カルシウムセンサータンパク質Doc2による小胞輸送制御機構の解析

钙传感蛋白Doc2对囊泡运输控制机制的分析

• 批准号: 18790204
• 负责人: 東尾 浩典
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790204/
• 关键词: 小胞輸送; 調節性分泌; カルシウムセンサー; マスト細胞; リソソーム

Doc2.はCa^<2+>およびリン脂質結合領域(C2領域)を2つ有するタンパク質である。Doc2アイソフォームのうち、Doc2αは脳特異的に発現しており、シナプス小胞の開口放出に必須なタンパク質Munc13-1と結合し、神経興奮を感知し分泌を制御するCa^<2+>センサーとして働くことが知られている。一方、脳を含む様々な組織で発現しているDoc2βの機能は知られていない。しかし、Doc2αとのアナロジーから、Doc2βも神経細胞以外で分泌経路、とりわけ調節性分泌において働いている可能性がある。本研究では、抗原刺激によりヒスタミン等の生理活性物質を放出するマスト細胞に着目しDoc2の関与を検討した。意外にも、ラット由来マスト細胞株RBL-2H3およびマウス骨髄由来マスト細胞では、Doc2βではなくDoc2αが発現していた。このDoc2αの発現を抑制すると、あるいはDoc2αの欠失変異体を発現させるとRBL-2H3細胞の調節性分泌は阻害された。また、Doc2α欠損マウスの骨髄由来マスト細胞の調節性分泌は著しく低下していた。近年、血小板・細胞障害性T細胞・マスト細胞に発現しMunc13-1と相同性を有するタンパク質Munc13-4が、これらの細胞における調節性分泌に働くことが明らかになった。このMunc13-4とDoc2αとの関係をRBL-2H3細胞で検討し、両者が分泌顆粒に共局在し結合していること、またDoc2α欠失変異体発現による調節性分泌の阻害がMunc13-4の共発現によりレスキューされることを見出した。本研究によって初めて神経細胞以外でのDoc2の関与する小胞輸送経路とその制御メカニズムが明らかにしたこと、更に、これがマスト細胞の調節性分泌に働くCa^<2+>センサーの初めての同定であったことから、当初の研究目的は十分に達成できたと考えられる。

DOC2是一种蛋白质，具有两个Ca^<2+>和两个磷脂结合区域（C2区域）。在DOC2同工型中，DOC2α在大脑特异性中表达，并与蛋白质Munc13-1结合，这对于打开突触质的开放至关重要，并感受到神经切开术和控制分泌。另一方面，在包括大脑在内的各种组织中表达的DOC2β的功能尚不清楚。但是，从与DOC2α的类比中，DOC2β可能在神经细胞以外的其他分泌途径中起作用，尤其是协调的分泌。在这项研究中，我们专注于释放生理和活性物质（例如抗原刺激）等生理和活性物质的肥大细胞，并检查了DOC2的参与。令人惊讶的是，在大鼠衍生的肥大细胞储备RBL-2H3和小鼠骨髓衍生的肥大细胞中，DOC2α代替DOC2β。当抑制DOC2α的表达或表达DOC2α的丢失变量时，抑制RBL-2H3细胞的配位分泌。此外，从DOC2α缺陷小鼠的骨髓中得出的肥大细胞的分泌显着降低。近年来，已经揭示了在血小板，细胞疾病T细胞和肥大细胞中表达的蛋白Munc13-4，并与Munc13-1同源，作用于这些细胞中的分泌。 Munc13-4和Doc2α之间的关系由RBL-2H3细胞检查，两者与分泌颗粒相关，并抑制由于DOC2α删除的动物表达MUNC13-4而抑制了sozing分泌。这项研究揭示了除神经细胞以外的DOC2及其控制机制的第一件事，这是CA^<2+>传感器的首次识别，可用于肥大细胞的分泌。最初的研究目的是完全实现的。

项目成果

接着分子のリサイクリング

粘附分子回收

• 发表时间: 2006
• 期刊: 生体の科学 57
• 作者: Terai;T.;西村 範行
• 通讯作者: 西村 範行