肝臓特異的ハイドロダイナミック法による核酸医薬送達と肝癌遺伝子治療法への応用

利用肝脏特异性流体动力学方法进行核酸药物递送及其在肝癌基因治疗中的应用

• 批准号: 17K09408
• 负责人: 上村 顕也
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17K09408/
• 关键词: 遺伝子治療; ハイドロダイナミック遺伝子導入法; 肝癌; 核酸医薬; ジフテリアトキシン; 肝癌遺伝子治療; 肝癌遺伝子治療法; 肝臓特異的遺伝子導入

本研究は、ハイドロダイナミック遺伝子導入法(HGD)を肝癌治療に応用するための方法論、抗腫瘍効果を学術的に検証するためのステップと位置づけ、HGDパラメーターの確立、治療遺伝子の選択、効果と安全性の検証、肝癌モデル動物に対する治療効果の検証を行うことを目的とした。今年度は前二年度に肝癌の増殖制御に有用であることを明らかにした、ジフテリアトキシンA遺伝子を用いた肝癌に対する遺伝子治療確立のためのマウス肝癌モデルに対する遺伝子治療効果を検証した。これまでに、in vitroでは、ジフテリアトキシンA発現遺伝子が肝細胞癌に対して抗腫瘍効果を有することを明らかにし、同遺伝子を肝癌で発現するAFPのプロモーター制御下に発現するコンストラクトを作成した。今年度は、発がん遺伝子をハイドロダイナミック遺伝子導入法でマウス肝に遺伝子導入して作製したマウス肝癌モデルに対する、ジフテリアトキシン遺伝子Aの遺伝子治療効果を検討した。また、プロモーター選択性による遺伝子治療の安全性も検証した。具体的には、肝癌マウスモデルに対して、腫瘍発生の各段階において、ジフテリアトキシンA遺伝子発現コンストラクトによる遺伝子治療を行い、腫瘍数、腫瘍径、腫瘍マーカー、などにより治療効果を、血液生化学的評価による安全性の検討を行った。その結果、肝癌モデルマウスにおいても肝発癌率の抑制、腫瘍マーカーの低下を認め、ジフテリアトキシンA遺伝子による肝癌遺伝子治療の効果を実証することができた。またプロモーター選択性により、肝障害の観点からも安全な遺伝子治療が可能であった。本研究の成果により、プロモータ選択性によりジフテリアトキシンA遺伝子を用いた種々の悪性疾患治療が可能であることが示唆された。

本研究定位于从学术上验证水动力基因转移（HGD）应用于肝癌治疗的方法、抗肿瘤作用、HGD参数的建立、治疗基因的选择、疗效和安全性。治疗效果及对肝癌模型动物的治疗效果。今年，我们在小鼠肝癌模型上验证了基因治疗的效果，建立了利用白喉毒素A基因治疗肝癌的基因疗法，前两年被证明可以有效控制肝癌的生长。到目前为止，我们已经揭示白喉毒素A表达基因在体外对肝细胞癌具有抗肿瘤作用，并且我们已经创建了在AFP启动子控制下表达该基因的构建体，AFP在肝细胞癌中表达。今年，我们通过水动力基因转移将致癌基因引入小鼠肝脏，研究了白喉毒素基因 A 对小鼠肝癌模型的基因治疗效果。我们还验证了基于启动子选择性的基因治疗的安全性。具体而言，我们在肝癌小鼠模型的肿瘤发展的各个阶段使用白喉毒素A基因表达构建体进行基因治疗，并根据肿瘤数量、肿瘤直径、肿瘤标志物等评估治疗效果。通过评估检查安全性。结果，我们在肝癌模型小鼠中观察到肝癌发生率的抑制和肿瘤标志物的减少，证明了使用白喉毒素A基因进行肝癌基因治疗的有效性。此外，从肝损伤的角度来看，启动子选择性使得安全的基因治疗成为可能。这项研究的结果表明，由于启动子的选择性，利用白喉毒素A基因治疗各种恶性疾病是可能的。

项目成果

Rational arrangement of measuring shear wave speed in the liver

• DOI: 10.3748/wjg.v25.i20.2503
• 发表时间: 2019-05
• 期刊: World Journal of Gastroenterology
• 影响因子: 4.3
• 作者: Takeshi Yokoo;Tsutomu Kanefuji;T. Suda;Itsuo Nagayama;Takahiro Hoshi;Satoshi Abe;S. Morita;Hiroteru Kamimura;Kenya Kamimura;A. Tsuchiya;M. Takamura;K. Yagi;S. Terai

自律神経線維による肝，脳，腸の臓器間ネットワークを介した肝切除後の肝再生メカニズムの検討

通过自主神经纤维通过肝、脑、肠的器官间网络检查肝切除后的肝再生机制

• 发表时间: 2018
• 作者: Kamimura K;et al.;上村顕也;上村顕也
• 通讯作者: 上村顕也

Inhibition of sodium glucose cotransporter 2 (SGLT2) delays liver fibrosis in a medaka model of nonalcoholic steatohepatitis (NASH)

• DOI: 10.1002/2211-5463.12598
• 发表时间: 2019-04-01
• 期刊: FEBS OPEN BIO
• 影响因子: 2.6
• 作者: Goto, Ryo;Kamimura, Kenya;Terai, Shuji
• 通讯作者: Terai, Shuji

肝疾患における自律神経による臓器間ネットワークの関与

自主神经参与肝脏疾病的器官间网络

• 发表时间: 2018
• 作者: Kamimura K;et al.;上村顕也;上村顕也;上村顕也
• 通讯作者: 上村顕也

Liver-targeted Hydrodynamic Gene Delivery in Hemophiliac Dogs

血友病犬肝脏靶向水动力基因传递

• 发表时间: 2018
• 作者: 上村顕也;他。;上村顕也
• 通讯作者: 上村顕也