卵減数分裂周期におけるErp1の発現と機能の制御

卵减数分裂周期中 Erp1 表达和功能的调节

基本信息

批准号：
07J02642
负责人：
大江宗理
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

脊椎動物の卵減数分裂周期は、S期を省略した2回の連続したM期(第一減数分裂,MI:第二減数分裂,MII)からなり、MI期からMII期への進行(MI/MII転移)後、卵はMII期中期(Meta-II)で分裂周期を停止し、受精を待つ。このMeta-II停止を引き起こす因子は細胞分裂抑制因子(CSF)と呼ばれる。以前の我々の研究から、ユビキチンリガーゼAPC/Cの抑制因子Emi2(別名Erp1)が、CSFの分子的実体とされるMos-MAPK経路依存的に活性化・安定化し、MI/MII転移及びMeta-II停止を引き起こすことが示された。Emi2によるAPC/C抑制には、Emi2内のD-boxやzinc binding region(ZBR)が関わっているとされる。しかしながら、Emi2のAPC/Cへの結合及び抑制の詳細な機構については不明である。そこで今回、我々はその機構について解析を行った。まず、C末端領域を欠損させたEmi2を発現させるとMI/MII転移やMeta-II停止が起こらないことから、Emi2のC末端領域がAPC/C抑制活性に必須であることがわかった。また、C末端領域のペプチドを用いた解析から、Emi2のC末端領域はAPC/Cとの結合に必要であるが、抑制そのものには関わっていないことも判明した。さらに、C末端領域がAPC/Cに結合することで、Emi2内のD-boxやZBRのAPC/Cへの結合能や抑制能を促進することが示された。以上の結果から、Emi2のC末端領域がAPC/Cへのドッキング部位として働き、APC/C抑制のために必須であることが明らかになった

脊椎动物卵减数分裂周期由两个连续的 M 期（第一次减数分裂，MI；第二次减数分裂，MII）组成，省略 S 期，以及从 MI 到 MII 的进展（MI/ MII 过渡后），卵在分裂周期中期停止-MII阶段（Meta-II）并等待受精。导致 Meta-II 停滞的因素称为细胞分裂抑制因子 (CSF)。从我们之前的研究中，我们发现泛素连接酶APC/C的抑制剂Emi2（也称为Erp1）以Mos-MAPK通路依赖的方式被激活和稳定，被认为是脑脊液中的一个分子实体，导致 MI/MII 易位，Meta-II 已被证明会导致逮捕。 Emi2 内的 D-box 和锌结合区 (ZBR) 被认为参与 Emi2 的 APC/C 抑制。然而，Emi2 结合并抑制 APC/C 的详细机制尚不清楚。因此，我们对这个机制进行了分析。首先，当我们表达删除了 C 端区域的 Emi2 时，没有发生 MI/MII 转换和 Meta-II 停滞，这表明 Emi2 的 C 端区域对于 APC/C 抑制活性至关重要。此外，使用C端区域的肽进行分析表明，Emi2的C端区域是与APC/C结合所必需的，但不参与抑制本身。此外，C 端区域与 APC/C 的结合可促进 Emi2 中 D-box 和 ZBR 结合并抑制 APC/C 的能力。这些结果表明，Emi2 的 C 末端区域充当 APC/C 的对接位点，并且对于 APC/C 抑制至关重要。