吸啜から咀嚼への移行期における体性感覚伝達機構の発達

从吸吮到咀嚼过渡期体感传递机制的发展

基本信息

批准号：
10877334
负责人：
白川哲夫
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

胎生期ならびに吸啜期に神経系において発現する蛋白の局在と機能について免疫組織学的に解析を進めた。Srcファミリーチロシンキナーゼは、細胞内情報伝達系において重要な役割を果たしており、なかでもFynは出生直後から、嗅覚をはじめとする知覚伝達系の発達に関与していることが知られている。本研究では、Fynによってリン酸化され、細胞の分化や移動を制御している可能性が示唆されているEfs(embryonal Fyn-associated substrate)の、ラット視床下部ならびに脳幹における発現を、Efs抗体を用いた免疫染色により明らかにした。Efs蛋白は主として脳室上衣細胞ならびにグリア細胞の細胞質の核周囲部に局在していることが明らかとなった。とくに脳室上衣細胞には強い発現が認められた。近年、上衣細胞のなかに神経幹細胞としての機能を有している細胞が含まれていることが報告されており、Efsのリン酸化によるシグナル伝達は神経系の細胞の増殖や分化に深く関わっていると考えられる。中枢における体性感覚の伝達・可塑性メカニズムを明らかにするためのステップとして、新生ラットより単離した神経細胞をマルチ電極ディッシュ上で分散培養し、4〜8個の単一神経細胞の自発発火を同時計測した。複数の神経スパイクの発火タイミングについて自己相関ならびに相互相関解析を行って、個々の神経細胞の発火特性ならびに神経細胞間のシナプス形成とその性質について調べた。ラットの視床下部ニューロンでは、相互相関法による解析の結果、482のペアのうち138に興奮性あるいは抑制性のシナプス結合が確認された。興奮性の結合が認められた細胞間のスパイク遅延時間は0.3〜20ミリ秒、抑制性結合での発火抑制時間は約100〜140ミリ秒であった。興奮性結合のうち、スパイク遅延時間が2ミリ秒以下のものは単シナプス性と考えられ、全体の過半数を占めた。

我们对胚胎和吸吮阶段神经系统中表达的蛋白质的定位和功能进行了免疫组织化学分析。 Src 家族酪氨酸激酶在细胞内信号转导系统中发挥着重要作用，特别是 Fyn 已知参与出生后立即感觉转导系统（包括嗅觉）的发育。在这项研究中，我们使用 Efs 抗体来研究 Efs（胚胎 Fyn 相关底物）的表达，该底物被 Fyn 磷酸化，并被认为可以控制大鼠下丘脑和脑干中的细胞分化和迁移。免疫染色。结果表明，Efs蛋白主要定位于心室室管膜细胞和神经胶质细胞细胞质的核周区域。在心室室管膜细胞中观察到特别强的表达。近年来，据报道室管膜细胞含有具有神经干细胞功能的细胞，并且认为通过Efs磷酸化的信号转导与神经系统细胞的增殖和分化密切相关。作为阐明中枢神经系统躯体感觉的传递和可塑性机制的一步，将从新生大鼠中分离的神经元分散并培养在多电极培养皿上，并同时检测 4 至 8 个单个神经元的自发放电。我们对多个神经尖峰的放电时序进行自相关和互相关分析，以研究单个神经元的放电特性以及神经元之间突触的形成和特性。对大鼠下丘脑神经元进行互相关分析的结果表明，482 对中的 138 对神经元存在兴奋性或抑制性突触连接。观察到兴奋性连接的细胞之间的尖峰延迟时间为0.3至20毫秒，抑制性连接中的放电抑制时间约为100至140毫秒。在兴奋性连接中，那些尖峰延迟时间为2毫秒或更短的连接被认为是单突触，并占总数的大多数。