トウモロコシ幼葉鞘におけるインドール酢酸合成細胞の特定と細胞内局在に関する研究

玉米胚芽鞘吲哚乙酸合成细胞的鉴定及亚细胞定位研究

基本信息

批准号：
07J07171
负责人：
西村岳志
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Tokyo Metropolitan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

1)抗IAA抗体によるIAAの免疫組織科学法の確立昨年度までの研究報告にもあったように、トウモロコシ幼葉鞘では重力刺激後にIAA偏差分布が形成され、またIAA合成部位である先端部ではNPAやBFAなどのIAA輸送阻害剤の処理によりIAAの蓄積が観察されることがわかっている。IAA合成部位である幼葉鞘先端において免疫組織科学的手法によりIAA合成細胞を特定するためには、まず使用する抗体のIAAに対する特異性を調べ、先に述べたような実際のIAA量の変化を検出できるようにするための技術開発が必要である。まず、IAA抗体シグナルは微弱であるため、アルカリフォスファターゼ結合型の二次抗体を用いたシグナル増幅法を用いることで、小さなシグナルを確実に検出することを考えた。そしてIAA抗体(mouse ; monoclonal antibody)の組織化学的検出における特異性を、二次抗体のシグナルの強さとGC-MSによるIAA定量値を比較することで検討を加えた。その結果、本IAA抗体は結合型IAAを認識せず、IAAを特異的に認識し得ることがわかった。2)幼葉鞘におけるIAAの分布とNPAによるIAAの蓄積部位幼葉鞘におけるIAAの分布を詳細に観察したところ、IAAは主に内表皮を中心に分布しており、また外表皮にも存在していることが示された。幼葉鞘先端2mm以内で最もIAA合成活性が強い部位を特定するため、NPAによりIAAが特に蓄積する部位を特定することを試みた。GC-MSの結果と同じく0.5-1.5mmの部位で強いシグナルが得られた。これらより、この領域にIAAを最も活発に合成する細胞(群)が存在することが示唆された。

1) 使用抗 IAA 抗体建立 IAA 免疫组织学方法根据去年的研究报告，在重力刺激后，IAA 在玉米胚芽鞘中形成偏差分布，并在尖端产生 NPA，该部位是众所周知，用IAA转运抑制剂如BFA和BFA处理后会观察到IAA的积累。为了使用免疫组织学技术在作为 IAA 合成部位的肾鞘尖端识别 IAA 合成细胞，首先检查用于 IAA 的抗体的特异性，并按照所述检查 IAA 实际量的变化需要技术发展来实现检测。首先，由于 IAA 抗体信号较弱，我们考虑使用使用碱性磷酸酶偶联二抗的信号放大方法来可靠地检测小信号。然后，我们通过比较二抗的信号强度和 GC-MS 的 IAA 定量值，研究了 IAA 抗体（小鼠；单克隆抗体）在组织化学检测中的特异性。结果发现，本发明的IAA抗体不识别结合的IAA，但可以特异性识别IAA。 2)IAA在胚芽鞘中的分布以及NPA引起的IAA积累部位对IAA在胚芽鞘中的分布的详细观察表明，IAA主要分布在内表皮中，并且也存在于外表皮中。有。为了确定胚芽鞘尖端2毫米内IAA合成活性最强的位点，我们尝试使用NPA来确定IAA特别积累的位点。与 GC-MS 结果类似，在 0.5-1.5 mm 区域获得强信号。这些结果表明，合成IAA最活跃的细胞（群）存在于该区域。

项目成果

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トウモロコシ幼葉鞘先端における indole-3-acetic acid 合成に影響を与える化合物のケミカルスクリーニング

影响玉米胚芽鞘尖端吲哚-3-乙酸合成的化合物的化学筛选

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
柿沼千江子;須藤亜衣;中島桃代;西村岳志;駒野照弥;久保稔;長谷部光泰;笠原博幸;神谷勇治;小柴共一
通讯作者：
小柴共一

トウモロコシ幼葉鞘の重力屈曲にはZmPIN1により先端から輸送されるIAAの偏差分布に伴ったTIR1/AFBsを介した遺伝子発現の制御が必要である

玉米胚芽鞘的重力弯曲需要通过 TIR1/AFB 来调节基因表达，这与 ZmPIN1 从尖端运输的 IAA 分布偏差有关。

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
西村岳志;中野仁美;林謙一郎;丹羽理陽;小柴共一
通讯作者：
小柴共一

トウモロヨシ幼葉鞘の重力屈曲反応を用いindole-3acetic acid(IAA)生合成に影響を与える物質のケミカルスクリーニング

利用玉米芦苇胚芽鞘的重力弯曲反应化学筛选影响吲哚-3乙酸（IAA）生物合成的物质

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
森島大智;俣野由行;須藤亜衣;中島桃代;西村岳志;駒野照弥;久保稔;長谷部光泰;笠原博幸;神谷勇治;小柴共一
通讯作者：
小柴共一

Biochemical analysis of indole-3-acetaldoxime-dependent auxin biosynthesis in Arabidopsis

拟南芥吲哚-3-乙醛肟依赖性生长素生物合成的生化分析

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 106(13)
影响因子：
0
作者：
Sugawara;S.;Hishiyama;S.;Jikumaru;Y.;Hanada;A.;Nishimura;T.;Koshiba;T.;Zhao;Y.;Kamiya;Y.;Kasahara;H.
通讯作者：
H.

A rice tryptophan deficient dwarf mutant, tdd1, contains a reduced level of indole acetic acid and develops abnormal flowers and organless embryos