The Role of Hedgehog Signaling in the Development of Cholangiocarcinoma

Hedgehog 信号转导在胆管癌发生中的作用

• 批准号: 19591583
• 负责人: ABE Tetsuya
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute (2008)Nagoya University (2007)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19591583/
• 关键词: hedgehog Cyclopamine; hedgehogシグナル; シクロパミン; hedgehog; cyclopamine

今回我々は、当教室で症例が豊富な胆道癌でhedgehogシグナル系の発現解析を行い、組織型、分化度、粘液形質による発現の違い、また予後との関連を検討し、hedgehogシグナル系が予後因子とりうるか、またhedgehog経路阻害剤の治療の対象となりうるかを明らかにすることを目的とした。まずは、胆管癌のcell lineを用いてRT-PCRを行った結果、hedgehog遺伝子の中のIHH(Indian Hedgehog),SHH(Sonic Hedgehog)及び下流遺伝子の発現を確認した。更に、cell lineを用いて細胞免疫染色を行い、IHH,SHH,DHH(DesertHedgehog)ともに、蛋白レベルにおいても発現があることを確認した。次にhedgehogシグナル経路阻害剤である、シクロパミン(Cyclopamine)を用い、増殖が抑制されることを確認した。また、Cyclopamine使用後、下流遺伝子の増減を確認するため、realtimeRT-PCRを用いた結果、主にGlil,Foxm1(下流遺伝子)において減少が確認された。これらのことから、胆管癌cell lineにおいてSHH,IHH,DHHが発現しているであろうということが、確認され、Cyclopamineは、胆管癌及び下流遺伝子の経路で発現されるであろうと思われる遺伝子を抑制することがわかった。

在本研究中，我们分析了hedgehog信号系统在胆道癌中的表达，我们科室有大量病例，本研究的目的是澄清这是否可能是一个促成因素。用刺猬蛋白通路抑制剂治疗。首先，使用胆管癌细胞系进行RT-PCR，结果确认了hedgehog基因中的IHH(Indian Hedgehog)、SHH(Sonic Hedgehog)及下游基因的表达。此外，使用细胞系进行细胞免疫染色，确认了IHH、SHH和DHH(DesertHedgehog)也在蛋白质水平上表达。接下来，我们使用刺猬信号通路抑制剂环巴明，并证实增殖受到抑制。另外，使用Cyclopamine后，通过实时RT-PCR确认了下游基因的增加或减少，结果主要确认了Glil和Foxm1（下游基因）的减少。从这些结果证实，SHH、IHH和DHH在胆管癌细胞系中表达，环杷明是被认为在胆管癌中表达的基因，并且发现其抑制下游基因途径。