m-RNA細胞内導入用炭酸アパタイトナノキャリアの設計と免疫工学的応用

碳酸盐磷灰石纳米载体细胞内导入mRNA的设计及免疫技术应用

• 批准号: 07F07333
• 负责人: 赤池 敏宏
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07333/
• 关键词: 炭酸アパタイト; リポソーム; m-RNA; 遺伝子デリバリー; エンドサイトーシス; 細胞外マトリックス; ナノキャリアー; si-RNA; ニンドサイトーシス; サイバイビン; Si-RNA

炭酸アパタイトとリポソームを形成するカチオン脂質であるDOTAPとの複合体を作製し、そこにmRNAを結合させることで、効果的なmRNAの細胞内への導入を可能とした。炭酸アパタイト-DOTAP複合体を用いたmRNA導入では、複合体が細胞内のエンドソームに取り込まれた後に、速やかに分解する。これにより、mRNAが細胞質中に速やかに放出され、エンドソーム内の酸性条件下でのダメージが起こりにくく、比較的多くのmRNAを細胞質中に導入することが可能になった。通常のDOTAP単独法やリポフェクトアミン2000と比較して、炭酸アパタイト-DOTAP複合体を使用した場合、mRNAの導入効率は10倍以上向上することが確認された。このキャリアーシステムの特性はDNA(遺伝子等)を導入したい場合にも完全に応用可能であることを確認した。以上の利点を生かして我々が世界に先駆けて開発したE-カドヘリン-Fcキメラ抗体コート表面を利用し、この上に単一細胞で培養されたES細胞へのリポーターDNA、m-RNA,の導入に応用した。この結果、ES-細胞への極めて高効率での導入という画期的な成果を得ることができた。

通过创建碳酸盐磷灰石和 DOTAP（一种形成脂质体的阳离子脂质）的复合物，并将 mRNA 与其结合，他们能够有效地将 mRNA 引入细胞中。当使用碳酸盐磷灰石-DOTAP复合物引入mRNA时，该复合物在被吸收到细胞内内体后迅速降解。结果，mRNA快速释放到细胞质中，在内体内的酸性条件下不易受到损伤，并且可以将相对大量的mRNA引入细胞质中。经证实，当使用碳酸盐磷灰石-DOTAP复合物时，与通常的DOTAP单独方法或Lipofectamine 2000相比，mRNA导入效率提高了10倍以上。已证实该载体系统的特征完全适用于需要引入DNA（基因等）的情况。利用上述优点，我们在世界上第一个开发了E-cadherin-Fc嵌合抗体包被的表面，并将报告DNA和mRNA引入到在该表面上作为单细胞培养的ES细胞中。结果，我们实现了极其高效地导入 ES 细胞的突破性成果。

项目成果

Inorganic apataite-liposome complex forefficient m-RNA delivery and expression into manmmalian cell

无机磷灰石-脂质体复合物可有效地将 mRNA 递送并表达到哺乳动物细胞中

• 发表时间: 2007
• 作者: ZOHRA;Fatema Tuj
• 通讯作者: Fatema Tuj

Inorganic apataite-liposome cosome complex forefficient m-RNA delivery and expression into manmmalian cell

无机磷灰石-脂质体辅体复合物可有效地将 mRNA 递送并表达到哺乳动物细胞中

• 发表时间: 2007
• 作者: ZOHRA;Fatema Tuj
• 通讯作者: Fatema Tuj

Cationic liposome-carbonate apatite conjugates ; Nobel hybrid carrier for mRNA-based gene therapy

阳离子脂质体-碳酸盐磷灰石缀合物；

• 发表时间: 2009
• 作者: Fatema T. Zohra;Ezharul H. Chowdhury;Toshihiro Akaike;Fatema T.Zohra;Fatema T.Zohra
• 通讯作者: Fatema T.Zohra

Carrier efficacy and gene modification synergistically accelenate mRNA base transfection through cationic liposome-carbonate apatite conjugates

载体功效和基因修饰通过阳离子脂质体-碳酸盐磷灰石缀合物协同加速 mRNA 碱基转染

• 发表时间: 2009
• 作者: Fatema T. Zohra;Ezharul H. Chowdhury;Toshihiro Akaike;Fatema T.Zohra
• 通讯作者: Fatema T.Zohra