中枢神経系におけるATP感受性K^+チャネルの分子機能解析

中枢神经系统ATP敏感K^+通道的分子功能分析

基本信息

批准号：
07770066
负责人：
内匠透
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770066/
关键词：
カリウムチャネルアフリカツメガエル卵母細胞グリア細胞

项目摘要

中枢神経系における内向き整流性カリウムチャネルの分子機構を明らかにするために、マウス脳よりまったくあたらしい2回膜貫通型内向き整流性カリウムチャネルcDNA(KAB-2,the second type of inward rectifying K^+ channel with an ATP-binding domain)をクローニングした。アフリカツメガエル卵母細胞発現系でKAB-2チャネルは、古典的な内向き整流特性を示すカリウム電流を示した。in situ hybridization法による解析の結果、KAB-2mRNAは脳幹部神経核とともに、脳梁や小脳白質などのグリア細胞に強く発現していた。免疫組織化学の結果、アストロサイト初代培養にKAB-2チャネルが発現した。また、KAB-2チャネルは胎児期脳には発現が少なく生後1週でその発現が著しく増加し、生後2週で成体レベルに達する。この発現パターンは生後脳内の神経ネットワークの形成とともにグリア細胞の増殖していくことと一致する。以上のことから、KAB-2チャネルはグリア細胞におけるK^+-buffering systemに関与していると強く示唆される。現在、生体内、特にグリア細胞K^+-buffering systemにおけるKAB-2チャネルの生理的役割を明らかにするために、ES細胞を用いた発生工学的手法によりKAB-2チャネルのノックアウトマウスの作成を試みている。

为了阐明中枢神经系统内向整流钾通道的分子机制，我们从小鼠脑中开发了一种全新的双跨膜内向整流钾通道cDNA（KAB-2，第二类内向整流K^）。具有 ATP 结合域的通道）被克隆。在爪蟾卵母细胞表达系统中，KAB-2 通道表现出钾电流，表现出经典的内向整流特性。原位杂交分析表明，KAB-2 mRNA 在胶质细胞中强烈表达，例如胼胝体和小脑白质以及脑干神经核。免疫组织化学显示 KAB-2 通道在原代星形胶质细胞培养物中表达。此外，KAB-2通道在胎儿大脑中表达较差，但其表达在生命第一周显着增加，在生命第二周达到成人水平。这种表达模式与神经胶质细胞的增殖以及出生后大脑中神经网络的形成一致。这些发现强烈表明 KAB-2 通道参与神经胶质细胞中的 K^+ 缓冲系统。目前，为了阐明KAB-2通道在体内的生理作用，特别是在神经胶质细胞K^+缓冲系统中的作用，我们目前正在使用ES细胞利用发育工程技术创建KAB-2通道敲除小鼠。尝试。