Gタンパク質共役型受容体によるリゾファスファチジン酸分子種識別機構の解明

G蛋白偶联受体对根磷脂酸分子种类辨别机制的阐明

• 批准号: 07J05298
• 负责人: 柳田 圭介
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J05298/
• 关键词: リゾホスファチジン酸; Gタンパク質共役型受容体; オーファン受容体; p2y5; LPA6; Edg型LPA受容体; 非Edg型LPA受容体; リゾホスファチジン酸(LPA); LPA受容体; LPA分子種; リガンド選択性; 血小板LPA受容体; アルキルLPA; 血小板凝集; 血小板型LPA受容体

本研究は、既知のLPA受容体では説明できないLPAの多種多様な作用、さらには細胞によってLPA分子種認識に違いが生じるメカニズムを明らかにすることを目的とし、これまでの研究で新規LRA受容体p2y5/LPA6の同定に成功した。当該年度の研究実施計画は、1)欠損マウスを用いた非Edg型LPA受容体の生理機能解析、また2)貧毛症につながるp2y5/LPA6のアミノ酸変異体の解析であった。1.当教室で樹立されたLPA4欠損マウスを用いて、高脂肪食負荷実験を行なった。欠損マウスは野生型マウスと比べ、脂肪肝の抑制、アディポネクチン高値、脂肪細胞の小型化、脂肪組織慢性炎症の軽減、インスリン抵抗性の改善が認められた。LPA4は前駆脂肪細胞に強く発現しており、マウス胎児繊維芽細胞を用いた脂肪細胞分化実験において、欠損マウスの細胞で脂肪細胞分化の亢進が認められた。これらの結果は、欠損マウスは脂肪細胞分化の亢進により、上記表現型をもたらすことを示唆するもので、LPA4はメタボリックシンドロームの新しい治療標的として強く期待できると考える。2.ヒト貧毛症につながるいくつかのアミノ酸変異が報告されている。今回これらの変異体p2y5/LPA6の発現ベクターを作製し、その機能解析を行なった。1つの変異体では野生型受容体と同様にLPAによる細胞内応答が認められたが、その他の8つの変異体では細胞内応答は認められず、うち4つの変異体は細胞膜へ輸送されずにプロテアソーム系で分解されていることがわかった。そのうち1つの変異体において、p2y5/LPA6に対する合成アゴニストが薬理的シャペロンとしてはたらき、その細胞膜発現を回復することを見いだした。この結果は、p2y5/LPA6の合成アゴニストが特定のヒト貧毛症患者において、治療薬として使える可能性を強く示唆するものである。

这项研究旨在阐明LPA无法通过已知LPA受体来解释的各种作用，以及根据细胞识别LPA分子识别差异的机制，并在先前的研究中成功鉴定了新型LRA受体P2Y5/LPA6。今年的研究计划是1）分析使用缺乏小鼠的非EDG型LPA受体的生理功能，以及2）分析P2Y5/LPA6的氨基酸突变体，这会导致三分法病。 1。使用在我们教室中建立的LPA4缺陷型小鼠进行高脂饮食负荷实验。与野生型小鼠相比，缺乏小鼠显示脂肪肝，较高的脂联素水平，较小的脂肪细胞，慢性脂肪细胞炎症减少和胰岛素抵抗的改善。 LPA4在前脂肪细胞中强烈表达，在使用小鼠胚胎成纤维细胞的脂肪细胞分化实验中，来自缺陷小鼠的细胞显示脂肪细胞分化增加。这些结果表明，由于脂肪细胞分化的增加，缺乏小鼠导致上述表型，并且可以强烈期望LPA4是代谢综合征的新治疗靶标。 2。已经报道了几种导致人三进制的氨基酸突变。在本文中，制备了这些突变体P2Y5/LPA6的表达矢量，并进行了功能分析。在一个突变体中观察到LPA的细胞内反应，类似于野生型受体的反应，但是在其他八个突变体中，发现其中四个在蛋白酶体系统中降解而没有转运到细胞膜。在其中一个突变体中，发现P2Y5/LPA6的合成激动剂充当药理学伴侣，并恢复其细胞膜表达。该结果强烈表明，P2Y5/LPA6的合成激动剂可以用作某些人类三元病患者的治疗剂。

项目成果

Comparison of the binding activities of LPA receptors/Morphological effect of LPA_4

LPA受体结合活性比较/LPA_4形态效应

• 发表时间: 2007
• 作者: Keisuke Yanagida;Kayo Masago;Hiroki Nakanishi;Yasuyuki Kihara;Fumie Hamano;Yoko Tajima;Ryo Taguchi;Takao Shimizu;Satoshi Ishii;柳田 圭介;柳田 圭介
• 通讯作者: 柳田 圭介

AN ORPHAN RECEPTOR p2y5 IS A NOVEL LYSOPHOSPHATIDIC ACID RECEPTOR, LPA_6

孤儿受体 p2y5 是一种新型溶血磷脂酸受体 LPA_6

• 发表时间: 2009
• 作者: Kihara;Y.;Yanagida;K.;Masago;K.;Kita;Y.;Hishikawa;D.;Shindou;H.;Ishii;S.;Shimizu;T.;Keisuke Yanagida;Keisuke Yanagida
• 通讯作者: Keisuke Yanagida

Characterization of the sixth Lysophosphatidic Acid Receptor, p2y5/LPA6

第六个溶血磷脂酸受体 p2y5/LPA6 的表征

• 发表时间: 2009
• 作者: Kihara;Y.;Yanagida;K.;Masago;K.;Kita;Y.;Hishikawa;D.;Shindou;H.;Ishii;S.;Shimizu;T.;Keisuke Yanagida
• 通讯作者: Keisuke Yanagida

Non-Edg family lysophosphatidic acid receptors

非 Edg 家族溶血磷脂酸受体

• 发表时间: 2009
• 期刊: Prostaglandins and Other Lipid Mediators 89巻
• 作者: OECD編;監訳者:神谷浩夫 訳者:鍬塚賢太郎・與倉豊・由井義通・中澤高志・武田祐子・久木元美琴・若林芳樹;Keisuke Yanagida;Satoshi Ishii
• 通讯作者: Satoshi Ishii

リゾフォスファチジン酸受容体のリガンド選択性

溶血磷脂酸受体的配体选择性

• 发表时间: 2007
• 作者: Keisuke Yanagida;Kayo Masago;Hiroki Nakanishi;Yasuyuki Kihara;Fumie Hamano;Yoko Tajima;Ryo Taguchi;Takao Shimizu;Satoshi Ishii;柳田 圭介
• 通讯作者: 柳田 圭介