CRHとストレス誘導性関連ペプチドの妊娠初期絨毛外トロホブラスト浸潤能への関与

CRH和应激肽对妊娠早期绒毛外滋养层侵袭能力的影响

基本信息

批准号：
18791154
负责人：
中林幸士
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791154/
关键词：
CRH EVT VEGF SCP ストレス

项目摘要

本研究ではストレス関連ペプチドであるCRHならぴに2001年に発見されたStresscopin(SCP)が妊娠維持に与える影響を検討することを目的としている。CRHはその受容体であるCRHR1とCRHR2を刺激し、CRHは特にCRHR1を優位に刺激する。一方、SCPはCRHR2を選択的に刺激する。近年のCRHR1、CRHR2ノックアウトマウスの検討で、CRHR1は短時間の生体防御機能に関わり、CRHR2はCRHR1を介する過剰な反応を抑える機能を有することが解明されてきている。SCP、CRHR1、CRHR2の発現は、CRHと同様に脳などの中枢組織以外に末梢組織の心臓・胃・大腸・膵臓・卵巣・胎盤においてmRNAレベルでの発現が認められており、autocrine/paracrine調節因子としての役割が注目されている。そこで本研究では胎盤におけるCRH、SCPの機能解明を目的とし、CRHSCPが妊娠初期絨毛外トロホブラスト(EVT)のVEGF発現に及ぼす影響を解明することにより検討した。妊娠初期EVTにCRH,SCP,CRHR-1,-2が発現することをRT-PCR法とimmunoblot法で確認した。培養EVTでのCRH 10,30,100nM添加群では、濃度依存性にVEGF mRNA発現レベルを非添加群のコントロールに比して、72,62,48%に低下することを認添加群のコントロールに比して、65,61,31%に低下することを認めた。CRH 100nM添加し抑制されたVEGF mRNA発きくたレベルはantalarmine同時では回復を認めなかったが、antisauvagine-30同時添加では回復することを認めた。SCP 100nM添加し抑制されたVEGF mRNA発現レベルは、antisauvagine-30同時添加では回復することを認めた。以上の結果よりCRH、Stresscopinは、妊娠初期EVTに発現する蛋白であることが明らかとかり、また同時にそれら受容体(CRHR1,CRHR2)が妊娠初期EVTに発現することが明らかとなった。妊娠初期EVTでのVEGF mRNA発現に対してCRH、Stresscopinは抑制的に働くことを認めた。CRH、Stresscopinはオートクライン、パラクライン調節因子として、その受容体CRHR-2を介して、妊娠初期EVTでのVEGF発現を抑制することで胎盤形成に関わる血管新生を阻害し妊娠維持に対して抑制的働くことが示唆された。

这项研究旨在检查2001年与应激相关的肽CRH胁迫蛋白（SCP）对妊娠维持的影响。 CRH刺激其受体CRHR1和CRHR2，CRH特别占CRHR1。另一方面，SCP选择性刺激CRHR2。对CRHR1和CRHR2敲除小鼠的最新研究表明，CRHR1参与了短期生物保护功能，CRHR2具有通过CRHR1抑制过度反应的功能。与CRHH相似，已经观察到SCP，CRHR1和CRHR2的表达在心脏，胃，大肠，大肠，胰腺，卵巢，卵巢和胎盘以及大脑等中央组织（如大脑）中表达，以及其外围组织以及其作为自动分泌/副帕诺基调节剂的作用。因此，这项研究旨在阐明CRH和SCP在胎盘中的功能，并研究了CRHSCP对怀孕早期植物外滋养细胞（EVT）VEGF表达的影响。 RT-PCR和免疫印迹方法证实了CRH，SCP，CRHR-1和2在妊娠EVT中的表达。在培养的EVT中添加10,30,100 nm的CRH的组中，与非添加组的对照组相比，VEGF mRNA表达水平的浓度依赖性降低率为72,62,48％，与每组对照组相比，对照组的浓度依赖性降低为72,62,48％。在CRH中添加100 nm的抑制VEGF mRNA水平没有同时恢复Antalarmine，但发现它们可以同时添加的抗舒瓦金-30恢复。已经发现，通过同时添加抗舒瓦古30，通过添加100 nm的SCP抑制了VEGF mRNA表达水平。上述结果表明，CRH和胁迫素是在怀孕早期表达的蛋白质，与此同时，这些受体（CRHR1，CRHR2）在怀孕早期EVT中表达。发现CRH和应激蛋白在怀孕早期EVT中对VEGF mRNA表达作用。有人提出，CRH和胁迫蛋白是自分泌和旁分泌调节剂，通过其受体CRHR-2抑制VEGF的表达，抑制胎盘形成涉及的血管生成并对维持妊娠的抑制作用。