小胞体を起点とする骨軟骨代謝の制御と破綻

源自内质网的骨软骨代谢的控制和破坏

基本信息

批准号：
24689058
负责人：
齋藤敦
金额：
$ 16.56万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

我々が同定した小胞体ストレストランスデューサーBBF2H7の解析を行った。この分子は小胞体ストレスに応答して膜内切断を受け、DNA結合領域であるbZIPドメインを含むN末端側が核内へ移行して転写因子として機能する。BBF2H7欠損マウスは軟骨基質タンパク質の分泌異常を伴う重度の軟骨形成不全を示す。BBF2H7欠損軟骨細胞に転写因子として機能するN末端断片を発現させると軟骨基質タンパク質の分泌異常は改善した。転写因子BBF2H7の軟骨細胞における標的遺伝子のひとつは小胞体-ゴルジ間のタンパク質輸送に必須の因子であるSec23aであり、BBF2H7欠損軟骨細胞ではSec23aの減少によって軟骨基質タンパク質の分泌異常が引き起こされることを見出している。さらに軟骨細胞におけるBBF2H7の転写制御機構を明らかにするために解析を行った。BBF2H7プロモーター領域内の配列を調べると、Sox9が結合し得るSox-binding siteが存在していた。Sox9は軟骨細胞の分化、成熟を制御するマスター転写因子であり主要な軟骨基質タンパク質である2型コラーゲンの転写を誘導する。初代培養軟骨細胞においてSox9を過剰発現させるとBBF2H7の転写は促進され、ただちにタンパク質へと翻訳された。一連のプロモーターアッセイによって、Sox9がBBF2H7のプロモーター領域に存在するSox-binding siteに直接的に結合してBBF2H7の転写誘導を行っていることが明らかになった。さらにSox9によって引き起こされた2型コラーゲンをはじめとする軟骨基質タンパク質の大量合成が小胞体の負荷を増大させ、生理的な小胞体ストレスを誘発することが分かった。BBF2H7はこの生理的小胞体ストレスに応答して活性化し、大量に合成された軟骨基質タンパク質をスムーズに細胞外へ分泌していることを明らかにした。

我们分析了我们确定的内质网应激传感器 BBF2H7。该分子响应内质网应激而发生膜内裂解，并且含有 DNA 结合 bZIP 结构域的 N 末端侧易位到细胞核中，在细胞核中充当转录因子。 BBF2H7 缺陷小鼠表现出严重的软骨发育不全，并伴有软骨基质蛋白分泌异常。 BBF2H7 缺陷软骨细胞中作为转录因子发挥作用的 N 末端片段的表达改善了软骨基质蛋白的异常分泌。软骨细胞中转录因子BBF2H7的靶基因之一是Sec23a，它是内质网和高尔基体之间蛋白质运输的必需因子，在BBF2H7缺陷的软骨细胞中，Sec23a的减少会导致软骨基质蛋白的异常分泌。我正在找出答案。此外，我们进行了分析以阐明软骨细胞中 BBF2H7 的转录控制机制。对 BBF2H7 启动子区域内序列的检查揭示了 Sox9 可以结合的 Sox 结合位点的存在。 Sox9 是一种主转录因子，控制软骨细胞的分化和成熟，并诱导 2 型胶原（一种主要软骨基质蛋白）的转录。原代培养的软骨细胞中 Sox9 的过度表达促进了 BBF2H7 的转录，并立即翻译成蛋白质。一系列启动子测定表明，Sox9 通过直接结合 BBF2H7 启动子区域中的 Sox 结合位点来诱导 BBF2H7 转录。此外，研究发现，Sox9诱导的软骨基质蛋白（包括2型胶原蛋白）的大量合成增加了内质网的负荷并诱导生理性内质网应激。我们发现，BBF2H7 响应这种生理内质网应激而被激活，并顺利地将大量合成的软骨基质蛋白分泌到细胞外。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

岩本秀雄、齋藤敦、今泉和則

岩本英夫、斋藤敦、今泉一典

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
齋藤敦;今泉和則;小胞体ストレスセンサーBBF2H7の分泌切片による癌細胞増殖促進作用
通讯作者：
小胞体ストレスセンサーBBF2H7の分泌切片による癌細胞増殖促進作用

Sox9による小胞体ストレストランスデューサーBBF2H7の発現制御

Sox9 调节内质网应激传感器 BBF2H7 的表达

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
立本淑子;齋藤敦;木戸美織;日野健太;今泉和則
通讯作者：
今泉和則

CLINICAL CALCIUM, Vol.23 (11)

临床钙，第 23 卷 (11)

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
齋藤敦;今泉和則
通讯作者：
今泉和則

Promotion of Cancer Cell Proliferation by Cleaved and Secreted Luminal Domains of ER Stress Transducer BBF2H7.

DOI：
10.1371/journal.pone.0125982
发表时间：
2015
期刊：
PloS one
影响因子：
3.7
作者：
Iwamoto H;Matsuhisa K;Saito A;Kanemoto S;Asada R;Hino K;Takai T;Cui M;Cui X;Kaneko M;Arihiro K;Sugiyama K;Kurisu K;Matsubara A;Imaizumi K
通讯作者：
Imaizumi K

Chondrocyte proliferation controlled by secreted partial fragments of endoplasmic reticulum stress transducer BBF2H7

内质网应激传感器BBF2H7分泌的部分片段控制软骨细胞增殖