Elucidation of active immunomodulatory function of milk IgG and development of its utility

牛奶 IgG 主动免疫调节功能的阐明及其应用的开发

基本信息

批准号：
19580307
负责人：
OTANI Hajime
金额：
$ 3万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

牛乳から分離したIgGのパパイン消化物から精製したFc,および大腸菌とそれと結合できる牛乳IgGの混合物をマウスに35日間経口投与すると、前者の場合は抗体産生を抑制しないが,後者の場合は抗体産生に関係する多くの因子に対して抗体産生を抑制方向に導くこと,並びにパイエル板細胞の遺伝子のDNAマイクロアレイによる網羅的解析により,牛乳IgGと大腸菌の混合物の投与は抗原提示細胞やB細胞の分化の抑制,ヘルパーT細胞のTh1やTh3への分化の促進,Fcεレセプターの発現抑制などを生じることを示唆した。これらの結果は,牛乳IgGとそれが認識する抗原の同時摂取はI型アレルギーを軽減する可能性を示している。一方,パン酵母に対するヤギ乳IgG分画を2頭のシバヤギを用いて3.6g調製した。そのパン酵母に対するヤギ乳IgG分画と免疫に用いたパン酵母の混合物をI型アレルギー自然発症モデルマウスであるNC/Ngaマウスの飼料に添加して与え,ダニ抗原でアレルギーを誘導し,アレルギー症状やアレルギー関連パラメーターの分析を行った。その結果,パン酵母とそのIgGの混合物を含まない飼料(コントロール飼料)群と比べて添加飼料群のダニ抗原で誘導される耳介部分の腫れは弱く,脱毛や出血等のアレルギー症状も弱いことが確認された。また,それら投与群はコントロール群と比べて脾臓のTh1型細胞数や腸管の免疫グロブリンレベルが低いことが確認された。以上の結果は,パン酵母とそのヤギ乳IgGの混合物の経口摂取は遺伝的なI型アレルギー症状を軽減することを示している。また,コントロール飼料群とパン酵母とそのヤギ乳IgG混合物添加飼料群のパイエル板や脾臓の免疫細胞の特性付けを行ったところ,前者の飼料群と比べて,後者の飼料群のTh2細胞数が有意に減少していることが確認され,パン酵母とそのヤギ乳IgGの先天的(遺伝的)I型アレルギー軽減作用はTh1/Th2細胞バランスの改善によることが示唆された。他方,パン酵母に対するヤギ乳IgGと免疫に用いたパン酵母を添加した飼料で,卵白アルブミンでI型アレルギーを誘導したBALB/c系マウスを飼育すると,無添加飼料での飼育の場合よりもくしゃみの回数は明らかに減少し,脾臓のTh2細胞数、抗原提示細胞数、IgE産生細胞数および肥満細胞数はコントロール群に比べて有意に少なく,逆にIL-10^+CD4^+(Tr1)細胞数は有意に多いことが示された。これらの結果は,パン酵母とそのヤギ乳IgG混合物は後天的に誘導したI型アレルギーマウスにおいてをTh1/Th2バランスの改善だけではなく,IgE産生能の低下,制御性T細胞の誘導、肥満細胞数の減少などを介して軽減することを示唆している。

当从牛奶中分离出的 IgG 的木瓜蛋白酶消化纯化的 Fc 和可以结合大肠杆菌的牛奶 IgG 的混合物给小鼠口服 35 天时，前者不会抑制抗体的产生，但后者会导致抗体的抑制。生产受到多种因素的影响此外，使用 DNA 微阵列对派尔氏贴片细胞基因进行综合分析表明，给予牛奶 IgG 和大肠杆菌的混合物可抑制抗原呈递细胞和 B 细胞的分化，促进辅助 T 细胞分化为 Th1 和 Th3，提示Fcε受体的表达受到抑制。这些结果表明，同时摄入牛奶 IgG 及其识别的抗原可以缓解 I 型过敏。同时，使用两只柴山羊制备了3.6g抗面包酵母的羊奶IgG级分。将针对面包酵母的羊奶IgG级分和用于免疫的面包酵母的混合物添加到NC/Nga小鼠(其是自发I型过敏模型小鼠)的饲料中，以诱导螨抗原过敏并诱发过敏症状。并分析过敏相关参数。结果，与不含面包酵母及其IgG混合物的饲料（对照饲料）相比，添加饲料组中螨抗原引起的耳廓区域肿胀较弱，脱毛、出血等过敏症状减轻。也被证实较弱。还证实，这些治疗组的脾脏中的 Th1 细胞数量和肠道中的免疫球蛋白水平低于对照组。上述结果表明，口服面包酵母及其羊奶IgG的混合物可减轻遗传I型过敏症状。此外，当我们对对照饲料组和添加面包酵母和羊奶IgG混合物的饲料组的派尔氏集结和脾脏中的免疫细胞进行表征时，我们发现后者饲料组中的Th2细胞数量高于对照组。证实了前饲料组的显着下降，表明面包酵母及其羊奶 IgG 对先天性（遗传性）I 型过敏的缓解作用是由于 Th1/Th2 细胞平衡的改善。另一方面，当卵清蛋白诱导的I型过敏的BALB/c小鼠在添加了针对面包酵母的羊奶IgG和用于免疫的面包酵母的饮食中饲养时，它们比在无添加剂饮食中饲养时打喷嚏更多次数是。脾脏中Th2细胞、抗原呈递细胞、IgE产生细胞和肥大细胞的数量显着低于对照组，而IL-10^+CD4^+（Tr1）细胞的数量则显着低于对照组。结果显示，明显低于对照组。这些结果表明，面包酵母及其羊奶 IgG 混合物不仅可以改善获得性 I 型过敏小鼠的 Th1/Th2 平衡，而且可以减少 IgE 的产生，诱导调节性 T 细胞，并诱导肥大细胞。可以通过减少儿童数量来缓解。