Gタンパク質共役型受容体によるリゾファスファチジン酸分子種識別機構の解明

G蛋白偶联受体对根磷脂酸分子种类辨别机制的阐明

• 批准号: 07J05298
• 负责人: 柳田 圭介
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J05298/
• 关键词: リゾホスファチジン酸; Gタンパク質共役型受容体; オーファン受容体; p2y5; LPA6; Edg型LPA受容体; 非Edg型LPA受容体; リゾホスファチジン酸(LPA); LPA受容体; LPA分子種; リガンド選択性; 血小板LPA受容体; アルキルLPA; 血小板凝集; 血小板型LPA受容体

本研究は、既知のLPA受容体では説明できないLPAの多種多様な作用、さらには細胞によってLPA分子種認識に違いが生じるメカニズムを明らかにすることを目的とし、これまでの研究で新規LRA受容体p2y5/LPA6の同定に成功した。当該年度の研究実施計画は、1)欠損マウスを用いた非Edg型LPA受容体の生理機能解析、また2)貧毛症につながるp2y5/LPA6のアミノ酸変異体の解析であった。1.当教室で樹立されたLPA4欠損マウスを用いて、高脂肪食負荷実験を行なった。欠損マウスは野生型マウスと比べ、脂肪肝の抑制、アディポネクチン高値、脂肪細胞の小型化、脂肪組織慢性炎症の軽減、インスリン抵抗性の改善が認められた。LPA4は前駆脂肪細胞に強く発現しており、マウス胎児繊維芽細胞を用いた脂肪細胞分化実験において、欠損マウスの細胞で脂肪細胞分化の亢進が認められた。これらの結果は、欠損マウスは脂肪細胞分化の亢進により、上記表現型をもたらすことを示唆するもので、LPA4はメタボリックシンドロームの新しい治療標的として強く期待できると考える。2.ヒト貧毛症につながるいくつかのアミノ酸変異が報告されている。今回これらの変異体p2y5/LPA6の発現ベクターを作製し、その機能解析を行なった。1つの変異体では野生型受容体と同様にLPAによる細胞内応答が認められたが、その他の8つの変異体では細胞内応答は認められず、うち4つの変異体は細胞膜へ輸送されずにプロテアソーム系で分解されていることがわかった。そのうち1つの変異体において、p2y5/LPA6に対する合成アゴニストが薬理的シャペロンとしてはたらき、その細胞膜発現を回復することを見いだした。この結果は、p2y5/LPA6の合成アゴニストが特定のヒト貧毛症患者において、治療薬として使える可能性を強く示唆するものである。

本研究的目的是阐明已知 LPA 受体无法解释的 LPA 的多种作用，以及细胞识别 LPA 分子种类差异的机制。我们成功鉴定了 p2y5/LPA6。今年的研究实施计划是1）利用缺陷小鼠分析非Edg LPA受体的生理功能，2）分析导致少毛症的p2y5/LPA6氨基酸变异。 1.我们利用实验室建立的LPA4缺陷小鼠进行了高脂饮食负荷实验。与野生型小鼠相比，缺陷小鼠表现出脂肪肝受到抑制、脂联素水平升高、脂肪细胞更小、脂肪组织慢性炎症减少以及胰岛素抵抗得到改善。 LPA4 在前脂肪细胞中强烈表达，在使用小鼠胎儿成纤维细胞的脂肪细胞分化实验中，在来自缺陷小鼠的细胞中观察到脂肪细胞分化增强。这些结果表明，缺陷小鼠由于脂肪细胞分化增强而表现出上述表型，我们相信LPA4有望成为代谢综合征的新治疗靶点。 2. 已报道了几种导致人类少毛症的氨基酸突变。在本研究中，我们为这些突变体 p2y5/LPA6 创建了表达载体并分析了它们的功能。一种突变体表现出与野生型受体相似的对LPA的细胞内反应，但在其他八种突变体中没有观察到细胞内反应，并且其中四种突变体没有被转运到细胞膜上，发现它被LPA降解。蛋白酶体系统。在其中一个突变体中，发现 p2y5/LPA6 的合成激动剂充当药理学伴侣并恢复其质膜表达。这些结果强烈表明p2y5/LPA6的合成激动剂可用作某些人类少毛症患者的治疗剂。

项目成果

Comparison of the binding activities of LPA receptors/Morphological effect of LPA_4

LPA受体结合活性比较/LPA_4形态效应

• 发表时间: 2007
• 作者: Keisuke Yanagida;Kayo Masago;Hiroki Nakanishi;Yasuyuki Kihara;Fumie Hamano;Yoko Tajima;Ryo Taguchi;Takao Shimizu;Satoshi Ishii;柳田 圭介;柳田 圭介
• 通讯作者: 柳田 圭介

AN ORPHAN RECEPTOR p2y5 IS A NOVEL LYSOPHOSPHATIDIC ACID RECEPTOR, LPA_6

孤儿受体 p2y5 是一种新型溶血磷脂酸受体 LPA_6

• 发表时间: 2009
• 作者: Kihara;Y.;Yanagida;K.;Masago;K.;Kita;Y.;Hishikawa;D.;Shindou;H.;Ishii;S.;Shimizu;T.;Keisuke Yanagida;Keisuke Yanagida
• 通讯作者: Keisuke Yanagida

Characterization of the sixth Lysophosphatidic Acid Receptor, p2y5/LPA6

第六个溶血磷脂酸受体 p2y5/LPA6 的表征

• 发表时间: 2009
• 作者: Kihara;Y.;Yanagida;K.;Masago;K.;Kita;Y.;Hishikawa;D.;Shindou;H.;Ishii;S.;Shimizu;T.;Keisuke Yanagida
• 通讯作者: Keisuke Yanagida

リゾフォスファチジン酸受容体のリガンド選択性

溶血磷脂酸受体的配体选择性

• 发表时间: 2007
• 作者: Keisuke Yanagida;Kayo Masago;Hiroki Nakanishi;Yasuyuki Kihara;Fumie Hamano;Yoko Tajima;Ryo Taguchi;Takao Shimizu;Satoshi Ishii;柳田 圭介
• 通讯作者: 柳田 圭介

Non-Edg family lysophosphatidic acid receptors

非 Edg 家族溶血磷脂酸受体

• 发表时间: 2009
• 期刊: Prostaglandins and Other Lipid Mediators 89巻
• 作者: OECD編;監訳者:神谷浩夫 訳者:鍬塚賢太郎・與倉豊・由井義通・中澤高志・武田祐子・久木元美琴・若林芳樹;Keisuke Yanagida;Satoshi Ishii
• 通讯作者: Satoshi Ishii