前期前微小管束の形成に依存して起こる細胞質の集積機能の解析

细胞质积累功能依赖于前期微管束形成的分析

基本信息

批准号：
07740635
负责人：
村田隆
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740635/
关键词：
細胞質分裂前期前微小管束ホウライシダゴルジ体微小管

项目摘要

前期前微小管束(PPB)は、高等植物において、分裂予定位置の細胞表層に形成される微小管の束であり、細胞板を正しい位置に導くことに関与していると考えられている。PPBの機能の一つの可能性として、分裂予定位置の細胞膜へ分泌小胞を導く可能性が古くから考えられているが、証明は全くなされていない。ホウライシダ原糸体細胞において、分裂直前に細胞を遠心し、核と細胞質を分裂予定位置から移動すると、すでに形成されていたPPBの形成場所に細胞質が集積することは報告した(村田、和田 1994)。PPBによって、ゴルジ体由来の分泌小胞がPPBの存在する細胞膜に融合した結果、細胞表層が細胞質を集積させる能力を獲得する可能性を考え、今年度はこの可能性の検討を行った。ホウライシダ原糸体を細胞板形成開始の約2時間前にゴルジ体の破壊剤であるブレフェルジンA(BFA: 50μg/ml)で処理すると、細胞板形成が阻害され、多核の細胞が誘導された。細胞板は分泌小胞の融合により形成されることから、50μg/mlのBFAは分泌小胞の形成を阻害すると考えられた。同様のBFA処理をPPB形成途中に行い、薬剤存在下で2.5 時間培養した後に細胞を遠心して細胞質の集積に対する影響を調べた。遠心直前に細胞を固定し、電子顕微鏡によりゴルジ体を観察したところ、ゴルジ体の数は減少し、残ったゴルジ体は極端に変形していた。一方、PPBに異常は見られなかった。遠心後の細胞質の集積はBFAによって阻害された。しかしながら、BFAを処理した細胞においては細胞周期の遅れと非同調化が見られ、BFAによる細胞質の集積阻害がゴルジ体の破壊を介して起こったのか証明するには至っていない。

前期微管束（PPB）是高等植物分裂部位细胞表面形成的微管束，被认为参与引导细胞板至正确位置。长期以来，人们一直认为 PPB 的一种可能功能是，它将分泌囊泡引导至细胞膜，并在细胞膜上进行分裂，但这一点从未得到证实。据报道，在 Hooraicida protonema 细胞中，当细胞在分裂前离心并将细胞核和细胞质从计划的分裂位点移出时，细胞质会积聚在已经形成 PPB 的位点（Murata 和 Wada 1994） .今年，我们考虑了PPB可能导致高尔基体来源的分泌小泡与PPB存在的细胞膜融合，导致细胞表面获得积累细胞质的能力。今年，我们研究了这种可能性。当在细胞板形成开始前约2小时用布雷菲德菌素A（BFA：50μg/ml）（一种高尔基体破坏剂）处理耳假单胞菌原丝体时，抑制细胞板形成并诱导多核细胞。由于细胞板是由分泌囊泡融合形成的，因此50μg/ml的BFA被认为可以抑制分泌囊泡的形成。在PPB形成过程中进行类似的BFA处理，在药物存在下培养2.5小时后，离心细胞以检查对细胞质积累的影响。当细胞在即将离心之前被固定并使用电子显微镜观察高尔基体时，高尔基体的数量减少并且剩余的高尔基体极度变形。另一方面，PPB没有观察到异常。 BFA 抑制离心后细胞质的积累。然而，在用BFA处理的细胞中观察到细胞周期延迟和去同步化，并且尚未证明BFA对细胞质积累的抑制是否通过破坏高尔基体发生。