高親和性IgE受容体β鎖の機能解析とシグナル伝達の解明

高亲和力IgE受体β链的功能分析及信号转导

• 批准号: 18790709
• 负责人: 寺田 知新
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790709/
• 关键词: 高親和性IgE受容体; シグナル伝達; アレルギー; FcεRI; ERK

野生型FcεRI(高親和性IgE受容体)β鎖およびβ鎖C末端領域の6アミノ酸を欠失させたβ鎖変異体に加えてβ鎖C末端領域から1アミノ酸ずつ欠失させたβ鎖変異体(5種類)を,β鎖ノックアウトマウス由来の骨髄培養マスト細胞に導入し,FcεRIβ鎖C末端領域の機能解析を行った。また,β鎖C末端領域の43アミノ酸に関して野生型およびβ鎖変異体(6種類)とGSTとの融合タンパク質を作製し,構造学的側面から検討を加えた。1. 6アミノ酸を欠失させたβ鎖変異体では,脱顆粒反応の低下に加えて,IL-6やIL-13といったサイトカインの産生も著明に低下していた。さらにロイコトリエンなどのケミカルメディエーターの産生も著明に低下していることを明らかにした。一方,1アミノ酸ずつ欠失させたβ鎖変異体(5種類)ではいずれも野生型に比べて著明な変化は認められなかった。2. すべてのβ鎖変異体で,IgEとの結合能は正常で,マスト細胞のシグナル伝達に重要な役割を果たすLynやSyk,JNK(c-jun N-terminal kinases),p38などのリン酸化には有意差は認められなかった。FcεRIを介するシグナル伝達に重要であるCa^<2+> influxについても野生型とすべてのβ鎖変異体において有意差はなかった。3. β鎖C末端の6アミノ酸に会合する分子は同定されなかった。4. 円二色性分光法によりβ鎖C末端領域の二次構造を解析したが,野生型およびすべての変異体はα-helix構造をとり,すべての変異体で構造の崩壊やヘリックス含量の低下は認められなかった。

除了野生型FcεRI（高亲和力IgE受体）β链和β链C末端区域删除了6个氨基酸的β链突变体之外，还增加了每个氨基酸都被删除的β链突变体。将β链C末端区域缺失的FcεRI（5种）导入β链敲除小鼠来源的培养骨髓肥大细胞中，分析FcεRIβ链C末端区域的功能。我们还构建了野生型和β链突变体（6种）与β链C末端区域43个氨基酸的GST的融合蛋白，并从结构角度对其进行了研究。 1.在删除了6个氨基酸的β链突变体中，不仅脱颗粒反应减少，而且IL-6和IL-13等细胞因子的产生也显着减少。此外，还发现白三烯等化学介质的产生显着减少。另一方面，删除了1个氨基酸的β链突变体（5种）与野生型相比，没有观察到显着的变化。 2.所有β链突变体均具有正常的IgE结合能力，以及在肥大细胞信号转导中起重要作用的Lyn、Syk、JNK（c-jun N端激酶）、p38等磷酸化无显着差异。观察到。在野生型和所有β链突变体之间，Ca ^ 2+ 流入也没有显着差异，这对于FcεRI介导的信号转导很重要。 3.未鉴定出与β链C端6个氨基酸相关的分子。 4.我们通过圆二色光谱分析了β链C端区域的二级结构，发现野生型和所有突变体均具有α螺旋结构，并且所有突变体均表现出结构塌陷，螺旋含量没有减少。被观察到。

项目成果

Structural Study of FcεRI β Chain PolymorpLIsm by Circular Dichroism Spectroscopy

圆二色光谱法研究 FcεRI β 链多态性的结构

• 发表时间: 2007
• 期刊: ITELett.on Batt.NewTech.Med. 8(5)
• 作者: Shimada A,Taki T,Tabuchi K,Taketani T,Hanada R;Tawa A,Tsuchida M,Horibe K,Tsukimoto I,Hayashi Y;Kawamura M,Kaku H,Taketani T,Taki T,Shimada A,Hayashi Y;Horie A,Akimoto M,Tsumura H,Makishima M,Taketani T,Yamaguchi S,Honma Y;Taketani T;Horie A;Shimada A;Kawamura M;Tomoyoshi Terada
• 通讯作者: Tomoyoshi Terada

Structural Study of Mutated FcεRI β Chain ITAM by Circular Dichroism Spectroscopy

圆二色光谱法研究突变 FcεRI β 链 ITAM 的结构

• 发表时间: 2007
• 期刊: ITE Letters on Batteries, New Technologies ＆ Medicine 8(1)
• 作者: Shimada A,Taketani T,Kikuchi A,Hanada R;Arakawa H,Kimura H,Chen Y,Hayashi Y;Shimada A;Tomoyoshi Terada
• 通讯作者: Tomoyoshi Terada

Structulal study of mutated FcεRI β chain ITAM by Far-UV and Near-UV CD spectmscqpy

远紫外和近紫外 CD 光谱对突变 FcεRI β 链 ITAM 的结构研究

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimada A,Taketani T,Kikuchi A,Hanada R;Arakawa H,Kimura H,Chen Y,Hayashi Y;Shimada A;Tomoyoshi Terada;Takeshi Taketani;寺田 知新
• 通讯作者: 寺田 知新