高親和性IgE受容体β鎖の機能解析とシグナル伝達の解明

高亲和力IgE受体β链的功能分析及信号转导

• 批准号: 18790709
• 负责人: 寺田 知新
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790709/
• 关键词: 高親和性IgE受容体; シグナル伝達; アレルギー; FcεRI; ERK

野生型FcεRI(高親和性IgE受容体)β鎖およびβ鎖C末端領域の6アミノ酸を欠失させたβ鎖変異体に加えてβ鎖C末端領域から1アミノ酸ずつ欠失させたβ鎖変異体(5種類)を,β鎖ノックアウトマウス由来の骨髄培養マスト細胞に導入し,FcεRIβ鎖C末端領域の機能解析を行った。また,β鎖C末端領域の43アミノ酸に関して野生型およびβ鎖変異体(6種類)とGSTとの融合タンパク質を作製し,構造学的側面から検討を加えた。1. 6アミノ酸を欠失させたβ鎖変異体では,脱顆粒反応の低下に加えて,IL-6やIL-13といったサイトカインの産生も著明に低下していた。さらにロイコトリエンなどのケミカルメディエーターの産生も著明に低下していることを明らかにした。一方,1アミノ酸ずつ欠失させたβ鎖変異体(5種類)ではいずれも野生型に比べて著明な変化は認められなかった。2. すべてのβ鎖変異体で,IgEとの結合能は正常で,マスト細胞のシグナル伝達に重要な役割を果たすLynやSyk,JNK(c-jun N-terminal kinases),p38などのリン酸化には有意差は認められなかった。FcεRIを介するシグナル伝達に重要であるCa^<2+> influxについても野生型とすべてのβ鎖変異体において有意差はなかった。3. β鎖C末端の6アミノ酸に会合する分子は同定されなかった。4. 円二色性分光法によりβ鎖C末端領域の二次構造を解析したが,野生型およびすべての変異体はα-helix構造をとり,すべての変異体で構造の崩壊やヘリックス含量の低下は認められなかった。

In addition to the β-chain mutants in which six amino acids in the β-chain and C-terminal regions of the β-chain and C-terminal regions of the β-chain mutants (5 types) in which one amino acid was deleted from the β-chain C-terminal region were introduced into bone marrow culture mast cells derived from beta-chain knockout mice, and functional analysis of the FcεRI进行β链C末端区域。此外，野生型和β链突变体之间的融合蛋白（6种类型）和GST在β-链C末端区域制备了43个氨基酸，并从结构方面进行了研究。 1。除了减少脱粒反应外，具有6个氨基酸的β链突变体还显示出细胞因子（例如IL-6和IL-13）的产生显着降低。此外，揭示了白细胞等化学介质的产生也显着降低。另一方面，与野生型相比，在任何一次被删除一种氨基酸的β链突变体（5种）中都没有观察到显着变化。 2。所有β-链突变体具有正常的IgE结合能力，并且在磷酸化中未观察到诸如Lyn，Syk，JNK（C-Jun N末端激酶）和p38的磷酸化差异，这在肥大细胞信号中起着重要作用。 Ca^<2+>涌入的所有野生型与所有β链突变体之间没有显着差异，这对于FcεRI介导的信号传导很重要。 3。在β链的C末端没有与六个氨基酸相关的分子。 4。通过圆形二分法光谱法分析了β链C末端区域的二级结构，但是在所有突变体中，野生型和所有突变体都有α-螺旋结构，并且在所有突变体中均未观察到螺旋含量的结构破坏或减少。

项目成果

Structural Study of FcεRI β Chain PolymorpLIsm by Circular Dichroism Spectroscopy

圆二色光谱法研究 FcεRI β 链多态性的结构

• 发表时间: 2007
• 期刊: ITELett.on Batt.NewTech.Med. 8(5)
• 作者: Shimada A,Taki T,Tabuchi K,Taketani T,Hanada R;Tawa A,Tsuchida M,Horibe K,Tsukimoto I,Hayashi Y;Kawamura M,Kaku H,Taketani T,Taki T,Shimada A,Hayashi Y;Horie A,Akimoto M,Tsumura H,Makishima M,Taketani T,Yamaguchi S,Honma Y;Taketani T;Horie A;Shimada A;Kawamura M;Tomoyoshi Terada
• 通讯作者: Tomoyoshi Terada

Structural Study of Mutated FcεRI β Chain ITAM by Circular Dichroism Spectroscopy

圆二色光谱法研究突变 FcεRI β 链 ITAM 的结构

• 发表时间: 2007
• 期刊: ITE Letters on Batteries, New Technologies ＆ Medicine 8(1)
• 作者: Shimada A,Taketani T,Kikuchi A,Hanada R;Arakawa H,Kimura H,Chen Y,Hayashi Y;Shimada A;Tomoyoshi Terada
• 通讯作者: Tomoyoshi Terada

Structulal study of mutated FcεRI β chain ITAM by Far-UV and Near-UV CD spectmscqpy

远紫外和近紫外 CD 光谱对突变 FcεRI β 链 ITAM 的结构研究

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimada A,Taketani T,Kikuchi A,Hanada R;Arakawa H,Kimura H,Chen Y,Hayashi Y;Shimada A;Tomoyoshi Terada;Takeshi Taketani;寺田 知新
• 通讯作者: 寺田 知新