合和未结合的CDK2，并在生化分析了CDK2的活性以及与调节CDK2的因子的相互作用。结果，发现与染色质结合的CDK2与CDK2调节剂（包括细胞周期蛋白）形成复合物。以上结果表明CDK2受到染色质的调节。

项目成果

Association of caspase-8 mutation with chemoresistance to cisplatin in HOC313 head and neck squamous cell carcinoma cells

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2009.10.090
• 发表时间: 2009-12-18
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Liu, Juan;Uematsu, Hiroshi;Ikeda, Masa-Aki
• 通讯作者: Ikeda, Masa-Aki

Chemoresistance of a head and neck squamous cell carcinoma cell line carrying caspase 8 mutation

携带caspase 8突变的头颈鳞状细胞癌细胞系的化疗耐药性

• 发表时间: 2008
• 作者: Juan Liu;Nobuo Tsuchida;Hirosi Uematsu;Masa-Aki Ikeda
• 通讯作者: Masa-Aki Ikeda

Tumor Growth Suppression by the Coactivator p300

• DOI: 10.1016/s1349-0079(08)80025-4
• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Oral Biosciences
• 影响因子: 2.4
• 作者: Tamaki Suganuma;M. Ikeda

Expression of estrogen receptors during postnatal development of the brain

出生后大脑发育过程中雌激素受体的表达

• 发表时间: 2008
• 作者: Ikeda Y;Ikeda MA
• 通讯作者: Ikeda MA

The Cdk inhibitor p27/KIP1 gene senses pRB dysfunction through E2F

Cdk 抑制剂 p27/KIP1 基因通过 E2F 感知 pRB 功能障碍

• 发表时间: 2008
• 作者: Ozono E;Ikeda MA;Ohtani K
• 通讯作者: Ohtani K