フォンヒッペルリンドウ遺伝子が関与する腎細胞癌骨転移特異的遺伝子発現の解析

涉及 von Hippel Lindow 基因的肾细胞癌骨转移特异性基因表达分析

基本信息

批准号：
18791122
负责人：
辛島尚
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

散発性腎淡明細胞癌におけるフォンヒッペルリンドウ(VHL)遺伝子変異の転移への影響は解明されていない。VHL 遺伝子変異様式の転移形成能への影響を動物モデルを用いて検討した。VHL 蛋白の 104 番目のアミノ酸残基以降の機能欠失をもつ腎淡明細胞癌株786-0 をもとに、遺伝病であるVHL 病のタイプをもとに3種の変異 VHL 遺伝子発現ベクターと野生型 VHL ベクターを遺伝子導入した。786-0 細胞と VHL 病タイプ 2B に相当する167番目の Arginine がTryptophan に置換された 786-0-m167 細胞は、cDNA microarray で遣伝子発現パターンが大きく違った。786-0、786-0-m167、野生型 VHL の786-0-WT 細胞を腎臓ならびに骨に同所移植を行い、腫瘍形成能と増殖様式を確認した。また、細胞外基質ならびに接着因子に関連する遺伝子のreal-time PCR を行った。腎臓と骨における腫瘍形成能はそれぞれ 786-0 細胞で70%と67%であり、786-0-m167 細胞で100%と89%であった。786-0-WT 細胞は、いずれの臓器でも腫瘍形成能を認めなかった。また、腫瘍体積中央値は786-0細胞で腎22mm^3、骨135mm^3であり、786-0-m167 細胞で腎 2051 mm^3、骨550mm^3であった。786-0 細胞の骨での腫瘍増殖形態は、いずれも骨外での増殖であり骨溶解像は認めなかった。786-0 細胞と比較して 786-0-m167 細胞において Integrinα4、Lamininα1 の mRNA が有意に高発現していた。786-0細胞と 786-0-m167 細胞では、腎臓ならびに骨腫瘍形成様式は異なり、細胞外基質に関連する遺伝子の発現に差がみられた。このことより VHL 遺伝子変異様式が腎細胞癌転移形成能に深く関わっていると結論付けた。

尚未澄清von Hippelgian（VHL）基因突变对肾脏零星透明细胞癌转移的影响。使用动物模型研究了VHL基因突变模式对形成转移能力的影响。基于VHL疾病的类型，基于VHL疾病的类型（一种遗传疾病）转染了三个突变的VHL基因表达载体和野生型VHL载体。 786-0细胞和786-0-M167细胞，其中167个精氨酸与2B型VHL疾病相对应，被色氨酸取代，在CDNA微阵列中具有明显不同的转基因表达模式。 786-0-WT细胞为786-0、786-0-M167，野生型VHL骨质植入肾脏和骨骼，以证实肿瘤性和增殖模式。此外，对与细胞外基质和粘附因子有关的基因进行实时PCR。 786-0细胞的肾脏和骨骼中的致瘤潜力分别为70％和67％，100％和89％的肿瘤势分别为786-0-M167细胞。在786-0-WT细胞的任何器官中均未观察到肿瘤性能力。 786-0细胞的中值肿瘤体积为22 mm^3，骨骼的肿瘤体积为135 mm^3，肾脏为2051 mm^3，骨头为550 mm^3，骨骼为786-0-M167细胞。骨骼中786-0细胞的肿瘤生长形式都没有骨外的增殖，也没有观察到骨溶解。与786-0细胞相比，在786-0-M167细胞中，整联蛋白α4和层粘连蛋白α1mRNA在786-0-M167细胞中的表达明显更高。肾脏和骨肿瘤发生模式在786-0和786-0-M167细胞之间有所不同，并且与细胞外基质相关的基因表达差异。这得出的结论是，VHL基因突变模式与形成肾细胞癌转移的能力深远有关。