フォンヒッペルリンドウ遺伝子が関与する腎細胞癌骨転移特異的遺伝子発現の解析

涉及 von Hippel Lindow 基因的肾细胞癌骨转移特异性基因表达分析

基本信息

批准号：
18791122
负责人：
辛島尚
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

散発性腎淡明細胞癌におけるフォンヒッペルリンドウ(VHL)遺伝子変異の転移への影響は解明されていない。VHL 遺伝子変異様式の転移形成能への影響を動物モデルを用いて検討した。VHL 蛋白の 104 番目のアミノ酸残基以降の機能欠失をもつ腎淡明細胞癌株786-0 をもとに、遺伝病であるVHL 病のタイプをもとに3種の変異 VHL 遺伝子発現ベクターと野生型 VHL ベクターを遺伝子導入した。786-0 細胞と VHL 病タイプ 2B に相当する167番目の Arginine がTryptophan に置換された 786-0-m167 細胞は、cDNA microarray で遣伝子発現パターンが大きく違った。786-0、786-0-m167、野生型 VHL の786-0-WT 細胞を腎臓ならびに骨に同所移植を行い、腫瘍形成能と増殖様式を確認した。また、細胞外基質ならびに接着因子に関連する遺伝子のreal-time PCR を行った。腎臓と骨における腫瘍形成能はそれぞれ 786-0 細胞で70%と67%であり、786-0-m167 細胞で100%と89%であった。786-0-WT 細胞は、いずれの臓器でも腫瘍形成能を認めなかった。また、腫瘍体積中央値は786-0細胞で腎22mm^3、骨135mm^3であり、786-0-m167 細胞で腎 2051 mm^3、骨550mm^3であった。786-0 細胞の骨での腫瘍増殖形態は、いずれも骨外での増殖であり骨溶解像は認めなかった。786-0 細胞と比較して 786-0-m167 細胞において Integrinα4、Lamininα1 の mRNA が有意に高発現していた。786-0細胞と 786-0-m167 細胞では、腎臓ならびに骨腫瘍形成様式は異なり、細胞外基質に関連する遺伝子の発現に差がみられた。このことより VHL 遺伝子変異様式が腎細胞癌転移形成能に深く関わっていると結論付けた。

尚未阐明Phon Hippellindow（VHL）基因突变在散发性肾浅细胞癌中的影响。使用动物模型检查了VHL基因突变样式对过渡形成能力的影响。基于786-0，在VHL蛋白的第104个氨基酸残基后具有功能缺失的肾脏Shyleid细胞癌，基于遗传疾病VHL疾病的类型和野生-Type VHL载体是VHL蛋白的三种类型的VHL基因表达载体。引入。 786-0细胞和VHL疾病2B（相当于2B）被色氨酸取代，cDNA微阵列在cDNA微阵列中具有显着差异。 786-0，786-0-M167，野生型VHL 786-0-WT细胞在肾脏和骨骼中移植，并确认了肿瘤形成能力和增殖方式。另外，进行了细胞外底物和粘合剂相关基因的实时PCR。 786-0细胞的肾脏和骨骼中的肿瘤形成分别为70％和67％，在786-0-M167细胞中的肿瘤形成分别为100％和89％。 786-0-WT细胞均未识别任何器官中的肿瘤形成。中位肿瘤体积为786-0细胞22mm^3，骨135mm^3，在786-0-M167细胞中为2051 mm^3，550mm^3骨头。骨头骨骼中786-0细胞中的肿瘤增殖都在骨头外，没有观察到骨溶解分辨率。与786-0细胞相比，在786-0-M167细胞中，整联蛋白α4和层粘连蛋白α1的mRNA显着高。 786-0细胞和786-0-M167细胞具有不同的肾脏和骨肿瘤形成形式，并且与细胞外底物相关的基因表达存在差异。他得出的结论是，VHL基因突变样式更深入地参与了肾细胞癌转移形成。