大腸発癌におけるACF-SSA/P-cancer sequenceの証明

ACF-SSA/P-cancer 序列在结直肠癌发生中的证明

基本信息

批准号：
24590942
负责人：
岡本耕一
金额：
$ 3.41万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24590942/
关键词：
ACF SSA/P DNAメチル化アレイ

项目摘要

大腸鋸歯状病変の一つであるsessile serrated adenoma /polyp(SSA/P)は、右側結腸に好発し、癌化ポテンシャルが高いことが報告されているが、その発生機序及び発癌機序は不明である。今回、我々は大腸微小病変であるaberrant crypt foci(ACF)がSSA/Pの前病変であると仮定し、ACF-SSA/P-cancer sequenceを立証することを本研究の目的とした。まず、SSA/P症例ならびにSSA/P合併癌症例を対象に拡大内視鏡を用いて右側結腸のACFを観察し、SSA/P及び癌患者におけるACFの数や大きさを解析して健常人と比較検討した。15人の健常人、40人のSSA/P患者、2人のSSA/P合併癌患者の右側結腸ACFを観察したところ、それぞれ平均0.13±0.33個,3.95±2,14個、7.24±1.67個のACFを認め、健常人、SSA/P患者、SSA/P合併癌患者の順に平均ACF数の増加を認めた。また生検組織では、一部のACFがSSA/Pと類似の病理所見(腺底部の腺管拡張、分岐)を有していた。また、SSA/Pや右側結腸癌ではBRAF変異やいくつかの遺伝子メチル化が報告されていることから、ACF、SSA/P、SSA/P合併癌のKRAS,BRAF変異、DNAメチル化アレイMicroarray-based Integrated Analysis by Isoschizomer(MIAMI)法を用いてメチル化遺伝子を網羅的に解析した。KRAS変異はACF、SSA/P、癌の順にそれぞれ15×15%,0%、BR《F変異はそれぞれ70%, 80%, 100%であり、高頻度にBRAF変異を認めた。また、MIAMI法ではACF、SSA/P、癌のメチル化されていた平均遺伝子数はそれぞれ9.4個、37.2個、152.6個認め、ACF、SSA/P、癌の順に増加していた。またMIAMI法で確認した遺伝子の内、ACF、SSA/P、癌に共通に認められた遺伝子を7遺伝子認め、ACF-SSA/P-cancer sequenceにおいて極めて重要な遺伝子と考えられた。またそれらをMSP法にて確認した。つまり、ACFの段階からBRAF変異と限られた遺伝子のメチル化を認め、SSA/Pではさらにメチル化された遺伝子が蓄積し、癌ではP53変異やMLH1遺伝子などの重要な遺伝子のメチル化が生じていることが証明された。つまり、ACFからSSA/Pに進展し、SSA/Pから癌に進展する機序を分子生物学的手法により解明することができた。

连锯齿的腺瘤/息肉（SSA/P）是结肠锯齿状病变之一，在右结肠中发达，据报道具有很高的癌症潜力，但其发育和癌变的机制尚不清楚。在这里，我们假设大型肠道微粒异常的隐窝灶（ACF）是SSA/p的质量，这项研究的目的是建立ACF-SSA/P-CANCER序列。首先，在SSA/P病例和与SSA/P相关的癌症病例中，使用内窥镜增大来观察右结肠中的ACF，并分析了SSA/P和癌症患者的ACF的数量和大小，并与健康个体进行了比较。 When we observed the right colon ACFs of 15 healthy individuals, 40 SSA/P patients, and two SSA/P-complicated cancer patients, we found an average of 0.13±0.33, 3.95±2,14, and 7.24±1.67 ACFs, respectively, and an increase in the average number of ACFs was observed in healthy individuals, SSA/P patients, and patients with SSA/P-complicated cancer patients.在活检组织中，一些ACF的病理发现类似于SSA/P（腺体碱基扩张，发散）。此外，在SSA/P和右侧结肠癌中，BRAF突变和几种基因甲基化已经报道了使用KRAS，ACF，SSA/P和DNA甲基化阵列微阵列基于Isoschizomer（MiamiAmi）方法的甲基化基因。 KRAS突变在ACF，SSA/P和癌症的顺序中为15×15％和0％，BR 《F突变分别为70％，80％和100％，经常观察到BRAF突变。此外，发现ACF，SSA/P和癌症中甲基化基因的平均数量分别为9.4、37.2和152.6，其ACF，SSA/P和癌症的顺序增加。在通过迈阿密方法证实的基因中，发现了ACF，SSA/P和癌症中常见的七个基因，并且在ACF-SSA/P-癌序列中被认为非常重要。还使用MSP方法确认了它们。换句话说，从ACF阶段观察到BRAF突变和有限的基因甲基化，SSA/P的进一步甲基化基因的积累，癌症证明，重要基因的甲基化（例如p53突变和MLH1基因）发生了。换句话说，使用分子生物学方法阐明了从ACF到SSA/P到从SSA/P到癌症的机制。