Analysis of the leukocyte cytoskeletal dynamics that are essential or the host defense mechanisms against infections

分析重要的白细胞细胞骨架动力学或宿主针对感染的防御机制

基本信息

批准号：
19590450
负责人：
SHINOMIYA Hiroto
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者が同定したp65/L-plastin は, 白血球に特異的に発現され,アクチン細胞骨格の再構築(p65-actin-scaffold) に関与している。p65-actin-scaffold は菌体刺激によって随時形成され, これを中心に形成される高次タンパク質集合体が, 感染防御的細胞応答の基盤として機能すると想定している。p65/L-plastin とともに細胞骨格のダイナミクスに関与するタンパク質,およびp65-actin-scaffold と高次タンパク質集合するタンパク質としてNADPH オキシダーゼ p47^<phox> などについて, 特異抗体を用いてp65-actin-scaffold との共存関係を調べた。また, マクロファージ内でのそれらの局在変化と貪食・細胞接着や殺菌活性の増強との関連を評価した。ルミノール結合ビーズを用いて, 貪食依存性の活性酸素酸性定量法を確立し, 細胞骨格の再構成が活性酸素産生において重要であることを明らかにした。p65/L-plastin, WASP, VAV に関して, それぞれの欠損は貪食・細胞接着依存性の活性酸素産生の障害をきたすことを考え合わせ, p65-actin-scaffold を中心とする細胞骨格系のダイナミクスが, 白血球の感染防御活性の発現において重要な役割を担うと考えられた。

申请人鉴定出的p65/L-塑蛋白在白细胞中特异性表达，并参与肌动蛋白细胞骨架（p65-肌动蛋白支架）的重塑。据推测，p65-肌动蛋白支架是在细菌细胞刺激的任何时候形成的，并且在该支架周围形成的高阶蛋白质聚集体充当对感染的保护性细胞反应的基础。我们使用特异性抗体研究了与 p65/L-plastin 和 NADPH 氧化酶 p47^<phox> 一起参与细胞骨架动力学的蛋白质，NADPH 氧化酶 p47^<phox> 是一种与 p65-肌动蛋白支架组装高级蛋白质的蛋白质。。我们还评估了它们在巨噬细胞内定位的变化与吞噬作用、细胞粘附和杀菌活性增强之间的关系。使用鲁米诺缀合珠，我们建立了一种定量吞噬作用依赖性活性氧酸度的方法，并揭示了细胞骨架重组对于活性氧产生很重要。考虑到 p65/L-plastin、WASP 和 VAV 的缺陷会损害吞噬作用和细胞粘附依赖性活性氧的产生，我们假设以 p65-actin-scaffold 为中心的细胞骨架系统的动力学可能发挥着重要作用。在白细胞感染防御活性表达中的作用。