p53点突然変異マウス作成によるがん治療モデルの開発

通过创建p53点突变小鼠开发癌症治疗模型

基本信息

批准号：
11140219
负责人：
中村健司
金额：
$ 1.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、個体発がんにおけるp53遺伝子の突然変異と腫瘍の組織特異性とに注目し、p53欠損マウスを作成し解析してきた。ヒトの腫瘍から検出されるp53遺伝子の変異は点突然変異が最も多く、さらに変異のホットスポットがいくつか存在する。特に、Li-Fraumeni症候群のホットスポットの1つである、R248W変異は、大腸がんや胃がんで多く検出される。また、R249S変異は、肝がんで多く検出される。これらヒト腫瘍より見い出されるp53遺伝子の点突然変異がドミナントネガティブに働く可能性を考えると、特定の点突然変異が腫瘍の組織特異性を決めている可能性がある。そこで本研究は、p53遺伝子点突然変異(R245W)マウスとp53遺伝子欠失変異マウスを作成し、両者を解析し比較検討した。p53遺伝子点突然変異(R245W)マウスに認められた自然発生腫瘍は、その多くが胸腺リンパ腫であり、ヒトが多く認められる腫瘍の種類(大腸がんや胃がん)とは異なっていた。さらに、p53遺伝子欠失変異マウスとp53遺伝子点突然変異マウスの寿命と自然発生腫瘍を経過観察した結果、腫瘍の種類や発症時期がとても類似していた。以上の結果から、変異p53(R245W)は発症する腫瘍の特異性には関与せず、機能喪失型の変異であることが明かになった。一方、p53遺伝子欠失変異マウスは、高頻度に胸腺にリンパ腫を発症し、生後6ケ月以内に死亡する。p53欠損マウスに、リンパ球系でのみ正常p53を特異的に発現する遺伝子を導入したトランスジェニックマウスを作成した結果、p53欠損マウスの多くの死因である胸腺リンパ腫が減少し延命した。すなわちp53遺伝子はがん抑制遺伝子として機能し、p53欠損マウスは正常p53を発現させることによって、胸腺リンパ腫を抑制できることが解った。本研究よりヒトの腫瘍で頻繁に検出されるp53遺伝子点突然変異(R245W)は、機能喪失型の変異であることが明かになった。そこで、p53遺伝子欠失変異マウスの実験と同様に、点突然変異に対して正常遺伝子を導入することで腫瘍が抑制できるかどうか検討したい。近年、p53をターゲットにしたヒトに対する遺伝子治療も始まり、一部良好な結果が報告されている。我々が開発したヒトに多い点突然変異によってひき起こされるがんの疾患モデルは、今後もがん治療において有効な情報が得られるものと期待される。

我们重点关注个体致癌过程中的 p53 基因突变和肿瘤组织特异性，并生成并分析了 p53 缺陷小鼠。在人类肿瘤中检测到的最常见的p53基因突变是点突变，也存在一些突变热点。特别是，R248W突变是Li-Fraumeni综合征的热点之一，在结肠癌和胃癌中经常检测到。此外，R249S 突变经常在肝癌中检测到。考虑到在这些人类肿瘤中发现的 p53 基因点突变可能以显性失活方式发挥作用，特定的点突变可能决定肿瘤的组织特异性。因此，在本研究中，我们创建了p53基因点突变（R245W）小鼠和p53基因缺失突变小鼠，并对两者进行了分析和比较。在p53基因点突变（R245W）的小鼠中观察到的大多数自发性肿瘤是胸腺淋巴瘤，这与人类常见的肿瘤类型（结直肠癌和胃癌）不同。此外，观察p53基因缺失突变小鼠和p53基因点突变小鼠的寿命和自发性肿瘤的结果显示，肿瘤类型和发病时间非常相似。上述结果表明，p53突变（R245W）不涉及肿瘤发生的特异性，是一种功能丧失突变。另一方面，p53基因缺失突变小鼠的胸腺经常出现淋巴瘤，并在出生后六个月内死亡。通过在 p53 缺陷小鼠中引入一种仅在淋巴细胞中特异性表达正常 p53 的基因，创造出转基因小鼠，从而减少了 p53 缺陷小鼠的常见死因——胸腺淋巴瘤，并延长了寿命。换句话说，p53基因起到抑癌基因的作用，并且发现p53缺陷的小鼠能够通过表达正常的p53来抑制胸腺淋巴瘤。这项研究表明，在人类肿瘤中经常检测到的p53基因点突变（R245W）是一种功能丧失突变。因此，我们想检查是否可以通过将正常基因引入点突变来抑制肿瘤，类似于p53基因缺失突变小鼠的实验。近年来，针对p53的人类基因治疗已经开始，并报道了一些有利的结果。我们开发的人类常见的点突变引起的癌症疾病模型有望继续为癌症治疗提供有用的信息。