大腸癌微小環境を介した肝転移機構の解析と新規分子標的治療の開発

结直肠癌微环境介导的肝转移机制分析及新分子靶向治疗开发

• 批准号: 25462048
• 负责人: 中村 光一
• 金额: $ 3.16万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25462048/
• 关键词: 大腸癌; 肝転移; 腫瘍間質; 微小環境; micro RNA

大腸癌の死亡率低下に向け、肝転移の制御は重要な課題である。近年がんの転移過程における、腫瘍周囲間質細胞を中心とした腫瘍微小環境の関与が報告されている。本研究は、腫瘍周囲間質内におけるmicroRNA およびその標的遺伝子の発現を測定し、大腸癌肝転移過程への関与を解析することを目的とする。浜松医科大学第二外科において過去12 年間に切除された、化学療法歴のない大腸癌20症例（無肝転移再発10例、同時性肝転移5例、術後異時性肝転移再発5例）の原発巣切除検体のFFPE sampleからlaser capture microdissection (LCM)法にて腫瘍間質組織を採取し、total RNAを抽出。RNAのquality checkを行い、解析可能と判断された16例（無肝転移再発8例、同時性肝転移4例、術後異時性肝転移再発4例）のRNAをMegaplex PreAmp Primersでプリアンプリフィケーションを行った後に、TaqMan microRNA Arrayを用いてmiRNA発現を計測し、原発巣の腫瘍周囲間質細胞におけるmiRNA発現と同時性、異時性肝転移の有無との関係を解析した。クラスタリング解析では、無肝転移再発8例＋異時性肝転移再発4例と同時性肝転移4例の2群に分かれた。無肝転移再発8例と比較して同時性肝転移4例において、miR-302bなど複数のmiRNA発現が低下していた。以上の結果より、大腸癌原発組織内の腫瘍間質細胞におけるmiRNA発現変動を介して、ある（分泌）タンパクの発現が上昇し、原発巣における癌細胞の教育あるいは肝における転移癌細胞の発育を促進している可能性が示唆された。

控制肝转移是降低结直肠癌死亡率的重要问题。近年来有报道以瘤周基质细胞为中心的肿瘤微环境参与了癌症的转移过程。本研究的目的是测定瘤周间质中microRNA及其靶基因的表达量，分析其在结直肠癌肝转移过程中的参与情况。滨松大学医学院二外科近12年切除的无化疗史的结直肠癌20例（非肝转移复发10例，同时肝转移5例，肝转移5例）异时肝转移术后复发）采用激光捕获显微切割（LCM）方法从原发肿瘤切除标本的FFPE样本中收集肿瘤间质组织，并提取总RNA。我们对RNA进行了质量检查，并使用Megaplex PreAmp Primers对被判断为可分析的16例（8例无肝转移复发、4例同时性肝转移、4例术后异时性肝转移复发）中的RNA进行了预扩增。此后，我们使用 TaqMan microRNA Array 测量 miRNA 表达，并分析原发肿瘤瘤周基质细胞中 miRNA 表达与是否存在同步或异时肝转移之间的关系。聚类分析中，将患者分为2组：8例非肝转移复发患者，4例异时肝转移复发患者，4例同时肝转移患者。与 8 名复发但无肝转移的患者相比，4 名同步肝转移患者的多种 miRNA（包括 miR-302b）的表达降低。综合上述结果可知，通过原发性结直肠癌组织中肿瘤基质细胞miRNA表达量的变化，某种（分泌型）蛋白的表达增加，增加某些（分泌型）蛋白的表达，从而促进癌细胞的教育有人认为这可能会促进原发性肿瘤或肝脏转移性癌细胞的发展。