小胞体を起点とする骨軟骨代謝の制御と破綻

源自内质网的骨软骨代谢的控制和破坏

• 批准号: 24689058
• 负责人: 齋藤 敦
• 金额: $ 16.56万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24689058/
• 关键词: BBF2H7; 小胞体ストレス応答; 軟骨細胞; Sox9; ヘッジホッグシグナル; 細胞増殖; OASIS; 骨芽細胞; 小胞体ストレス

我々が同定した小胞体ストレストランスデューサーBBF2H7の解析を行った。この分子は小胞体ストレスに応答して膜内切断を受け、DNA結合領域であるbZIPドメインを含むN末端側が核内へ移行して転写因子として機能する。BBF2H7欠損マウスは軟骨基質タンパク質の分泌異常を伴う重度の軟骨形成不全を示す。BBF2H7欠損軟骨細胞に転写因子として機能するN末端断片を発現させると軟骨基質タンパク質の分泌異常は改善した。転写因子BBF2H7の軟骨細胞における標的遺伝子のひとつは小胞体-ゴルジ間のタンパク質輸送に必須の因子であるSec23aであり、BBF2H7欠損軟骨細胞ではSec23aの減少によって軟骨基質タンパク質の分泌異常が引き起こされることを見出している。さらに軟骨細胞におけるBBF2H7の転写制御機構を明らかにするために解析を行った。BBF2H7プロモーター領域内の配列を調べると、Sox9が結合し得るSox-binding siteが存在していた。Sox9は軟骨細胞の分化、成熟を制御するマスター転写因子であり主要な軟骨基質タンパク質である2型コラーゲンの転写を誘導する。初代培養軟骨細胞においてSox9を過剰発現させるとBBF2H7の転写は促進され、ただちにタンパク質へと翻訳された。一連のプロモーターアッセイによって、Sox9がBBF2H7のプロモーター領域に存在するSox-binding siteに直接的に結合してBBF2H7の転写誘導を行っていることが明らかになった。さらにSox9によって引き起こされた2型コラーゲンをはじめとする軟骨基質タンパク質の大量合成が小胞体の負荷を増大させ、生理的な小胞体ストレスを誘発することが分かった。BBF2H7はこの生理的小胞体ストレスに応答して活性化し、大量に合成された軟骨基質タンパク質をスムーズに細胞外へ分泌していることを明らかにした。

我们对我们确定的内质网应激传感器BBF2H7进行了分析。该分子响应内质网应激而经历膜内裂解，而含有BZIP结构域（DNA结合区域）的N末端侧迁移到细胞核中，并作为转录因子起作用。 BBF2H7缺乏小鼠表现出严重的软骨功能障碍，并且软骨基质蛋白异常分泌。在BBF2H7缺乏的软骨细胞中，N末端片段的表达改善了软骨基质蛋白的异常分泌。转录因子BBF2H7的软骨细胞中的靶基因之一是Sec23a，这是内质网状 - 高尔基蛋白传输的重要因素，并且已经发现，在BBF2H7缺乏缺陷的软骨细胞中，降低了Sec23a的Sec23a，导致Sec23a引起异常的蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质。此外，进行了分析以阐明软骨细胞中BBF2H7的转录调节机制。当检查了BBF2H7启动子区域内的序列时，就有一个SOX结合位点可以在其中结合SOX9。 Sox9是调节软骨细胞分化和成熟的主转录因子，并诱导胶原蛋白2型胶原蛋白（主要软骨基质蛋白）的转录。 Sox9在原代培养的软骨细胞中的过表达促进了BBF2H7的转录，并立即转化为蛋白质。一系列启动子测定法显示，Sox9直接与位于BBF2H7启动子区域的Sox结合位点结合，以诱导BBF2H7的转录。此外，发现软骨基质蛋白的质量合成（包括由Sox9引起的2型胶原蛋白）增加了内质网的载荷并诱导生理内质网应激。据显示，BBF2H7因这种生理性内质网应激而被激活，并顺畅地分泌大量合成软骨基质蛋白到细胞外细胞中。

项目成果

岩本秀雄、齋藤敦、今泉和則

岩本英夫、斋藤敦、今泉一典

• 发表时间: 2013
• 作者: 齋藤敦;今泉和則;小胞体ストレスセンサーBBF2H7の分泌切片による癌細胞増殖促進作用
• 通讯作者: 小胞体ストレスセンサーBBF2H7の分泌切片による癌細胞増殖促進作用

Sox9による小胞体ストレストランスデューサーBBF2H7の発現制御

Sox9 调节内质网应激传感器 BBF2H7 的表达

• 发表时间: 2013
• 作者: 立本淑子;齋藤敦;木戸美織;日野健太;今泉和則
• 通讯作者: 今泉和則

CLINICAL CALCIUM, Vol.23 (11)

临床钙，第 23 卷 (11)

• 发表时间: 2013
• 作者: 齋藤敦;今泉和則
• 通讯作者: 今泉和則

Promotion of Cancer Cell Proliferation by Cleaved and Secreted Luminal Domains of ER Stress Transducer BBF2H7.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0125982
• 发表时间: 2015
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Iwamoto H;Matsuhisa K;Saito A;Kanemoto S;Asada R;Hino K;Takai T;Cui M;Cui X;Kaneko M;Arihiro K;Sugiyama K;Kurisu K;Matsubara A;Imaizumi K
• 通讯作者: Imaizumi K

小胞体ストレスセンサーBBF2H7の小胞体内腔ドメインの新機能

内质网应激传感器BBF2H7内质网管腔结构域的新功能

• 发表时间: 2012
• 作者: 齋藤 敦;浅田 梨絵;岩本 秀雄;泉 聡太朗;金本 聡自;今泉 和則
• 通讯作者: 今泉 和則