タンパク質との機能融合を目指したゲノム標的機能性人工核酸の開発

开发用于与蛋白质功能融合的基因组靶向功能性人工核酸

• 批准号: 19890147
• 负责人: 谷口 陽祐
• 金额: $ 1.97万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19890147/
• 关键词: 機能性人工核酸; ビシクロ型人工核酸; アンチジーン; 3本鎖DNA; 分子認識; 機能融合

ヒトゲノムの全遺伝子配列の解読終了が公表され、本格的にポストゲノムシーケンス時代に突入し、ゲノム配列情報を利用した病気の診断や治療など、様々な研究への展開が盛んに行われている。本研究では、機能性人工分子を用いることによって生体内に内在するたんぱく質本来の機能を活性化し、人工分子と生体内分子の機能を融合活用する革新的な遺伝子発現制御法の開発を目指している。その方法の一つとして、3本鎖DNA形成に着目した。3本鎖DNA形成を利用した遺伝子発現阻害、変異や修復などの生体内反応を惹起する3本鎖DNA形成分子の探索を行うために、本研究室で開発した人工核酸(WNA:W-shaped Nucleoside Analogues)を基本骨格にその誘導体の合成・評価を行った。WNAは認識塩基部位であるヘテロ環と安定化部位である芳香環をビシクロ骨格に別々に結合させた人工核酸である。これまで合成し評価した種々のWNA誘導体の結果をもとに、新たに設計を行った。その結果、WNAの変換部位の一つであるベンゼン環部分にアミノ基を有する誘導体を含んだ3本鎖形成オリゴヌクレオチドにより、非選択的な3本鎖DNA形成に成功した。さらに結果に基づく誘導体の設計・合成を行っており、認識構造の最適化を行っている。さらに、これまでに見いだしていたc-myc遺伝子に対するRaji細胞を用いた細胞増殖阻害研究に加えて、本研究ではbcl-2遺伝子に対する3本鎖形成オリゴヌクレオチドの設計・合成を行った。3本鎖形成能の評価の結果、このオリゴヌクレオチドは3本鎖DNAを形成することが明らかとなった。さらに、肺ガン細胞を用いて細胞増殖阻害能を確認したところ、まだ予備的な結果ではあるが、効果的に細胞増殖阻害活性があることを明らかにした。

已经宣布了人类基因组中所有基因序列的解密序列的完成，并且基因组测序的时代进入了全尺度研究的时代，并进行了广泛的研究工作，包括使用基因组序列信息进行诊断和治疗疾病。这项研究旨在开发创新的基因表达控制方法，通过使用功能性人工分子以及人工分子和体内分子的功能融合来激活人体固有的原始功能。其中一种方法是专注于三链DNA的形成。为了搜索触发体内反应（例如基因表达抑制，突变和使用三链DNA形成）等三链DNA形成的分子，使用人工核酸（WNA）（WNAS）在基本的基本骨架上合成了人工核酸（WNA），并使用人工核酸（WNA）合成衍生物并评估衍生物。 WNA是一种人造核酸，其中杂环，识别基碱位点和芳香环（稳定位点）分别连接到了自行车骨架上。根据迄今为止合成和评估的各种WNA衍生物的结果，进行了新的设计。结果，非选择性三链DNA成功地由三链寡核苷酸成功形成，该寡核苷酸含有一个衍生物，该衍生物在苯环部分中具有氨基，这是WNA的转换位点之一。此外，根据结果设计和合成衍生物，并优化了识别结构。此外，除了先前发现的Raji细胞对C-MYC基因的细胞生长抑制作用的研究外，本研究还为Bcl-2基因设计和合成了三链寡核苷酸。评估形成三链的能力的结果是，该寡核苷酸形成三链DNA。此外，当使用肺癌细胞确认细胞增殖抑制能力时，据表明，尽管它仍然是初步结果，但它具有有效的细胞增殖抑制活性。

项目成果

Effective strand invasion by ODN incorporating a new bicyclic nucleoside analogue(WNA)

结合新双环核苷类似物 (WNA) 的 ODN 有效链侵入

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nucleic Acids Res.Symp.Ser 51
• 作者: Eriko Aoki;et. al.
• 通讯作者: et. al.

2本鎖DNAを標的とするための新規人工ヌクレオシドの合成と機能評価

靶向双链DNA的新型人工核苷的合成及功能评价

• 发表时间: 2007
• 作者: Iwasa H;Masui Y;Gondo Y;Kawaai C;Inagaki H;Suzuki T;谷口 陽祐;岩佐 一,吉田祐子,吉田英世;石橋 直人
• 通讯作者: 石橋 直人

RNAの部位特異的修飾能をもつ官能基転移核酸の開発

开发能够对RNA进行位点特异性修饰的功能基团转移核酸

• 发表时间: 2008
• 作者: Iwasa H;et al.;鬼塚 和光
• 通讯作者: 鬼塚 和光

Effective strand invasion by ODN incorporating a new bicyclic nucleoside analogue

结合新双环核苷类似物的 ODN 有效链侵入

• 发表时间: 2007
• 作者: 岩佐 一;ほか;青木 絵里子
• 通讯作者: 青木 絵里子

Syntheses and properties of low-polarity shape mimics of 8-oxopurines

8-氧代嘌呤低极性形状模拟物的合成及性质

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nucleic Acids Res.Symp.Ser 51
• 作者: Yosuke Taniguchi;et. al.
• 通讯作者: et. al.